| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第1章 综述 | 第13-41页 |
| 1.1 血管疾病 | 第13-14页 |
| 1.2 斑马鱼作为模式动物的优点 | 第14-15页 |
| 1.3 血管的发育 | 第15-31页 |
| 1.3.1 血管发生 | 第16-19页 |
| 1.3.2 血管生成 | 第19-23页 |
| 1.3.3 内皮细胞之间的连接 | 第23-25页 |
| 1.3.4 血管腔的形成 | 第25-26页 |
| 1.3.5 血管形成过程中的分子机制 | 第26-31页 |
| 1.4 ENU大规模正向遗传筛选突变体 | 第31-33页 |
| 1.5 氨酰-tRNA合成酶 | 第33-39页 |
| 1.5.1 氨酰-tRNA合成酶的经典功能 | 第33-35页 |
| 1.5.2 氨酰-tRNA合成酶非经典功能 | 第35-37页 |
| 1.5.3 氨酰tRNA合成酶的非经典功能对血管的影响 | 第37-38页 |
| 1.5.4 组氨酰-tRNA合成酶的研究现状 | 第38-39页 |
| 1.6 本研究目的 | 第39-41页 |
| 第2章 材料和方法 | 第41-67页 |
| 2.1 实验材料 | 第41-45页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第41页 |
| 2.1.2 实验试剂、耗材和仪器 | 第41-42页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第42页 |
| 2.1.4 基本培养基的配制 | 第42页 |
| 2.1.5 各种缓冲液的配制 | 第42-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-67页 |
| 2.2.1 核酸提取 | 第45-46页 |
| 2.2.2 反转录制备cDNA | 第46-47页 |
| 2.2.3 PCR | 第47-50页 |
| 2.2.4 DNA琼脂糖凝胶电泳检测和回收 | 第50-51页 |
| 2.2.5 重组质粒的构建 | 第51-53页 |
| 2.2.6 反义探针制备 | 第53-55页 |
| 2.2.7 原位杂交 | 第55-56页 |
| 2.2.8 抗体显色 | 第56-57页 |
| 2.2.9 荧光原位杂交偶联抗体显色 | 第57-58页 |
| 2.2.10 mRNA的合成和纯化 | 第58-59页 |
| 2.2.11 显微注射 | 第59页 |
| 2.2.12 药物处理实验 | 第59-60页 |
| 2.2.13 细胞培养 | 第60-61页 |
| 2.2.14 细胞免疫荧光染色 | 第61-62页 |
| 2.2.15 Western Blotting相关实验 | 第62-63页 |
| 2.2.16 ELISA kit检测Hars活性 | 第63页 |
| 2.2.17 ENU大规模正向遗传突变筛选 | 第63-64页 |
| 2.2.18 突变基因的定位克隆 | 第64-67页 |
| 第3章 实验结果 | 第67-87页 |
| 3.1 引言 | 第67-68页 |
| 3.2 实验结果 | 第68-87页 |
| 3.2.1 斑马鱼cq34突变体脑血管和节间血管呈现过度分支 | 第68-69页 |
| 3.2.2 突变体基因的定位克隆 | 第69-73页 |
| 3.2.3 Cq34突变基因在斑马鱼中编码组氨酰-tRNA合成酶(Hars) | 第73-76页 |
| 3.2.4 Hars的非经典功能调控血管发育 | 第76-78页 |
| 3.2.5 hars突变体中cxcr4a表达上调 | 第78-80页 |
| 3.2.6 Hars非经典功能影响cdh5表达 | 第80-82页 |
| 3.2.7 Hars非经典功能影响vegfa表达 | 第82-84页 |
| 3.2.8 突变体中其他血管相关因子的表达 | 第84-85页 |
| 3.2.9 Hars调控血管发育的功能在斑马鱼和人类中是保守的 | 第85-87页 |
| 第4章 结论与讨论 | 第87-93页 |
| 4.1 结论 | 第87-88页 |
| 4.1.1 Hars是新的血管发育调控因子 | 第87页 |
| 4.1.2 Hars调控血管发育是由其非经典功能介导的 | 第87页 |
| 4.1.3 Hars负调控Cdh5以及Vegfa的表达抑制斑马鱼血管过度分支 | 第87-88页 |
| 4.1.4 Hars调控血管的非经典功能在人和斑马鱼中是保守的 | 第88页 |
| 4.2 讨论 | 第88-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 致谢 | 第107-109页 |
| 博士在读期间发表的论文及科研工作 | 第109页 |
