| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 多酚氧化酶的生物化学特性 | 第14-17页 |
| 1.1.1 多酚氧化酶的分类 | 第14-15页 |
| 1.1.2 多酚氧化酶的亚细胞定位 | 第15页 |
| 1.1.3 多酚氧化酶的结构 | 第15-16页 |
| 1.1.4 底物特异性 | 第16页 |
| 1.1.5 多酚氧化酶的酶学特性 | 第16页 |
| 1.1.6 多酚氧化酶基因水平上的研究 | 第16-17页 |
| 1.2 多酚氧化酶的功能 | 第17-20页 |
| 1.2.1 多酚氧化酶与茶叶营养品质形成的关系 | 第17-18页 |
| 1.2.2 多酚氧化酶在植物体中的生理学意义 | 第18-20页 |
| 1.2.2.1 抗病性 | 第18页 |
| 1.2.2.2 抗虫性 | 第18-19页 |
| 1.2.2.3 光保护与光合作用 | 第19页 |
| 1.2.2.4 调控植物花色的形成 | 第19-20页 |
| 2 引言 | 第20-22页 |
| 2.1 研究意义 | 第20页 |
| 2.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 2.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-28页 |
| 3.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.2 试剂与仪器 | 第22-23页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第22页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第22-23页 |
| 3.2.3 主要试剂的配方 | 第23页 |
| 3.2.3.1 菌液培养试剂 | 第23页 |
| 3.2.3.2 蛋白纯化所需主要试剂 | 第23页 |
| 3.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 3.3.1 茶树多酚氧化酶基因全长克隆 | 第23-24页 |
| 3.3.2 生物信息学分析 | 第24页 |
| 3.3.3 CsPPOs诱导表达及组织器官特异性分析 | 第24-25页 |
| 3.3.4 原核表达载体构建以及蛋白表达纯化 | 第25页 |
| 3.3.4.1 原核表达蛋白载体构建 | 第25页 |
| 3.3.4.2 重组蛋白的纯化 | 第25页 |
| 3.3.4.3 酶活性检测 | 第25页 |
| 3.3.5 过表达载体构建以及遗传转化实验 | 第25-27页 |
| 3.3.6 CsPPOs转基因烟草验证及代谢产物分析 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-43页 |
| 4.1 CSPPOS基因的全长CDNA克隆 | 第28-30页 |
| 4.2 CSPPOS的生物信息学分析 | 第30-34页 |
| 4.2.1 CsPPOs系统发育进化树分析 | 第30-32页 |
| 4.2.2 CsPPOs氨基酸的同源性分析 | 第32-33页 |
| 4.2.3 CsPPOs氨基酸序列功能预测分析 | 第33-34页 |
| 4.3 CSPPOS基因表达分析 | 第34-37页 |
| 4.4 原核表达及蛋白纯化 | 第37-39页 |
| 4.4.1 CsPPOs的蛋白纯化 | 第37-38页 |
| 4.4.2 重组蛋白的活性分析 | 第38-39页 |
| 4.5 CSPPOS基因过表达烟草分析 | 第39-43页 |
| 5 讨论 | 第43-45页 |
| 5.1 CSPPOS的进化分析 | 第43页 |
| 5.2 初步鉴定CSPPOS在茶树中的功能 | 第43页 |
| 5.3 CSPPOS的体外酶活反应 | 第43-44页 |
| 5.4 CSPPOS转基因烟草分析 | 第44-45页 |
| 6 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |