| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 中文文摘 | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-15页 |
| 绪论 | 第15-37页 |
| 1. 藻的分类 | 第15-18页 |
| 2. 藻类脂肪酸合成的影响因素 | 第18-25页 |
| ·物理因子 | 第19-20页 |
| ·温度 | 第19页 |
| ·光照强度 | 第19页 |
| ·CO_2 | 第19-20页 |
| ·紫外线UV-B、激光、红外线 | 第20页 |
| ·超声波 | 第20页 |
| ·微波 | 第20页 |
| ·营养盐 | 第20-21页 |
| ·N | 第20-21页 |
| ·P | 第21页 |
| ·盐浓度(NaCl、KCl等) | 第21页 |
| ·金属离子 | 第21-24页 |
| ·硒、锗 | 第21-22页 |
| ·铜、锌 | 第22-23页 |
| ·铬 | 第23页 |
| ·铁 | 第23-24页 |
| ·生长抑制剂 | 第24-25页 |
| 3. 藻类长链不饱和脂肪酸(LCPUFA)谢调控研究进展 | 第25-35页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶的特征 | 第25-27页 |
| ·藻类脂肪酸脱饱和酶的克隆 | 第27-28页 |
| ·藻类脂肪酸脱饱和酶的表达 | 第28-33页 |
| ·常用的原核表达体系 | 第29页 |
| ·常用的真核表达体系 | 第29-33页 |
| ·细胞水平PUFA代谢调控研究 | 第33-34页 |
| ·分子水平PUFA代谢调控研究 | 第34-35页 |
| 4. 本论文的研究意义及研究内容 | 第35-37页 |
| ·研究意义 | 第35-36页 |
| ·研究内容 | 第36-37页 |
| 第1章 提取及培养条件对紫球藻AA与EPA的影响 | 第37-45页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·藻种 | 第37页 |
| ·培养基及培养条件 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·脂肪酸的测定方法比较 | 第37-38页 |
| ·不同的预处理方法对脂肪酸测定的影响 | 第38页 |
| ·不同提取溶剂对脂肪酸提取的影响 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-42页 |
| ·不同的预处理方法对脂肪酸组成的影响 | 第39-40页 |
| ·不同提取溶剂对脂肪酸组成(AA与EPA)的影响 | 第40-41页 |
| ·紫球藻培养时期的不饱和脂肪酸组成的变化 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 第2章 Fe~(3+)对紫球藻生长及脂肪酸组成的影响 | 第45-67页 |
| ·材料与方法 | 第45-47页 |
| ·藻种 | 第45页 |
| ·培养基及培养条件 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·培养方法 | 第46页 |
| ·细胞计数 | 第46页 |
| ·细胞密度的计算 | 第46页 |
| ·比生长速率的测定 | 第46页 |
| ·胞外多糖的测定方法 | 第46页 |
| ·β-胡萝卜素的测定方法 | 第46-47页 |
| ·藻胆蛋白的测定方法 | 第47页 |
| ·碱性磷酸酶(AKP)的测定 | 第47页 |
| ·总脂质的测定 | 第47页 |
| ·脂肪酸甲酯的测定 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-62页 |
| ·细胞密度与吸光值标准曲线的绘制 | 第48-49页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻生长的影响 | 第49-51页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻胞外多糖的影响 | 第51-52页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻细胞色素的影响 | 第52-53页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻藻胆蛋白的影响 | 第53-55页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻脂质含量的影响 | 第55-56页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻脂肪酸中脂肪酸组成的影响 | 第56-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·本章小结 | 第65-67页 |
| 第3章 Fe~(3+)对紫球藻抗氧化能力及细胞膜功能的影响 | 第67-81页 |
| ·材料与方法 | 第67页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-69页 |
| ·总抗氧化能力(T-AOC)的测定 | 第67-68页 |
