| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-26页 |
| 1.1 昆虫免疫概述 | 第16-18页 |
| 1.1.1 昆虫免疫系统 | 第16页 |
| 1.1.2 昆虫体液免疫 | 第16-17页 |
| 1.1.3 昆虫细胞免疫 | 第17-18页 |
| 1.2 家蚕免疫 | 第18-21页 |
| 1.2.1 物理屏障 | 第18页 |
| 1.2.2 家蚕体液免疫 | 第18-20页 |
| 1.2.3 家蚕细胞免疫 | 第20页 |
| 1.2.4 黑化作用 | 第20-21页 |
| 1.2.5 免疫相关基因 | 第21页 |
| 1.3 清道夫受体 | 第21-26页 |
| 1.3.1 清道夫受体的结构 | 第22-24页 |
| 1.3.2 清道夫受体的功能 | 第24页 |
| 1.3.3 C类清道夫受体的研究 | 第24页 |
| 1.3.4 家蚕清道夫受体相关研究 | 第24-26页 |
| 第2章 引言 | 第26-30页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第26页 |
| 2.2 研究主要内容 | 第26-27页 |
| 2.2.1 BmSR-C全长克隆及信息分析 | 第26-27页 |
| 2.2.2 BmSR-C在家蚕五龄3天各组织以及各时期血细胞中的表达分析 | 第27页 |
| 2.2.3 BmSR-C原核表达及抗体制备 | 第27页 |
| 2.2.4 BmSR-C在血细胞中的定位情况 | 第27页 |
| 2.2.5 BmSR-C在免疫方面的功能研究 | 第27页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第27-30页 |
| 第3章 家蚕C类清道夫受体基因BmSR-C的全长克隆及分析 | 第30-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第30-32页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.3 实验试剂及配制 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-44页 |
| 3.2.1 主要数据库及软件 | 第32-33页 |
| 3.2.2 BmSR-C基因片段的获取 | 第33-36页 |
| 3.2.3 目的片段与载体的连接 | 第36页 |
| 3.2.4 转化 | 第36页 |
| 3.2.5 阳性克隆的筛选 | 第36页 |
| 3.2.6 目的基因的测序及鉴定 | 第36页 |
| 3.2.7 RACE模板的制备 | 第36-38页 |
| 3.2.8 BmSR-C基因5’RACE和3’RACE扩增 | 第38-41页 |
| 3.2.9 BmSR-C基因序列的结构分析 | 第41页 |
| 3.2.10 BmSR-C基因的表达分析 | 第41页 |
| 3.2.11 亚细胞定位过表达载体构建 | 第41-42页 |
| 3.2.12 细胞培养 | 第42-43页 |
| 3.2.13 免疫荧光 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-50页 |
| 3.3.1 BmSR-C的全长克隆及基因结构分析 | 第44-46页 |
| 3.3.2 BmSR-C的蛋白序列分析 | 第46-47页 |
| 3.3.3 BmSR-C的多重序列比对分析 | 第47-48页 |
| 3.3.4 BmSR-C的进化分析 | 第48页 |
| 3.3.5 BmSR-C基因的时空表达分析 | 第48-49页 |
| 3.3.6 BmSR-C在BmE细胞的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第4章 家蚕C类清道夫受体基因BmSR-C的原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体制备 | 第52-66页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第52-54页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 4.1.3 实验试剂及配制 | 第52-54页 |
| 4.2 方法与步骤 | 第54-61页 |
| 4.2.1 BmSR-C原核表达载体构建 | 第54-55页 |
| 4.2.2 BmSR-C原核蛋白诱导表达 | 第55-57页 |
| 4.2.3 BmSR-C重组蛋白的纯化 | 第57-58页 |
| 4.2.4 免疫小鼠抗体制备 | 第58-59页 |
| 4.2.5 ELISA法测定鼠抗BmSR-C蛋白多抗的效价 | 第59页 |
| 4.2.6 Western blotting检测BmSR-C抗体的特异性 | 第59-60页 |
| 4.2.7 Western blotting检测BmSR-C的组织表达情况 | 第60页 |
| 4.2.8 免疫荧光检测BmSR-C在血细胞的表达情况 | 第60-61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-64页 |
| 4.3.1 BmSR-C原核表达载体的构建 | 第61页 |
| 4.3.2 BmSR-C原核诱导表达及蛋白纯化 | 第61-62页 |
| 4.3.3 BmSR-C多克隆抗体效价及特异性检测 | 第62-63页 |
| 4.3.4 BmSR-C蛋白的组织表达谱 | 第63-64页 |
| 4.3.5 BmSR-C蛋白在血细胞中表达分析 | 第64页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第64-66页 |
| 第5章 家蚕C类清道夫受体基因BmSR-C的功能研究 | 第66-72页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第66-67页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第66页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第66页 |
| 5.1.3 实验试剂及配制 | 第66-67页 |
| 5.2 实验方法 | 第67-68页 |
| 5.2.1 细菌预处理 | 第67页 |
| 5.2.2 家蚕活体免疫攻毒实验 | 第67页 |
| 5.2.3 细菌结合实验 | 第67-68页 |
| 5.2.4 家蚕体内的细菌清除实验 | 第68页 |
| 5.3 结果与分析 | 第68-70页 |
| 5.3.1 病原菌诱导BmSR-C的表达 | 第68-69页 |
| 5.3.2 BmSR-C重组蛋白与病原菌的结合 | 第69-70页 |
| 5.3.3 BmSR-C对病原菌清除的影响 | 第70页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第70-72页 |
| 第6章 综合与结论 | 第72-74页 |
| 6.1 BmSR-C的全长克隆及信息分析 | 第72页 |
| 6.2 BmSR-C的表达分析 | 第72页 |
| 6.3 BmSR-C多克隆抗体的制备及检测 | 第72-73页 |
| 6.4 BmSR-C的免疫相关功能研究 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 附录 | 第80-84页 |
| 硕士期间发表文章及课题参研情况 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
