中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
缩略词 | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-31页 |
1 寨卡病毒及其流行情况 | 第15-23页 |
1.1 寨卡病毒 | 第15-20页 |
1.2 寨卡病毒的流行病学 | 第20-22页 |
1.3 寨卡、登革、黄热及基孔肯雅病毒鉴别诊断需求 | 第22-23页 |
2 寨卡、登革、黄热及基孔肯雅病毒检测方法 | 第23-26页 |
2.1 病毒分离培养与血清学检测方法 | 第23-24页 |
2.2 分子生物学检测方法 | 第24-26页 |
3 多重实时荧光qRT-PCR | 第26-29页 |
3.1 基于染料法的多重实时荧光qRT-PCR | 第26页 |
3.2 基于探针法的多重实时荧光qRT-PCR | 第26-29页 |
4 本文的研究目的、思路及意义 | 第29-31页 |
第二章 材料与方法 | 第31-47页 |
1 材料 | 第31-34页 |
1.1 主要仪器 | 第31-32页 |
1.2 菌株和质粒 | 第32页 |
1.3 灭活病毒 | 第32页 |
1.4 试剂与耗材 | 第32-33页 |
1.5 常用溶液的配制 | 第33-34页 |
2 方法 | 第34-47页 |
2.1 引物及探针的设计 | 第34-39页 |
2.2 核酸模板的制备 | 第39-40页 |
2.3 质粒的构建 | 第40-43页 |
2.4 标准曲线的制作 | 第43页 |
2.5 常规实时荧光qRT-PCR方法 | 第43-46页 |
2.6 统计学分析 | 第46-47页 |
第三章 结果与分析 | 第47-77页 |
1 单重qRT-PCR体系的筛选与建立 | 第47-55页 |
1.1 ZIKV单重qRT-PCR体系的筛选与建立 | 第48页 |
1.2 DENV单重qRT-PCR体系的筛选与建立 | 第48-50页 |
1.3 YFV单重qRT-PCR体系的筛选与建立 | 第50-55页 |
1.4 CHIKV单重qRT-PCR体系的筛选与建立 | 第55页 |
2 实时荧光qRT-PCR组合筛选与体系优化 | 第55-66页 |
2.1 实时荧光qRT-PCR组合筛选 | 第55-61页 |
2.2 四重qRT-PCR体系优化 | 第61-66页 |
3 四重qRT-PCR体系评价 | 第66-77页 |
3.1 四重qRT-PCR体系灵敏度评价 | 第66-71页 |
3.2 四重qRT-PCR体系特异性评价 | 第71页 |
3.3 四重qRT-PCR体系重复性评价 | 第71-72页 |
3.4 四重qRT-PCR体系重叠感染检测 | 第72-75页 |
3.5 四重qRT-PCR体系对模拟ZIKV标本的检测 | 第75-77页 |
第四章 讨论 | 第77-81页 |
1 多重PCR筛选策略 | 第77-78页 |
2 多重PCR引物、探针设计 | 第78页 |
3 多重PCR与单重PCR的比较 | 第78-79页 |
4 寨卡、登革、黄热及基孔肯雅四重PCR的优势 | 第79-81页 |
第五章 总结与展望 | 第81-82页 |
1 总结 | 第81页 |
2 展望 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
在读期间的科研成果 | 第89-90页 |
致谢 | 第90页 |