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中国特有小型猪内源性反转录病毒的检测与特性分析

缩略词表(Abbreviation)第1-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-15页
前言第15-18页
第一部分 中国特有小型猪内源性反转录病毒拷贝数的检测第18-26页
 1 材料与方法第18-21页
   ·材料第18-19页
   ·PBMC基因组DNA的制备第19-20页
   ·标准品质粒的构建第20页
   ·实时定量PCR检测pol基因的拷贝数第20-21页
 2 结果第21-24页
   ·标准品质粒的构建与鉴定第21页
   ·标准曲线的建立第21-22页
   ·样品中pol基因拷贝数的测定第22-24页
 3 讨论第24-25页
 4 小结第25-26页
第二部分 五指山猪内源性反转录病毒前病毒全基因克隆与序列分析第26-35页
 1 材料与方法第26-30页
   ·材料第26-27页
   ·PBMC基因组DNA的制备第27页
   ·引物的设计与合成与PCR扩增第27页
   ·PCR产物克隆与鉴定第27-29页
   ·序列测定与分析第29-30页
 2 结果第30-33页
   ·PERV-WZSP前病毒DNA的克隆与鉴定结果第30-31页
   ·PERV-WZSP前病毒DNA的序列测定与初步分析第31页
   ·PERV-WZSP前病毒DNA的序列比对与进化分析第31-33页
 3 讨论第33-34页
 4 小结第34-35页
第三部分 嗜人性PERV感染人源细胞模型的构建与鉴定第35-50页
 1 材料与方法第35-42页
   ·材料第35-36页
   ·细胞的共培养第36页
   ·PCR鉴定第36-37页
   ·RT-PCR鉴定第37-38页
   ·细胞总蛋白的制备第38页
   ·抗Gag单克隆抗体的制备与纯化第38-39页
   ·SDS-PAGE与Western Blot鉴定第39-40页
   ·反转录酶活性检测第40-42页
 2 结果第42-48页
   ·细胞的共培养结果第42页
   ·PCR鉴定结果第42-44页
   ·RT-PCR鉴定结果第44页
   ·抗PERV-Gag单克隆抗体的制备与纯化结果第44-45页
   ·SDS-PAGE与Western Blot鉴定结果第45-46页
   ·反转录酶活性检测结果第46-48页
 3 讨论第48-49页
 4 小结第49-50页
第四部分 嗜人性PERV感染人源细胞后的蛋白质组学分析第50-69页
 1 材料与方法第50-56页
   ·材料第50-52页
   ·蛋白质定量第52页
   ·双向凝胶电泳第52-54页
   ·胶内酶切与质谱鉴定第54页
   ·实时定量RT-PCR验证差异蛋白的表达第54-56页
   ·Western Blot验证差异蛋白的表达第56页
 2 结果第56-65页
   ·双向凝胶电泳结果第56-59页
   ·质谱鉴定结果第59-62页
   ·差异蛋白质斑点列表第62-63页
   ·实时定量RT-PCR验证差异蛋白的表达第63-64页
   ·Western Blot验证差异表达蛋白质结果第64-65页
 3 讨论第65-67页
 4 小结第67-69页
结论第69-70页
参考文献第70-78页
附录第78-79页
个人简历第79-80页
致谢第80页

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