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黑曲霉EIM-6果胶裂解酶基因的克隆与表达

中文摘要第1-4页
Abstract第4-6页
中文文摘第6-9页
目录第9-13页
绪论第13-33页
 第一节 课题背景第13-19页
   ·果胶第13-14页
   ·果胶酶第14-18页
   ·果胶酶的应用第18-19页
 第二节 果胶裂解酶第19-25页
   ·酶活测定方法第19-20页
   ·果胶裂解酶基因家族第20页
   ·果胶裂解酶基因的启动子分析第20-21页
   ·果胶裂解酶基因的表达与定位第21-22页
   ·果胶裂解酶的纯化第22-23页
   ·果胶裂解酶的酶学性质及其晶体结构第23-24页
   ·果胶裂解酶的应用第24-25页
 第三节 提高果胶酶产量和活性的方法第25-30页
   ·果胶酶基因的微生物来源与菌种诱变第25-26页
   ·果胶酶发酵工程的研究第26-27页
   ·果胶酶基因异源表达系统第27-30页
 第四节 课题的研究内容、意义及其创新点第30-33页
   ·课题研究内容第30-31页
   ·课题研究的目的与意义第31页
   ·课题研究的创新点第31-33页
第一章 果胶酶高产菌株EIM-6的筛选及其分子鉴定第33-43页
 第一节 材料与方法第33-39页
   ·材料第33-35页
   ·实验方法第35-39页
 第二节 结果与分析第39-42页
   ·果胶酶产生菌EIM-6的筛选第39页
   ·菌种的形态鉴定第39页
   ·ITS rDNA基因的扩增与鉴定第39-40页
   ·ITSrDNA基因的同源性分析第40-41页
   ·ITS rRNA基因序列测定及系统进化树分析第41-42页
 第三节 小结与讨论第42-43页
第二章 响应面法优化EIM-6液体发酵产酶条件第43-63页
 第一节 材料与方法第43-48页
   ·材料第43-45页
   ·实验方法第45-48页
 第二节 结果与分析第48-62页
   ·果胶酶活力曲线第48页
   ·单因素试验优化第48-49页
   ·Plackett-Burman试验设计第49-52页
   ·最陡坡试验第52-53页
   ·中心组合设计试验结果及响应面模拟第53-54页
   ·二次响应面回归模型的建立第54-57页
   ·最优发酵配方组合的验证第57-58页
   ·发酵流程与结果第58-60页
   ·工厂发酵成品果胶酶的初步纯化第60-61页
   ·SDS-PAGE鉴定与酶活测定第61-62页
 第三节 小结与讨论第62-63页
第三章 果胶裂解酶基因的克隆及其结构分析第63-75页
 第一节 材料与方法第63-67页
   ·材料第63-64页
   ·实验方法第64-67页
 第二节 结果与分析第67-74页
   ·果胶裂解酶A基因的PCR扩增第67-68页
   ·果胶裂解酶基因及其氨基酸序列分析第68-70页
   ·果胶裂解酶氨基酸序列的聚类分析第70页
   ·果胶裂解酶氨基酸序列的同源性比较第70-71页
   ·PLA的信号肽预测分析第71-72页
   ·PLA的理化表征分析第72页
   ·PLA的疏水性和跨膜分析第72-73页
   ·PLA的同源模建分析第73-74页
 第三节 小结与讨论第74-75页
第四章 黑曲霉EIM-6果胶裂解酶基因的异源表达第75-93页
 第一节 材料与方法第75-84页
   ·材料第75-77页
   ·实验方法第77-84页
 第二节 结果与分析第84-91页
   ·果胶裂解酶编码基因的亚克隆第84页
   ·果胶裂解酶pelA在大肠杆菌中的表达第84-86页
   ·果胶裂解酶pelA在毕赤酵母中的表达第86-91页
 第三节 小结与讨论第91-93页
第五章 结论第93-95页
附录第95-97页
参考文献第97-105页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第105-107页
致谢第107-109页
个人简历第109页

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