| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 γ-干扰素诱导的巯基还原酶(GILT) | 第11-13页 |
| 1.1.1 GILT的分子结构特征 | 第11-12页 |
| 1.1.2 GILT的表达模式 | 第12页 |
| 1.1.3 GILT的功能 | 第12-13页 |
| 1.2 环氧化酶2基因(COX-2) | 第13-16页 |
| 1.2.1 前列腺素类生物合成途径 | 第14-15页 |
| 1.2.2 硬骨鱼类COX-2的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3 日本鳗鲡 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的技术路线、目的及意义 | 第17-18页 |
| 第2章 日本鳗鲡GILT基因的克隆与表达 | 第18-55页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验生物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 实验主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 细胞、菌株和载体 | 第18-19页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.5 实验仪器及设备 | 第19-20页 |
| 2.1.6 所需试剂 | 第20页 |
| 2.1.7 引物 | 第20-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 细菌人工感染和样品采集 | 第22页 |
| 2.2.2 不同组织总RNA的提取和检测 | 第22-23页 |
| 2.2.3 cDNA第一链合成 | 第23-24页 |
| 2.2.4 日本鳗鲡GILT基因cDNA序列的克隆 | 第24-28页 |
| 2.2.5 AjGILT-1与AjGILT-2基因组片段的克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.6 AjGILT启动子片段的扩增 | 第29页 |
| 2.2.7 AjGILT-2启动子不同缺失片段的构建 | 第29-31页 |
| 2.2.8 启动子各个缺失片段在不同真核细胞中的活性分析 | 第31-32页 |
| 2.2.9 定量PCR | 第32页 |
| 2.2.10 序列分析和数据统计分析 | 第32-33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-52页 |
| 2.3.1 总RNA的提取纯度 | 第33-34页 |
| 2.3.2 AjGILT基因鉴定及特征 | 第34-36页 |
| 2.3.3 AjGILT-1和AjGILT-2氨基酸序列的同源性分析及系统进化树构建 | 第36-40页 |
| 2.3.4 AjGILT的基因组结构 | 第40-42页 |
| 2.3.5 AjGILT-2和AjGILT-1基因启动子的生物信息学分析 | 第42-44页 |
| 2.3.6 AjGILT-2基因启动子缺失片段在HEK-293细胞中的活性 | 第44页 |
| 2.3.7 AjGILT-1及AjGILT-2在正常养殖的日本鳗鲡中不同组织/器官的表达 | 第44-46页 |
| 2.3.8 AjGILT-2在性腺前段、中段及后段中的表达差异 | 第46页 |
| 2.3.9 在E.tarda浸泡的玻璃鳗中AjGILT-1及AjGILT-2的表达 | 第46-47页 |
| 2.3.10 在LPS、PolyI:C及E.tarda刺激条件对AjGILT-1及AjGILT-2表达的影响 | 第47-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-55页 |
| 2.4.1 AjGILT-1及AjGILT-2基因的分子特征 | 第52页 |
| 2.4.2 AjGILT启动子结合位点及缺失片段活性分析 | 第52-53页 |
| 2.4.3 AjCILT-1与AjCILT-2基因的表达模式 | 第53-55页 |
| 第3章 AjCOX-2基因的克隆与表达 | 第55-69页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第55页 |
| 3.2 试验方法 | 第55-58页 |
| 3.2.1 COX-2基因cDNA序列的克隆 | 第55-57页 |
| 3.2.2 质粒提取 | 第57页 |
| 3.2.3 定量PCR | 第57-58页 |
| 3.2.4 主要的生物学软件及网站 | 第58页 |
| 3.3 实验结果 | 第58-67页 |
| 3.3.1 AjCOX-2cDNA序列分析 | 第58-60页 |
| 3.3.2 AjCOX-2氨基酸序列的相似性分析及系统进化树构建 | 第60-63页 |
| 3.3.3 AjCOX-2在正常养殖的日本鳗鲡中不同组织/器官的表达 | 第63-64页 |
| 3.3.4 在E.tarda浸泡的玻璃鳗中AjCOX-2的表达 | 第64-65页 |
| 3.3.5 在LPS、PolyI:C及E.tarda刺激条件对AjCOX-2表达的影响 | 第65-67页 |
| 3.4 讨论 | 第67-69页 |
| 3.4.1 AjCOX-2属于COX-2a基因 | 第67页 |
| 3.4.2 AjCOX-2基因的表达具有组织特异性 | 第67-68页 |
| 3.4.3 外源刺激物调节AjCOX-2基因的转录表达 | 第68-69页 |
| 第4章 小结 | 第69-71页 |
| 4.1 总结 | 第69-70页 |
| 4.2 展望 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第77页 |
