| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-9页 |
| 绪论 | 第9-25页 |
| 1 α-淀粉酶研究概况 | 第9-14页 |
| ·淀粉酶概述 | 第9-10页 |
| ·α-淀粉酶概述 | 第10-12页 |
| ·α-淀粉酶的氨基酸组成 | 第11页 |
| ·温度对α-淀粉酶的影响 | 第11页 |
| ·pH对α-淀粉酶的影响 | 第11-12页 |
| ·Ca~(2+)与α-淀粉酶活性的关系 | 第12页 |
| ·α-淀粉酶的研究 | 第12-14页 |
| 2 米曲霉 | 第14页 |
| 3 基因组改组技术原理及技术路线 | 第14-21页 |
| ·基因组改组的产生及原理 | 第14-18页 |
| ·Genome shuffling技术及具体方法 | 第14-16页 |
| ·基因组改组技术的技术优势 | 第16页 |
| ·基因组改组技术的应用 | 第16-18页 |
| ·基因组改组技术路线 | 第18-21页 |
| ·亲本菌株的遗传标记 | 第18页 |
| ·原生质体的制备与再生 | 第18-19页 |
| ·原生质体融合 | 第19-20页 |
| ·融合子的检出 | 第20页 |
| ·基因组改组技术的展望 | 第20-21页 |
| 4 DNA分子标记技术 | 第21-22页 |
| ·基于DNA-DNA杂交的DNA分子标记 | 第21页 |
| ·基于PCR技术的DNA分子标记 | 第21-22页 |
| ·基于PCR与限制性内切酶技术结合的DNA分子标记 | 第22页 |
| ·基于单核苷酸多态性的DNA分子标记 | 第22页 |
| 5 本课题的目的意义及研究内容 | 第22-25页 |
| 第一章 真菌α-淀粉酶产生菌的筛选与鉴定 | 第25-33页 |
| 1 前言 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·药品与试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-27页 |
| ·酶活测定方法 | 第26页 |
| ·菌体形态观察 | 第26页 |
| ·18S rDNA分子鉴定 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-32页 |
| ·出发菌株液体发酵筛选 | 第27页 |
| ·出发菌形态鉴定 | 第27-28页 |
| ·18S rDNA分子鉴定 | 第28-32页 |
| ·18S rDNA扩增和序列测定 | 第28-30页 |
| ·进化树构建与聚类分析 | 第30-32页 |
| 4 小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第二章 米曲霉原生质体制备与再生 | 第33-45页 |
| 1 前言 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·药品与试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·菌种 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·菌丝体培养 | 第34页 |
| ·原生质体的制备与纯化 | 第34页 |
| ·原生质体的再生 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-43页 |
| ·原生质体制备条件的优化 | 第35-40页 |
| ·菌龄对原生质体制备的影响 | 第35页 |
| ·酶液组成对原生质体制备率的影响 | 第35-37页 |
| ·酶解时间对原生质体制备率的影响 | 第37页 |
| ·酶解温度对原生质体制备率的影响 | 第37-38页 |
| ·不同渗透压稳定剂对原生质体制备的影响 | 第38-39页 |
| ·NaCl渗透压稳定剂浓度对原生质体制备的影响 | 第39-40页 |
| ·米曲霉原生质体的形态观察 | 第40页 |
| ·原生质体的再生 | 第40-43页 |
| ·酶解时间与再生率的关系 | 第40-41页 |
| ·不同再生培养基对原生质体再生率的影响 | 第41-42页 |
| ·不同渗透压稳定剂对原生质体再生率的影响 | 第42-43页 |
| ·米曲霉原生质体再生的观察 | 第43页 |
| 4 小结与讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 基因组改组选育米曲霉高产α-淀粉酶菌株 | 第45-57页 |
| 1 前言 | 第45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-48页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·药品与试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·菌种 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-48页 |
| ·米曲霉原生质体紫外灭活 | 第46-47页 |
| ·米曲霉原生质体热灭活 | 第47页 |
| ·米曲霉原生质体最佳融合条件的确定 | 第47页 |
| ·双亲灭活原生质体融合 | 第47-48页 |
| ·改组菌的初筛 | 第48页 |
| ·改组菌的复筛 | 第48页 |
| ·改组菌株的稳定遗传 | 第48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-55页 |
| ·米曲霉原生质体灭活及融合条件的探究 | 第48-50页 |
| ·米曲霉原生质体紫外灭活条件探究 | 第48-49页 |
| ·米曲霉热灭活条件探究 | 第49页 |
| ·米曲霉原生质体最佳融合条件的确定 | 第49-50页 |
| ·米曲霉原生质体融合 | 第50-51页 |
| ·第一轮基因组改组 | 第51-53页 |
| ·改组菌的初筛 | 第51-52页 |
| ·改组菌的复筛 | 第52-53页 |
| ·第二轮基因组重组 | 第53-55页 |
| ·改组菌初筛 | 第53页 |
| ·改组菌复筛 | 第53-54页 |
| ·稳定性遗传 | 第54-55页 |
| 4 小结与讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 改组菌株的形态学观察与RAPD鉴定 | 第57-65页 |
| 1 前言 | 第57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·药品与试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57-58页 |
| ·菌种 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-59页 |
| ·改组前后菌株形态学观察 | 第58页 |
| ·改组菌株的RAPD鉴定 | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-62页 |
| ·米曲霉原生质体改组出发菌株的性状比较 | 第59页 |
| ·出发菌株与改组菌形态学观察 | 第59-60页 |
| ·RAPD多态性分析 | 第60-61页 |
| ·米曲霉菌株的RAPD聚类分析 | 第61-62页 |
| ·RAPD聚类分析 | 第61页 |
| ·各个菌株亲缘关系聚类图 | 第61-62页 |
| 4 小结与讨论 | 第62-65页 |
| 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 个人简历 | 第77-78页 |