| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-19页 |
| ·生物催化法制备光学纯的手性化合物 | 第8-11页 |
| ·光学纯手性化合物的制备 | 第8-9页 |
| ·生物催化不对称合成光学纯的手性醇 | 第9-10页 |
| ·微生物整细胞法、酶法和基因工程菌合成手性化合物的比较 | 第10-11页 |
| ·立体选择性氧化还原酶的研究概况 | 第11-15页 |
| ·立体选择性氧化还原酶介绍 | 第11-13页 |
| ·立体选择性氧化还原酶的工业应用 | 第13页 |
| ·立体选择性氧化还原酶的分离纯化 | 第13-14页 |
| ·立体选择性氧化还原酶的克隆表达 | 第14-15页 |
| ·生物法制备(R)-HPBE的研究进展 | 第15-18页 |
| ·产品和底物简介 | 第15页 |
| ·(R)-HPBE的用途及市场 | 第15-17页 |
| ·生物法制备(R)-HPBE的研究进展 | 第17-18页 |
| ·本论文的研究意义和主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·本课题的课题来源及研究意义 | 第18页 |
| ·本论文的研究思路及主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·实验菌种 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·实验仪器与设备 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-27页 |
| ·菌体的培养和收集 | 第20-21页 |
| ·羰基还原酶酶活测定 | 第21页 |
| ·蛋白质含量测定方法 | 第21页 |
| ·Candida krusei SW 2026超声波破碎 | 第21页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶纯化步骤 | 第21-22页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶的纯度检测 | 第22-23页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶酶学性质研究 | 第23-24页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶对OPBE不对称还原及其产物的检测分析 | 第24-25页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶纯酶的LC-MS-MS分析 | 第25页 |
| ·基因操作 | 第25-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-53页 |
| ·Candida krusei SW 2026超声波破碎条件的确定 | 第27-29页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶酶活测定体系的确定 | 第29页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶的分离纯化 | 第29-34页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶硫酸铵分级沉淀 | 第29-30页 |
| ·DEAE阴离子交换层析初始pH的确定 | 第30-31页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶HiPrep DEAE FF阴离子交换层析 | 第31-32页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶HiTrap Blue HP亲和层析 | 第32-33页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶Superdex~(TM) 75分子筛层析 | 第33-34页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶纯度检测 | 第34-36页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶SDS-PAGE纯度检测 | 第34-35页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶Superdex~(TM) 75纯度检测和蛋白大小测定 | 第35-36页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶的纯化结果 | 第36-37页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶酶学性质的研究 | 第37-48页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶的辅酶依赖型的确定 | 第37页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶最适反应温度和热稳定性的确定 | 第37-39页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶最适pH和pH稳定性的确定 | 第39-40页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶底物特异性检测 | 第40-41页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶动力学参数的测定 | 第41-42页 |
| ·不同化学试剂对Candida krusei SW 2026羰基还原酶活力的影响 | 第42-46页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶纯酶对OPBE的转化 | 第46-47页 |
| ·Candida krusei SW 2026羰基还原酶氨基酸序列测定 | 第47-48页 |
| ·目的基因序列的分析 | 第48-53页 |
| ·Candida krusei SW 2026基因组的提取 | 第48页 |
| ·目的基因部分序列的PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·克隆载体pMD 18T-Idp1p-0.6的构建和阳性转化子的筛选 | 第49-51页 |
| ·目的基因序列的测序分析 | 第51-53页 |
| 结论与展望 | 第53-55页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 展望 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64页 |