| ·抗超氧阴离子自由基(O~(-2))能力的测定 | 第68页 |
| ·抗羟自由基(OH~-)能力的测定 | 第68页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)活性的测定 | 第68页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第68页 |
| ·过氧化物酶(POD)的测定 | 第68-69页 |
| ·谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的测定 | 第69页 |
| ·还原型谷胱甘肽(GSH)的测定 | 第69页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第69页 |
| ·ATP酶活性的测定 | 第69页 |
| ·蛋白含量的测定(考马斯亮兰法) | 第69页 |
| ·实验结果 | 第69-77页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻抗氧化能力的影响 | 第69-71页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻抗氧化防御系统的影响 | 第71-75页 |
| ·对酶促与非酶促体系的影响 | 第71-75页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻细胞膜功能的影响 | 第75-77页 |
| ·对紫球藻丙二醛(MDA)含量的影响 | 第75-76页 |
| ·对紫球ATP酶活性的影响 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·本章小结 | 第79-81页 |
| 第4章 紫球藻EPA生物合成途径脱饱和酶的克隆与分析 | 第81-103页 |
| ·材料与方法 | 第81-82页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·藻种 | 第81页 |
| ·培养基及培养条件 | 第81页 |
| ·主要试剂 | 第81-82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82-88页 |
| ·总RNA的提取 | 第82页 |
| ·RNA完整性和均一性分析 | 第82-83页 |
| ·反转录 | 第83页 |
| ·引物合成和测序 | 第83-84页 |
| ·脱饱和酶基因部分cDNA序列的RT-PCR扩增 | 第84-86页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第84-85页 |
| ·连接与转化 | 第85-86页 |
| ·测序与分析 | 第86页 |
| ·3'cDNA末端扩增(3'RACE) | 第86-87页 |
| ·5'cDNA末端扩增(5'RACE) | 第87-88页 |
| ·全长cDNA序列的扩增 | 第88页 |
| ·序列分析软件 | 第88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-101页 |
| ·总RNA的提取和检测 | 第88-89页 |
| ·部分cDNA序列的RT-PCR扩增及其序列分析 | 第89-90页 |
| ·3'和5'cDNA末端序列的扩增及其序列分析 | 第90-92页 |
| ·序列分析 | 第92-97页 |
| ·脱饱和酶蛋白跨膜分析 | 第97-99页 |
| ·脱饱和酶疏水性分析 | 第99-100页 |
| ·脱饱和酶蛋白空间结构预测 | 第100-101页 |
| ·本章小结 | 第101-103页 |
| 第5章 藻类△6脱饱和酶基因密码子偏好性分析 | 第103-117页 |
| ·实验材料与方法 | 第103-105页 |
| ·数据来源 | 第104页 |
| ·软件和程序 | 第104页 |
| ·方法 | 第104-105页 |
| ·选取序列 | 第104-105页 |
| ·密码子分析方法 | 第105页 |
| ·对基因密码子使用概率进行聚类分析 | 第105页 |
| ·藻类△6脱饱和酶基因与大肠杆菌、酵母、拟南芥的密码子偏好特征比较 | 第105页 |
| ·结果与讨论 | 第105-116页 |
| ·藻类△6脱饱和酶基因同义密码子使用模式 | 第106-111页 |
| ·密码子使用模式的影响因素 | 第109-111页 |
| ·密码子偏好性的物种特异性 | 第111-112页 |
| ·藻类△6基因与大肠杆菌、酵母、拟南芥的密码子偏好特征比较 | 第112-116页 |
| ·结论 | 第116-117页 |
| 第6章 结论 | 第117-120页 |
| ·提取及培养条件对紫球藻AA与EPA的影响 | 第117页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻生长及脂肪酸组成的影响 | 第117页 |
| ·Fe~(3+)对紫球藻抗氧化能力及细胞膜功能的影响 | 第117-118页 |
| ·紫球藻EPA生物合成途径脱饱和酶的克隆与分析 | 第118页 |
| ·藻类△6脱饱和酶基因密码子偏好性分析 | 第118页 |
| ·创新点 | 第118页 |
| ·展望 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
