摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
缩略词列表 | 第15-17页 |
前言 | 第17-19页 |
第一章 冬凌草二萜合酶基因的克隆及分析 | 第19-47页 |
1.1 材料与方法 | 第19-28页 |
1.1.1 植物材料 | 第19页 |
1.1.2 菌株与载体 | 第19页 |
1.1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
1.1.4 主要仪器 | 第20页 |
1.1.5 冬凌草各组织RNA的提取 | 第20-21页 |
1.1.6 候选二萜合酶基因的筛选 | 第21页 |
1.1.7 目的基因全长的克隆及测序 | 第21-26页 |
1.1.8 目的基因生物信息学分析及蛋白功能预测 | 第26页 |
1.1.9 目的基因组织特异性表达分析 | 第26-28页 |
1.2 结果与分析 | 第28-45页 |
1.2.1 RNA提取结果 | 第28-29页 |
1.2.2 转录组结果分析 | 第29-33页 |
1.2.3 目的基因cDNA的获得 | 第33页 |
1.2.4 目的基因分子序列初步分析 | 第33-35页 |
1.2.5 目的蛋白功能预测 | 第35-44页 |
1.2.6 组织特异性表达分析 | 第44-45页 |
1.3 讨论 | 第45-47页 |
第二章 冬凌草Ⅱ型二萜合酶基因的原核表达及功能研究 | 第47-62页 |
2.1 材料与方法 | 第47-55页 |
2.1.1 菌种与载体 | 第47-48页 |
2.1.2 主要试剂 | 第48页 |
2.1.3 主要仪器 | 第48-49页 |
2.1.4 目的基因原核表达载体的构建 | 第49-50页 |
2.1.5 目的蛋白的原核表达 | 第50-51页 |
2.1.6 重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
2.1.7 蛋白检测和定量 | 第52-53页 |
2.1.8 重组蛋白的功能鉴定 | 第53-55页 |
2.1.9 IrCPS3 定点突变研究 | 第55页 |
2.2 结果与分析 | 第55-61页 |
2.2.1 目的基因原核表达载体的构建 | 第55-57页 |
2.2.2 目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第57-58页 |
2.2.3 目的蛋白的功能鉴定 | 第58-60页 |
2.2.4 IrCPS3 定点突变研究 | 第60-61页 |
2.3 讨论 | 第61-62页 |
第三章 冬凌草Ⅰ型二萜合酶基因的原核表达及功能研究 | 第62-76页 |
3.1 材料与方法 | 第62-65页 |
3.1.1 菌种与载体 | 第62页 |
3.1.2 主要试剂 | 第62-63页 |
3.1.3 主要仪器 | 第63页 |
3.1.4 目的基因原核表达载体的构建 | 第63页 |
3.1.5 目的蛋白的诱导表达和纯化 | 第63页 |
3.1.6 目的蛋白的功能鉴定 | 第63-64页 |
3.1.7 酶促动力学分析 | 第64-65页 |
3.2 结果与分析 | 第65-72页 |
3.2.1 目的基因原核表达载体的构建 | 第65-66页 |
3.2.2 目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第66-68页 |
3.2.3 重组蛋白的功能鉴定 | 第68-70页 |
3.2.4 IrKSL6 双功能酶促动力学分析 | 第70-72页 |
3.3 讨论 | 第72-76页 |
第四章 IrKSL3 基因可变剪切研究 | 第76-84页 |
4.1 材料与方法 | 第76-79页 |
4.1.1 植物材料、菌种及载体 | 第76页 |
4.1.2 主要试剂及仪器 | 第76页 |
4.1.3 基因序列分析 | 第76-78页 |
4.1.4 重组蛋白的功能鉴定 | 第78页 |
4.1.5 定点突变研究 | 第78-79页 |
4.2 结果与分析 | 第79-82页 |
4.2.1 基因及氨基酸序列分析 | 第79-80页 |
4.2.2 IrKSL3a生化功能鉴定 | 第80-81页 |
4.2.3 突变体生化功能鉴定 | 第81页 |
4.2.4 蛋白同源序列分析 | 第81-82页 |
4.3 讨论 | 第82-84页 |
结语 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-100页 |
文献综述 | 第100-117页 |
参考文献 | 第110-117页 |
博士研究生期间所发表论文 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |