中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
中文文摘 | 第6-9页 |
目录 | 第9-13页 |
绪论 | 第13-33页 |
第一节 课题背景 | 第13-19页 |
·果胶 | 第13-14页 |
·果胶酶 | 第14-18页 |
·果胶酶的应用 | 第18-19页 |
第二节 果胶裂解酶 | 第19-25页 |
·酶活测定方法 | 第19-20页 |
·果胶裂解酶基因家族 | 第20页 |
·果胶裂解酶基因的启动子分析 | 第20-21页 |
·果胶裂解酶基因的表达与定位 | 第21-22页 |
·果胶裂解酶的纯化 | 第22-23页 |
·果胶裂解酶的酶学性质及其晶体结构 | 第23-24页 |
·果胶裂解酶的应用 | 第24-25页 |
第三节 提高果胶酶产量和活性的方法 | 第25-30页 |
·果胶酶基因的微生物来源与菌种诱变 | 第25-26页 |
·果胶酶发酵工程的研究 | 第26-27页 |
·果胶酶基因异源表达系统 | 第27-30页 |
第四节 课题的研究内容、意义及其创新点 | 第30-33页 |
·课题研究内容 | 第30-31页 |
·课题研究的目的与意义 | 第31页 |
·课题研究的创新点 | 第31-33页 |
第一章 果胶酶高产菌株EIM-6的筛选及其分子鉴定 | 第33-43页 |
第一节 材料与方法 | 第33-39页 |
·材料 | 第33-35页 |
·实验方法 | 第35-39页 |
第二节 结果与分析 | 第39-42页 |
·果胶酶产生菌EIM-6的筛选 | 第39页 |
·菌种的形态鉴定 | 第39页 |
·ITS rDNA基因的扩增与鉴定 | 第39-40页 |
·ITSrDNA基因的同源性分析 | 第40-41页 |
·ITS rRNA基因序列测定及系统进化树分析 | 第41-42页 |
第三节 小结与讨论 | 第42-43页 |
第二章 响应面法优化EIM-6液体发酵产酶条件 | 第43-63页 |
第一节 材料与方法 | 第43-48页 |
·材料 | 第43-45页 |
·实验方法 | 第45-48页 |
第二节 结果与分析 | 第48-62页 |
·果胶酶活力曲线 | 第48页 |
·单因素试验优化 | 第48-49页 |
·Plackett-Burman试验设计 | 第49-52页 |
·最陡坡试验 | 第52-53页 |
·中心组合设计试验结果及响应面模拟 | 第53-54页 |
·二次响应面回归模型的建立 | 第54-57页 |
·最优发酵配方组合的验证 | 第57-58页 |
·发酵流程与结果 | 第58-60页 |
·工厂发酵成品果胶酶的初步纯化 | 第60-61页 |
·SDS-PAGE鉴定与酶活测定 | 第61-62页 |
第三节 小结与讨论 | 第62-63页 |
第三章 果胶裂解酶基因的克隆及其结构分析 | 第63-75页 |
第一节 材料与方法 | 第63-67页 |
·材料 | 第63-64页 |
·实验方法 | 第64-67页 |
第二节 结果与分析 | 第67-74页 |
·果胶裂解酶A基因的PCR扩增 | 第67-68页 |
·果胶裂解酶基因及其氨基酸序列分析 | 第68-70页 |
·果胶裂解酶氨基酸序列的聚类分析 | 第70页 |
·果胶裂解酶氨基酸序列的同源性比较 | 第70-71页 |
·PLA的信号肽预测分析 | 第71-72页 |
·PLA的理化表征分析 | 第72页 |
·PLA的疏水性和跨膜分析 | 第72-73页 |
·PLA的同源模建分析 | 第73-74页 |
第三节 小结与讨论 | 第74-75页 |
第四章 黑曲霉EIM-6果胶裂解酶基因的异源表达 | 第75-93页 |
第一节 材料与方法 | 第75-84页 |
·材料 | 第75-77页 |
·实验方法 | 第77-84页 |
第二节 结果与分析 | 第84-91页 |
·果胶裂解酶编码基因的亚克隆 | 第84页 |
·果胶裂解酶pelA在大肠杆菌中的表达 | 第84-86页 |
·果胶裂解酶pelA在毕赤酵母中的表达 | 第86-91页 |
第三节 小结与讨论 | 第91-93页 |
第五章 结论 | 第93-95页 |
附录 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-105页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第105-107页 |
致谢 | 第107-109页 |
个人简历 | 第109页 |