| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·基因工程抗体药物的概述 | 第10-11页 |
| ·基因工程抗体药物的发展背景 | 第10页 |
| ·基因工程抗体研究的两个重要技术 | 第10-11页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第11-13页 |
| ·噬菌体抗体库基本原理 | 第11-12页 |
| ·噬菌体展示系统 | 第12-13页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第13-16页 |
| ·噬菌体抗体库基本原理 | 第13-14页 |
| ·噬菌体抗体库的构建及筛选 | 第14-16页 |
| ·噬菌体抗体库的应用现状 | 第16-18页 |
| ·医学微生物学领域的应用 | 第16页 |
| ·自身免疫性疾病研究方面的应用 | 第16页 |
| ·肿瘤研究方面的应用 | 第16-17页 |
| ·诊断和治疗方面的应用 | 第17-18页 |
| ·展望 | 第18-19页 |
| ·研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-41页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·菌种及毒株 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20页 |
| ·工具酶 | 第20页 |
| ·相关试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| ·常用溶液配制 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·引物 | 第21-24页 |
| ·实验方法 | 第24-41页 |
| ·验证PUC19-SacB的自杀功能 | 第24页 |
| ·构建噬粒载体PDF-SacB-BX(PSBX) | 第24-28页 |
| ·构建噬粒载体PDF-SacB-GX(PSGX) | 第28-29页 |
| ·构建PDF-D-SacB | 第29-30页 |
| ·淋巴细胞的分离及总RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·反转录cDNA的合成 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增Fab抗体基因 | 第32-34页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第34页 |
| ·噬粒载体PDF-D-SacB的制备 | 第34-35页 |
| ·轻链库的构建及鉴定 | 第35-37页 |
| ·辅助噬菌体VCSM 13的制备 | 第37页 |
| ·辅助噬菌体VCSM 13滴度的测定 | 第37页 |
| ·噬菌体抗体Fab库的构建和鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组噬菌体抗体库的构建 | 第39页 |
| ·工作库的构建及鉴定 | 第39-41页 |
| 3 结果 | 第41-52页 |
| ·构建噬粒载体PDF-D-SacB | 第41-47页 |
| ·验证PUC19-SacB的自杀功能 | 第41-42页 |
| ·构建噬粒载体PDF-SacB-BX(PSBX) | 第42-44页 |
| ·构建噬粒载体PDF-SacB-GX(PSGX) | 第44-45页 |
| ·构建噬粒载体PDF-D-SacB | 第45-47页 |
| ·PCR扩增IgG、IgM重链Fd基因和Vκ、Vλ基因 | 第47-48页 |
| ·噬粒载体PDF-D-SacB的制备 | 第48-49页 |
| ·轻链库的构建及鉴定 | 第49-50页 |
| ·辅助噬菌体VCSM 13的扩增和滴度的测定 | 第50页 |
| ·初级Fab抗体库的构建及鉴定 | 第50页 |
| ·大容量噬菌体抗体库的构建及鉴定 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·带有自杀功能的噬粒载体 | 第52-53页 |
| ·噬粒载体酶切位点的改造 | 第53-54页 |
| ·抗体基因的克隆 | 第54页 |
| ·重组子的转化 | 第54页 |
| ·Cre-Loxp系统 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |