| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-22页 |
| ·抗菌肽研究进展 | 第13-19页 |
| ·抗菌肽的研究历史 | 第13-14页 |
| ·抗菌肽的一般性质 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽的生物学功能 | 第15-18页 |
| ·抗菌肽的直接抗菌活性 | 第16-17页 |
| ·抗菌肽的免疫调节功能 | 第17-18页 |
| ·抗菌肽的应用前景 | 第18-19页 |
| ·抗菌肽CAP18 的研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·试验材料 | 第22-25页 |
| ·菌毒株与载体 | 第22-23页 |
| ·主要酶类及生化试剂 | 第23-24页 |
| ·引物、多肽合成及DNA 序列测定 | 第24页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-39页 |
| ·CAP18 编码基因的获得 | 第25-28页 |
| ·CAP18 编码基因克隆与鉴定 | 第28-30页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第30-33页 |
| ·融合蛋白表达 | 第33-35页 |
| ·双拷贝p-c-CAP18Ⅱ表达条件的优化 | 第35页 |
| ·目的蛋白在复合自动诱导培养基与LB 培养基中表达的比较 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白c-CAP18Ⅱ的大规模表达 | 第36页 |
| ·c-CAP18Ⅱ融合蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·c-CAP18Ⅱ融合蛋白的裂解 | 第37页 |
| ·抗菌肽活性的初步鉴定 | 第37-39页 |
| 3 试验结果 | 第39-51页 |
| ·CAP18 编码基因的获得 | 第39页 |
| ·CAP18 编码基因鉴定 | 第39-41页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| ·串联多聚体表达载体p-c-CAP18 的PCR 鉴定 | 第41页 |
| ·重组质粒转入表达菌株后的菌落PCR 鉴定 | 第41-42页 |
| ·C-CAP18Ⅰ-Ⅷ融合蛋白的诱导表达鉴定结果 | 第42-44页 |
| ·常规表达条件优化 | 第44-45页 |
| ·最适诱导温度 | 第44页 |
| ·最适诱导菌体起始浓度 | 第44页 |
| ·最适IPTG 浓度 | 第44-45页 |
| ·最适诱导时间 | 第45页 |
| ·目的蛋白在复合自动诱导培养基与LB 培养基中表达的比较 | 第45-46页 |
| ·重组抗菌肽的规模化表达 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第47页 |
| ·c-CAP18 融合蛋白的切割 | 第47-48页 |
| ·抗菌肽活性的初步鉴定 | 第48-51页 |
| ·CAP18 体外活性检测 | 第48-50页 |
| ·CAP18 体内活性检测 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| ·抗菌肽编码基因的获得 | 第51页 |
| ·表达系统的选择 | 第51-52页 |
| ·融合表达策略 | 第52页 |
| ·融合蛋白的大规模表达 | 第52-53页 |
| ·融合蛋白的纯化和裂解 | 第53页 |
| ·抗菌肽的活性检测 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
