| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-18页 |
| ·14-3-3 蛋白家族的种类 | 第11页 |
| ·14-3-3 蛋白分子结构 | 第11-12页 |
| ·14-3-3 蛋白质的主要功能 | 第12-13页 |
| ·功能与表达的多样性 | 第12-13页 |
| ·蛋白质－蛋白质相互作用 | 第13页 |
| ·与蛋白激酶构成复合体 | 第13页 |
| ·与转录因子相互作用 | 第13页 |
| ·14-3-3 蛋白对植物各种生理活动过程的调控 | 第13-16页 |
| ·14-3-3 蛋白的表达与应用 | 第16页 |
| ·14-3-3 蛋白的表达 | 第16页 |
| ·植物14-3-3 蛋白在作物遗传育种的应用 | 第16页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 玉米14-3-3 蛋白克隆表达及纯化研究 | 第18-24页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·引物的设计和合成 | 第18页 |
| ·玉米胚乳 RNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·玉米籽粒胚乳cDNA 的合成 | 第19页 |
| ·基因 GF14-12 的 PCR 扩增 | 第19-20页 |
| ·用 OMEGA 胶回收试剂盒回收 PCR 产物 | 第20页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第20页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的提取 | 第21页 |
| ·双酶切验证重组质粒 | 第21页 |
| ·外源基因诱导表达 | 第21-22页 |
| ·结果与讨论 | 第22-24页 |
| ·玉米籽粒胚乳总 RNA 的提取 | 第22页 |
| ·GF14-12 基因的 RT-PCR | 第22-23页 |
| ·GF14-12 基因重组表达载体的构建 | 第23页 |
| ·目的蛋白的表达、分析及纯化 | 第23-24页 |
| 第三章 14-3-3 诱饵载体的构建 | 第24-30页 |
| ·实验试剂 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·诱饵载体构建 | 第24-25页 |
| ·连接产物转化 | 第25页 |
| ·PCR 鉴定阳性转化子 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的提取及限制性酶切鉴定 | 第26页 |
| ·融合蛋白的自转录激活特性与毒性检测 | 第26-27页 |
| ·利用3-AT 消除背景生长试验 | 第27-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-30页 |
| ·诱饵载体构建 | 第28页 |
| ·融合蛋白的转录激活特性与毒性分析 | 第28-29页 |
| ·3-AT 消除背景生长 | 第29-30页 |
| 第四章 酵母双杂交文库的筛选 | 第30-36页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·用酵母杂交的方法验证互作的蛋白 | 第30页 |
| ·互作的表达蛋白转化子的筛选 | 第30-32页 |
| ·挽救文库cDNA 的插入片段—菌落 PCR 克隆筛选法 | 第32-33页 |
| ·候选阳性克隆的序列分析 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-36页 |
| ·酵母双杂交文库的建立和筛选 | 第34页 |
| ·菌落 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·候选目的基因的测序结果分析 | 第35-36页 |
| 第五章 讨论及结论 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简历 | 第43页 |