| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| ·抑制性谷氨酸门控氯离子通道（IGluCls）的研究进展 | 第13-21页 |
| ·IGluCls 的生理功能 | 第13-14页 |
| ·黑腹果蝇IGluCls 的结构及理化性质研究 | 第14-15页 |
| ·IGluCls 的分子特性 | 第15-16页 |
| ·IGluCls 分子突变与功能变化 | 第16-17页 |
| ·IGluCls 的门控机制 | 第17-18页 |
| ·IGluCls 的表达研究 | 第18-20页 |
| ·IGluCls 的药理学特性及应用价值 | 第20-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第21-22页 |
| ·课题来源和研究内容 | 第22-23页 |
| ·课题来源 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 2 实验材料和仪器 | 第23-27页 |
| ·菌种和载体 | 第23页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第23页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第23页 |
| ·引物合成 | 第23页 |
| ·主要化学试剂 | 第23页 |
| ·培养基及溶液 | 第23-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-27页 |
| 3 实验方法 | 第27-41页 |
| ·DmIGluClαECD 在大肠杆菌中的表达 | 第27-32页 |
| ·DmIGluClαECD 基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第28-29页 |
| ·重组克隆载体的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·重组表达载体转化Rosetta 及阳性克隆的筛选 | 第31页 |
| ·DmIGluClαECD 亚基DNA 在大肠杆菌中的表达 | 第31-32页 |
| ·表达条件的优化 | 第32页 |
| ·DmIGluClαECD 包涵体的纯化 | 第32-34页 |
| ·包涵体的分离和洗涤 | 第32-33页 |
| ·包涵体的溶解 | 第33页 |
| ·包涵体的金属螯合层析 | 第33-34页 |
| ·DmIGluClα（1-313）在毕赤酵母中的表达 | 第34-38页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·线性化重组质粒的制备 | 第36-37页 |
| ·DmIGluClα（1-313）DNA 转化毕赤酵母 | 第37-38页 |
| ·DmIGluClα（1-313）在毕赤酵母中的表达 | 第38页 |
| ·DmIGluClαECD 在毕赤酵母中的表达 | 第38-41页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·线性化重组质粒的制备 | 第40页 |
| ·DmIGluClαECD 亚基DNA 转化毕赤酵母 | 第40页 |
| ·DmIGluClαECD 在毕赤酵母中的表达 | 第40-41页 |
| 4 结果与分析 | 第41-63页 |
| ·DmIGluClαECD 的原核表达 | 第41-51页 |
| ·大肠杆菌重组克隆载体的构建 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体的构建 | 第42-49页 |
| ·重组表达载体转化表达宿主Rosetta 及鉴定 | 第49页 |
| ·DmIGluClαECD 亚基DNA 在大肠杆菌中的表达及条件优化 | 第49-51页 |
| ·DmIGluClαECD 包涵体的纯化 | 第51-53页 |
| ·包涵体的分离和洗涤 | 第51-52页 |
| ·包涵体的变性及纯化 | 第52-53页 |
| ·毕赤酵母重组表达载体的构建 | 第53-63页 |
| ·DmIGluClα(1-313) 重组表达载体的构建 | 第53-58页 |
| ·DmIGluClαECD 重组表达载体的构建 | 第58-63页 |
| 5 讨论 | 第63-67页 |
| ·胞外域的选择 | 第63页 |
| ·DmIGluClαECD 的原核表达 | 第63-64页 |
| ·原核表达系统的特点 | 第63-64页 |
| ·原核表达宿主、载体的选择及表达条件优化 | 第64页 |
| ·包涵体及其纯化 | 第64-65页 |
| ·包涵体的形成 | 第64-65页 |
| ·包涵体的洗涤与纯化 | 第65页 |
| ·DmIGluClα的真核表达 | 第65-67页 |
| 6 结论 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
