| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-24页 |
| 1 Mx 概述 | 第13-19页 |
| ·Mx 蛋白的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·不同动物的 Mx 蛋白 | 第14-16页 |
| ·小鼠和大鼠的Mx 蛋白 | 第14页 |
| ·人的Mx 蛋白 | 第14页 |
| ·禽类的 Mx 蛋白 | 第14-16页 |
| ·其它动物的 Mx 蛋白 | 第16页 |
| ·Mx 蛋白的抗病毒机制 | 第16-18页 |
| ·Mx 蛋白抗病毒研究进展 | 第18页 |
| ·Mx 蛋白的应用 | 第18-19页 |
| 2 转基因动物研究进展 | 第19-23页 |
| ·转基因动物的制备制备方法 | 第19-21页 |
| ·显微注射法 | 第19-20页 |
| ·病毒载体法 | 第20页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第20页 |
| ·精子载体法 | 第20-21页 |
| ·动物克隆技术 | 第21页 |
| ·转基因动物的应用 | 第21-23页 |
| ·转基因动物在医药领域的应用 | 第22页 |
| ·转基因动物在农业领域的应用 | 第22-23页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 鸡 Mx 基因的表达、纯化及其抗血清的制备 | 第24-32页 |
| 1 材料 | 第25页 |
| ·细胞、菌株、载体和试验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-27页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增 Mx 基因 | 第26页 |
| ·重组质粒的构建 | 第26页 |
| ·Mx 蛋白的原核表达、鉴定 | 第26页 |
| ·蛋白回收纯化 | 第26页 |
| ·兔抗 Mx 抗体的制备 | 第26-27页 |
| ·Western blot 检测抗血清 | 第27页 |
| ·质粒转染与间接免疫荧光 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-30页 |
| ·Mx 基因的PCR 扩增 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·重组基因在大肠杆菌中的表达与鉴定 | 第28页 |
| ·Mx 蛋白的Western blot 分析 | 第28-30页 |
| ·间接免疫荧光 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 Mx 转基因小鼠模型抗禽流感病毒作用的研究 | 第32-45页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| ·试验动物和病毒 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-37页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·小鼠尾基因组DNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增 Mx 基因和GFP 基因 | 第34页 |
| ·转基因小鼠的 Southern Blotting 检测 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR 检测目的基因的转录 | 第35页 |
| ·用间接免疫荧光检测目的蛋白在转基因小鼠组织器官中的表达 | 第35-36页 |
| ·Mx 转基因小鼠的抗禽流感病毒试验 | 第36页 |
| ·小鼠肺组织总 RNA 的提取和 cDNA 的制备 | 第36页 |
| ·Real-time PCR 测定小鼠肺组织中的病毒含量 | 第36-37页 |
| ·Real-time PCR 标准品的制备及标准曲线的制作 | 第36-37页 |
| ·Real-time PCR 测定小鼠肺组织中禽流感病毒 PB2 基因的拷贝数 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| ·Mx 转基因小鼠的 PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·Southern Blotting | 第38页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第38-39页 |
| ·转基因小鼠中 Mx 蛋白表达检测 | 第39页 |
| ·病理组织观察 | 第39-40页 |
| ·Real-time PCR 定量结果 | 第40-41页 |
| ·标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| ·Real-time PCR 定量 PB2 | 第41页 |
| ·攻毒后小鼠体重变化及存活情况结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
