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NPA motifs与水通道蛋白AQP4质膜定位关系的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-10页
第一部分 引言第10-21页
 一、水通道蛋白的发现、命名和分类第10-11页
 二、水通道蛋白的溶质转运第11-12页
  (一) 甘油和尿素第11页
  (二) 阴离子第11页
  (三) 氨和过氧化氢第11-12页
  (四) 亚砷酸盐和辉锑盐第12页
  (五) C0_2和 NO 气体第12页
 三、水通道蛋白 AQPs 的结构与其通透性机制第12-15页
  (一) 水通道蛋白 AQPs 的结构第12-13页
  (二) 水通道蛋白 AQP1 的转运选择性与通透性机制第13-15页
 四、水通道蛋白 AQP4 的结构与某些生理疾病的关系第15-19页
  (一) AQP4 结构的基本特征第15-16页
  (二) AQP4 与 OAP第16-17页
  (三) AQP4 与脑水肿第17-18页
  (四) AQP4 与视神经脊髓炎第18-19页
 五、NPA Motifs 与水通道蛋白 AQP4 质膜定位的关系尚不清楚第19页
 六、本研究的目的和意义第19-21页
第二部分 材料与方法第21-34页
 一、实验材料第21-22页
  (一) 主要生化和分子生物学试剂第21页
  (二) 主要实验仪器、耗材及数据分析软件第21-22页
 二、实验方法第22-34页
  (一) 大鼠 AQP4-M1 和 AQP4-M23 cDNA 的克隆第22-24页
  (二) 大鼠pEGFP-N1-AQP4-M1 和pEGFP-N1-AQP4-M23 真核表达载体的构建第24-27页
  (三) NPA motifs 缺失突变体的构建第27-29页
  (四) AQP4单个氨基酸替换的突变体构建第29-30页
  (五) 细胞转染第30-31页
  (六) 免疫荧光第31-32页
  (七) 免疫印迹第32-34页
第三部分 实验结果第34-48页
 一、大鼠 AQP4-M1 和 AQP4-M23 cDNA 的克隆第34-35页
  (一) 大鼠脑和肾脏组织总RNA的提取第34页
  (二) RT-PCR第34-35页
 二、大鼠pEGFP-N1-AQP4-M1 和pEGFP-N1-AQP4-M23 真核表达载体的构建第35-36页
 三、大鼠pEGFP-N1-AQP4-M1 和pEGFP-N1-AQP4-M23 突变体的构建第36-42页
  (一)NPA缺失突变体的构建第37-39页
  (二) 氨基酸替换突变体的构建第39-42页
 四、大鼠AQP4-M1 和AQP4-M23 一系列突变体的细胞转染第42-46页
  (一)AQP4-M23 突变体在CHO 和C057 细胞中的转染第42-44页
  (二) AQP4-M1 和 AQP4-M23 突变体在FRT 细胞中的转染第44-46页
 五、大鼠 AQP4-M1 和 AQP4-M23 一系列突变体蛋白的免疫印迹第46-48页
第四部分 讨论第48-50页
 一、NPA motifs 在 AQP4 的生物合成和质膜定位中起关键作用第48-49页
 二、AQP4-M1 N-末端的22 个氨基酸与第一个 NPA motif 存在相互作用第49-50页
第五部分 结论第50-51页
参考文献第51-59页
英文缩写词第59-60页
致谢第60-61页
作者简历第61-62页
在学期间公开发表论文及著作情况第62页

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