中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-10页 |
第一部分 引言 | 第10-21页 |
一、水通道蛋白的发现、命名和分类 | 第10-11页 |
二、水通道蛋白的溶质转运 | 第11-12页 |
(一) 甘油和尿素 | 第11页 |
(二) 阴离子 | 第11页 |
(三) 氨和过氧化氢 | 第11-12页 |
(四) 亚砷酸盐和辉锑盐 | 第12页 |
(五) C0_2和 NO 气体 | 第12页 |
三、水通道蛋白 AQPs 的结构与其通透性机制 | 第12-15页 |
(一) 水通道蛋白 AQPs 的结构 | 第12-13页 |
(二) 水通道蛋白 AQP1 的转运选择性与通透性机制 | 第13-15页 |
四、水通道蛋白 AQP4 的结构与某些生理疾病的关系 | 第15-19页 |
(一) AQP4 结构的基本特征 | 第15-16页 |
(二) AQP4 与 OAP | 第16-17页 |
(三) AQP4 与脑水肿 | 第17-18页 |
(四) AQP4 与视神经脊髓炎 | 第18-19页 |
五、NPA Motifs 与水通道蛋白 AQP4 质膜定位的关系尚不清楚 | 第19页 |
六、本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二部分 材料与方法 | 第21-34页 |
一、实验材料 | 第21-22页 |
(一) 主要生化和分子生物学试剂 | 第21页 |
(二) 主要实验仪器、耗材及数据分析软件 | 第21-22页 |
二、实验方法 | 第22-34页 |
(一) 大鼠 AQP4-M1 和 AQP4-M23 cDNA 的克隆 | 第22-24页 |
(二) 大鼠pEGFP-N1-AQP4-M1 和pEGFP-N1-AQP4-M23 真核表达载体的构建 | 第24-27页 |
(三) NPA motifs 缺失突变体的构建 | 第27-29页 |
(四) AQP4单个氨基酸替换的突变体构建 | 第29-30页 |
(五) 细胞转染 | 第30-31页 |
(六) 免疫荧光 | 第31-32页 |
(七) 免疫印迹 | 第32-34页 |
第三部分 实验结果 | 第34-48页 |
一、大鼠 AQP4-M1 和 AQP4-M23 cDNA 的克隆 | 第34-35页 |
(一) 大鼠脑和肾脏组织总RNA的提取 | 第34页 |
(二) RT-PCR | 第34-35页 |
二、大鼠pEGFP-N1-AQP4-M1 和pEGFP-N1-AQP4-M23 真核表达载体的构建 | 第35-36页 |
三、大鼠pEGFP-N1-AQP4-M1 和pEGFP-N1-AQP4-M23 突变体的构建 | 第36-42页 |
(一)NPA缺失突变体的构建 | 第37-39页 |
(二) 氨基酸替换突变体的构建 | 第39-42页 |
四、大鼠AQP4-M1 和AQP4-M23 一系列突变体的细胞转染 | 第42-46页 |
(一)AQP4-M23 突变体在CHO 和C057 细胞中的转染 | 第42-44页 |
(二) AQP4-M1 和 AQP4-M23 突变体在FRT 细胞中的转染 | 第44-46页 |
五、大鼠 AQP4-M1 和 AQP4-M23 一系列突变体蛋白的免疫印迹 | 第46-48页 |
第四部分 讨论 | 第48-50页 |
一、NPA motifs 在 AQP4 的生物合成和质膜定位中起关键作用 | 第48-49页 |
二、AQP4-M1 N-末端的22 个氨基酸与第一个 NPA motif 存在相互作用 | 第49-50页 |
第五部分 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
英文缩写词 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61-62页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第62页 |