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基因串联与β-甘露聚糖酶基因高效表达体系构建

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-19页
   ·甘露聚糖第11-13页
     ·甘露聚糖的定义第11-12页
     ·甘露聚糖的分布及应用第12-13页
   ·甘露聚糖酶第13-17页
     ·甘露聚糖酶系第13页
     ·甘露聚糖酶的来源第13页
     ·甘露聚糖酶的酶学性质第13-14页
     ·甘露聚糖酶的分子生物学第14-15页
     ·甘露聚糖酶的应用第15-17页
   ·S-层蛋白质第17-18页
     ·S-层蛋白的结构第17页
     ·S-层蛋白的分子生物学第17-18页
   ·研究的目的和意义第18-19页
第二章 甘露聚糖酶基因和木聚糖酶基因串联研究第19-30页
   ·试验材料第19-21页
     ·菌株和载体第19页
     ·工具酶及主要试剂第19页
     ·常用溶液及缓冲液第19-20页
     ·培养基第20页
     ·仪器第20-21页
   ·试验方法第21-25页
     ·菌种的活化与纯化第21页
     ·CXJZ95-198、CXJZ11-01 基因组DNA 的提取第21-22页
     ·引物设计第22页
     ·融合PCR第22-23页
     ·基因串联体的克隆第23页
     ·阳性克隆子的筛选与鉴定第23-24页
     ·重组菌的酶活测定第24-25页
   ·试验结果第25-28页
     ·CXJZ95-198 和CXJZ11-01 基因组DNA 的检测第25页
     ·木聚糖酶基因及甘露聚糖酶基因的PCR 扩增第25-26页
     ·融合PCR 构建木聚糖酶双基因串联体第26页
     ·蓝白斑筛选阳性克隆第26-27页
     ·重组质粒的PCR 鉴定第27-28页
     ·选择性平板鉴定阳性克隆第28页
     ·重组菌的木聚糖酶酶活测定第28页
   ·结论与讨论第28-30页
     ·结论第28-29页
     ·讨论第29-30页
第三章 SOEing 法构建β-甘露聚糖酶高效表达体系第30-45页
   ·试验材料第30-31页
     ·菌株和载体第30页
     ·工具酶及主要试剂第30页
     ·常用溶液及缓冲液第30-31页
   ·试验方法第31-40页
     ·CXJZ95-198 和苏云金芽孢杆菌CTC 基因组DNA 的提取第31页
     ·引物设计第31页
     ·PCR 扩增第31-32页
     ·SOEing 法构建slp-man 基因串联体第32-33页
     ·slp -man 基因串联体的克隆第33-35页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第35-36页
     ·高效表达载体的构建第36-38页
     ·重组甘露聚糖酶活力测定第38-40页
   ·试验结果第40-43页
     ·S-层蛋白启动子序列及β-甘露聚糖酶基因ORF 的扩增第40页
     ·SOEing 法构建slp –man 基因串联体第40-41页
     ·slp –man 基因串联体的克隆与鉴定第41-42页
     ·重组表达载体pET-28a+/slp –man 的PCR 鉴定第42页
     ·选择性平板鉴定阳性克隆第42-43页
     ·重组菌β-甘露聚糖酶的活性测定第43页
     ·slp –man 基因串联体DNA 序列测定及分析结果第43页
   ·结论与讨论第43-45页
     ·结论第43页
     ·讨论第43-45页
第四章 全文结论第45-46页
   ·双基因串联体构建及其克隆取得初步成功第45页
   ·β-甘露聚糖酶高效表达载体构建成功第45-46页
参考文献第46-52页
致谢第52-53页
作者简历第53页

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