| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| ·布氏杆菌概述 | 第12页 |
| ·布氏杆菌的病原生物学 | 第12-13页 |
| ·布氏杆菌的致病机理 | 第13-14页 |
| ·布氏杆菌病疫情的流行 | 第14-15页 |
| ·世界布氏杆菌病疫情的流行 | 第14-15页 |
| ·我国布氏杆菌病疫情的流行 | 第15页 |
| ·布氏杆菌的诊断方法 | 第15-18页 |
| ·病原学诊断 | 第16-17页 |
| ·免疫学诊断 | 第17-18页 |
| ·布氏杆菌疫苗研究进展 | 第18-22页 |
| ·减毒活疫苗 | 第18-20页 |
| ·灭活疫苗 | 第20页 |
| ·突变株疫苗 | 第20-21页 |
| ·基因工程疫苗 | 第21-22页 |
| ·布氏杆菌外膜蛋白研究概况 | 第22-23页 |
| ·布氏杆菌外膜蛋白 | 第22页 |
| ·BP26 蛋白 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-37页 |
| ·材料 | 第25-28页 |
| ·质粒、细胞、菌株和实验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第25-26页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-37页 |
| ·重组蛋白BP26 在大肠杆菌中的表达 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第29-31页 |
| ·重组蛋白pET-30a(+)-bp26 和pGEX-6P-1-bp26 浓度的测定 | 第31-32页 |
| ·小鼠免疫 | 第32页 |
| ·免疫小鼠抗体效价测定 | 第32页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第32-34页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体腹水的纯化 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-46页 |
| ·大肠杆菌中表达重组蛋白 | 第37页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白pET-30a(+)-bp26 的纯化 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白pGEX-6P-1-bp26 的纯化 | 第39页 |
| ·纯化后重组蛋白的浓度测定 | 第39页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的获得 | 第39页 |
| ·单克隆抗体亚型的鉴定 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体交叉反应的鉴定 | 第40-41页 |
| ·Western blotting 检测单克隆抗体特异性 | 第41页 |
| ·单克隆抗体腹水纯化 | 第41页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第41页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性的检测 | 第41-44页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第44-46页 |
| ·5 株单克隆抗体用于竞争ELISA | 第44页 |
| ·应用3AG6 腹水的竞争ELISA | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·BP26 蛋白作为抗原的理论依据 | 第46页 |
| ·重组蛋白BP26 的制备 | 第46-48页 |
| ·重组蛋白pET-30a(+)-bp26 的制备 | 第47页 |
| ·重组蛋白pGEX-6P-1-bp26 的制备 | 第47-48页 |
| ·阳性杂交瘤细胞系的建立 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的选择 | 第48页 |
| ·饲养细胞的选择 | 第48页 |
| ·细胞融合 | 第48页 |
| ·阳性杂交瘤细胞克隆 | 第48-49页 |
| ·检测抗原 | 第49页 |
| ·单克隆抗体特异性检测 | 第49-50页 |
| ·交叉反应的检测 | 第49页 |
| ·Western blotting 检测单克隆抗体 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |
