中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-31页 |
第一章 质型多角体病毒研究进展 | 第11-24页 |
第一节 质型多角体病毒简介 | 第11-16页 |
1.质型多角体病毒的发现 | 第11-12页 |
2.病毒学分类 | 第12-13页 |
3.质型多角体病毒类型 | 第13-14页 |
4.病毒结构 | 第14页 |
5.宿主及交叉感染 | 第14-15页 |
6.病毒的入侵机制 | 第15-16页 |
7.基因组结构及表达 | 第16页 |
第二节 家蚕质型多角体病毒 | 第16-20页 |
1. BmCPV的不同株系 | 第16-17页 |
2. 基因组研究进展 | 第17-19页 |
3. 研究意义 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-24页 |
第二章 多角体蛋白研究概况 | 第24-31页 |
第一节 多角体的基本特征 | 第24-25页 |
第二节 多角体蛋白基因 | 第25-26页 |
第三节 多角体蛋白包装机制的研究 | 第26-27页 |
1.多角体对病毒粒子的包装 | 第26-27页 |
2.多角体对蛋白质的包装特性 | 第27页 |
参考文献 | 第27-31页 |
第二部分 实验研究报告 | 第31-101页 |
第三章 研究目的及内容 | 第31-34页 |
1. 研究目的及意义 | 第31-32页 |
·蚕病预防 | 第31页 |
·生物杀虫剂 | 第31-32页 |
·病毒的进化起源 | 第32页 |
2. 研究内容及技术路线 | 第32-34页 |
·主要研究内容 | 第32页 |
·主要的研究路线 | 第32-34页 |
第四章 实验材料与方法 | 第34-45页 |
1.实验材料 | 第34-37页 |
·材料 | 第34页 |
·工具酶及K it | 第34页 |
·主要实验试剂与配制 | 第34-37页 |
2.实验常用仪器设备 | 第37-38页 |
3.常用方法 | 第38-44页 |
·CPV 多角体的纯化及基因组dsRNA 的提取 | 第38页 |
·dsRNA 片段1-10的分离纯化 | 第38-39页 |
·cD NA 合成及PCR 扩增 | 第39页 |
·连接反应 | 第39-40页 |
·感受态细胞的制备 | 第40页 |
·重组D NA 的转化 | 第40页 |
·碱裂解法制备质粒 DNA | 第40-41页 |
·酶切反应 | 第41-42页 |
·BmN 细胞培养和保存 | 第42页 |
·BmN 的转染 | 第42页 |
·细胞基因组DNA 的提取 | 第42-43页 |
·电镜样品的制备 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
第五章 BmCPV - SZ 全基因组克隆与分析 | 第45-77页 |
1. 引言 | 第45-46页 |
2. 材料与方法 | 第46-49页 |
·材料 | 第46-47页 |
·工具酶及K it | 第47页 |
·CPV 基因组ds RNA 的提取 | 第47页 |
·Bm CPV ds RNA 片段的分离纯化 | 第47页 |
·RT - PCR 引物合成 | 第47-49页 |
·cDNA 合成及PCR 扩增 | 第49页 |
·克隆与鉴定 | 第49页 |
·序列分析 | 第49页 |
3. 结果与分析 | 第49-70页 |
·BmCPV- SZ 基因组特征 | 第49-53页 |
·各片段的特点 | 第53页 |
·一致性比较 | 第53-56页 |
·RNA 末端比较 | 第56-58页 |
·编码蛋白的二级结构分析 | 第58-61页 |
·N 糖基化及磷酸化位点分析 | 第61-63页 |
·结构功能域分析 | 第63-65页 |
·系统进化分析 | 第65-70页 |
4. 讨论 | 第70-72页 |
·CPV 的分类地位 | 第70页 |
·基因组片段 S1-S10 cDNA 合成 | 第70-71页 |
·系统进化分析 | 第71页 |
·末端序列比较 | 第71页 |
·蛋白质结构功能域分析 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
第六章 多角体蛋白基因的表达及异源包装特性研究 | 第77-88页 |
1. 引言 | 第77-78页 |
2. 材料和方法 | 第78-81页 |
·材料 | 第78页 |
·方法 | 第78-81页 |
3. 结果与分析 | 第81-84页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第81页 |
·转染细胞的筛选 | 第81-82页 |
·稳定转染细胞基因组的P CR 鉴定 | 第82-83页 |
·多角体的纯化及包装特性的分析 | 第83-84页 |
·回感实验及X- G al 染色 | 第84页 |
4. 讨论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-88页 |
第七章 小菜粉蝶颗粒体病毒lef -3 基因的克隆与分析 | 第88-101页 |
1. 引言 | 第88-90页 |
2. 材料与方法 | 第90页 |
·材料 | 第90页 |
·方法 | 第90页 |
3. 结果与分析 | 第90-97页 |
·序列分析 | 第90-91页 |
·Pira GVLEF-3 高级结构 | 第91页 |
·杆状病毒LEF -3 进化分析 | 第91-95页 |
·GVlef -3 基因的选择压力估计 | 第95页 |
·进化起源分析 | 第95-97页 |
4. 讨论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-101页 |
结论 | 第101-102页 |
1. 已取得的成果 | 第101页 |
2.有待进一步研究的问题 | 第101-102页 |
附录一 Gen Bank 登录序列 | 第102-103页 |
附录二 硕士期间已发表文章 | 第103-104页 |
附录三 质粒图谱 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |