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柑橘黄龙病昆虫介体—柑橘木虱的研究及九里香感染黄龙病菌后的差减文库构建

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
缩略词表第15-17页
第一章 柑橘黄龙病研究进展第17-34页
   ·前言第17页
   ·发生、分布及危害第17-18页
   ·黄龙病的症状第18-19页
   ·病原的研究第19-21页
     ·病原的分类第19页
     ·名称变化第19页
     ·黄龙病菌的培养第19-20页
     ·病原的分子生物学研究进展第20-21页
   ·黄龙病的寄主第21页
   ·柑橘黄龙的诊断和鉴定第21-24页
     ·田间诊断第21-22页
     ·生物学鉴定第22页
     ·组织化学鉴定第22-23页
     ·血清学检测第23页
     ·生化指标检测第23页
     ·分子生物学检测第23-24页
     ·定量PCR第24页
   ·黄龙病的传播途径第24-25页
   ·黄龙病的防治第25-27页
     ·培育无病种苗,严格实施检疫第25-26页
     ·严格防治柑橘木虱第26页
     ·转基因第26-27页
   ·柑橘木虱研究进展第27-30页
     ·发生于分布第27页
     ·寄主种类第27-28页
     ·传病及与黄龙病的发生第28页
     ·柑橘木虱生物学特性第28-29页
     ·柑橘木虱的防治第29-30页
       ·化学防治第29页
       ·生物防治第29页
       ·物理防治第29-30页
   ·植物抗病性的表现与病程相关蛋白第30-31页
     ·植物抗病性的表现第30页
     ·病原相关蛋白在抗病中的作用第30-31页
   ·差异表达基因筛选方法第31-32页
   ·本研究的目的和意义第32-34页
第二章 柑橘木虱的生物学特性第34-43页
   ·前言第34-35页
     ·材料与方法第35-36页
     ·材料第35页
     ·柑橘木虱对福建茶的选择性第35页
     ·取食喜好性测定第35-36页
     ·柑橘木虱的耐饥渴能力测定第36页
     ·乙醇提取物的毒杀活性测定第36页
     ·数据统计分析第36页
   ·结果与分析第36-40页
     ·对福建茶的选择性第36-37页
     ·寄主选择性第37-39页
     ·柑橘木虱的耐饥渴能力第39页
     ·海芋对柑橘木虱的毒杀作用第39-40页
       ·海芋叶片组织对木虱的毒杀作用第39-40页
       ·乙醇提取物的毒杀活性测定第40页
   ·讨论第40-43页
第三章 柑橘黄龙病菌侵染九里香不同方法研究第43-53页
   ·前言第43页
   ·材料与方法第43-47页
     ·材料第43-44页
     ·不同接种方法比较第44页
       ·针刺、摩擦接种和挤压法第44页
       ·嫁接传染第44页
       ·菟丝子传播第44页
     ·柑橘木虱传播及传毒效率测定第44-45页
       ·获菌时间测定第45页
       ·传菌时间测定第45页
       ·传菌效率测定第45页
       ·温度对传菌的影响第45页
     ·不同的DNA提取方法比较第45-46页
     ·PCR检测第46-47页
   ·结果与分析第47-50页
     ·田间症状调查和生物学鉴定第47页
     ·不同方法提取的DNA效果比较第47页
     ·室内生物学鉴定第47-48页
     ·不同传染方法比较第48-49页
     ·柑橘木虱传菌效率测定第49-50页
   ·讨论第50-53页
     ·黄龙病症状第50页
     ·提取方法的比较第50-51页
     ·接种方法的比较第51-53页
第四章 九里香感染黄龙病菌后的差减文库构建第53-87页
   ·前言第53-54页
   ·材料与方法第54-64页
     ·文库材料收集第54-55页
     ·不同的RNA提取方法比较第55页
     ·第55-62页
       ·mRNA分离第55-56页
       ·第一链合成反应第56-57页
       ·Rsa Ⅰ酶切第57页
       ·接头连接第57-58页
       ·差减杂交第58-59页
       ·两次PCR选择性扩增第59-60页
       ·差减文库生成第60-62页
         ·感受态细胞的制备第60-61页
         ·连接第61页
         ·热击转化感受态细胞第61页
         ·质粒DNA的提取第61-62页
       ·地高辛检测差异片段第62-64页
       ·模板处理第62页
       ·标记第62-63页
       ·检测第63页
       ·预杂交第63页
       ·洗膜第63-64页
       ·差异表达克隆选取第64页
       ·序列同源性检索第64页
   ·结果与分析第64-84页
     ·不同RNA提取方法比较第64-66页
     ·文库构建第66-68页
       ·分离mRNA第66页
       ·双链合成及酶切效果第66-67页
       ·接头连接第67页
       ·差减杂交第67页
       ·文库的生成第67-68页
     ·差异片段的地高辛检测第68-69页
     ·差异表达片段的序列分析及功能分类第69-84页
     ·差异表达片段的基因功能分类第84页
   ·讨论第84-87页
第五章 病程相关蛋白CDNA克隆及表达分析第87-95页
   ·前言第87页
   ·材料与方法第87-90页
     ·材料准备第87页
     ·不同的RNA提取方法比较第87页
     ·半定量PCR检测差异片段表达第87-88页
       ·目标片段检测第87-88页
       ·半定量RT-PCR第88页
     ·hiTAIL-PCR扩增cDNA全长第88-90页
       ·高质量DNA的提取第88页
       ·引物设计第88-89页
       ·PCR扩增第89-90页
   ·结果与分析第90-93页
     ·九里香部分基因对黄龙病菌侵染的应答反应第90页
     ·hiTAIL-PCR扩增STH蛋白cDNA全长和序列分析第90-93页
   ·讨论第93-95页
     ·半定量检测第93页
     ·hiTAIL-PCR扩增第93页
     ·PR蛋白与植物诱导抗性间的关系第93-95页
参考文献第95-105页
图版与说明第105-108页
附录A:主要试剂及溶液的配制第108-110页
附录B:差减文库所用接头和引物信息第110-111页
附录C:PMD18-T载体信息第111-112页
致谢第112-113页
博士期间已发表或已接受的文章第113页

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