| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 插图和附表清单 | 第11-13页 |
| 縮略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| ·信号转导途径与逆境胁迫的应答 | 第14-20页 |
| ·钙信号传导结合蛋白 | 第14-18页 |
| ·脱落酸信号通路与逆境胁迫应答 | 第18-19页 |
| ·14-3-3 | 第19-20页 |
| ·渗透保护剂 | 第20-22页 |
| ·活性氧与抗氧化系统 | 第22-25页 |
| ·活性氧 | 第22页 |
| ·抗氧化系统 | 第22-23页 |
| ·GST在植物抵抗逆境胁迫中作用的研究进展 | 第23-25页 |
| ·本课题的研究意义与目的 | 第25-26页 |
| 第二章 火把梨谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆与分析 | 第26-39页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·缓冲液和培养基配方 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·RNA提取及mRNA分离 | 第27页 |
| ·5'RACE | 第27页 |
| ·T-A克隆 | 第27-28页 |
| ·全长cDNA的克隆以及生物信息学分析 | 第28页 |
| ·RT-PCR | 第28-29页 |
| ·PCR反应 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-37页 |
| ·总RNA提取及mRNA分离 | 第30-31页 |
| ·PpGST全长cDNA的获得 | 第31-33页 |
| ·生物信息学分析 | 第33-37页 |
| ·PpGST在火把梨中的表达分析 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 PpGST植物表达载体构建及PpGST转基因烟草的筛选 | 第39-48页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·材料和试剂 | 第39-40页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·菌株和载体 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·缓冲液和培养基配方 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·CTAB法提取基因组DNA | 第40-41页 |
| ·SDS碱裂解法提取并纯化质粒 | 第41页 |
| ·酶切反应 | 第41-42页 |
| ·胶回收 | 第42页 |
| ·DNA连接反应 | 第42页 |
| ·制各农杆菌感受态细胞 | 第42页 |
| ·CaCl_2冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·PCR反应 | 第43页 |
| ·农杆菌活化 | 第43页 |
| ·叶盘转化法侵染烟草叶片 | 第43页 |
| ·转基因烟草的筛选 | 第43页 |
| ·转基因烟草的表达分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·PpGST基因植物表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·PpGST植物表达载体转化根癌农杆菌 | 第45-46页 |
| ·PpGST转基因烟草的获得 | 第46页 |
| ·转基因植株的基因组PCR检测 | 第46页 |
| ·转基因烟草中PpGST的表达分析 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 PpGST功能分析 | 第48-63页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·材料和试剂 | 第48页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·实验材料培养 | 第48页 |
| ·材料处理 | 第48-49页 |
| ·GST活性测定 | 第49页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第49页 |
| ·活性氧(ROS)含量测定 | 第49-50页 |
| ·Cd~(2+)含量测定 | 第50页 |
| ·数据处理 | 第50页 |
| ·PpGST表达的定量分析 | 第50-51页 |
| ·胁迫下烟草种子发芽率测定材料处理 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-61页 |
| ·干旱胁迫 | 第51-55页 |
| ·镉胁迫 | 第55-57页 |
| ·NaCl胁迫 | 第57-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 结论与展望 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63页 |
| ·展望 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 附录A Hoagland营养液配方 | 第76-77页 |
| 附录B 攻读硕士期间发表论文及申报专利目录 | 第77页 |