| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| ·L-茶氨酸 | 第11-12页 |
| ·L-茶氨酸的分布 | 第11页 |
| ·L-茶氨酸的理化性质 | 第11-12页 |
| ·L-茶氨酸在茶树体内的代谢 | 第12页 |
| ·L-茶氨酸在人体内的代谢 | 第12页 |
| ·L-茶氨酸的生理功能和应用前景 | 第12-15页 |
| ·L-茶氨酸的生理功能 | 第12-14页 |
| ·L-茶氨酸的应用前景 | 第14-15页 |
| ·工业化生产L-茶氨酸的可能途径 | 第15-18页 |
| ·提取分离法 | 第15页 |
| ·化学合成法 | 第15-16页 |
| ·植物组织或细胞培养法生产L-茶氨酸 | 第16页 |
| ·微生物酶法生产L-茶氨酸 | 第16-18页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶的研究进展 | 第18-22页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶的微生物来源 | 第18-19页 |
| ·GGT 的性质 | 第19-20页 |
| ·在催化合成上的应用 | 第20-22页 |
| ·本课题的立题依据和意义 | 第22-24页 |
| ·本课题研究思路与主要内容 | 第24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| 第二章 γ-谷氨酰转肽酶产生菌种的分离、筛选及鉴定 | 第29-39页 |
| ·前言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-32页 |
| ·主要材料 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·菌种来源 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·菌种筛选 | 第30页 |
| ·菌种鉴定 | 第30-31页 |
| ·GGT 酶活力的测定 | 第31-32页 |
| ·L-茶氨酸含量的测定 | 第32页 |
| ·菌体生长浊度的测定 | 第32页 |
| ·遗传稳定实验 | 第32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-36页 |
| ·菌种的筛选 | 第32-33页 |
| ·菌种鉴定 | 第33-35页 |
| ·遗传稳定研究试验 | 第35-36页 |
| ·B. subtilis SK11.004 发酵生产GGT 的过程曲线 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第三章 酶法生产L-茶氨酸的工艺研究 | 第39-57页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-42页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·GGT 转肽活力测定方法 | 第39页 |
| ·L-茶氨酸含量的测定方法 | 第39页 |
| ·粗酶液的制备 | 第39-40页 |
| ·酶反应条件的优化 | 第40页 |
| ·L-茶氨酸原料液的脱色处理 | 第40-41页 |
| ·离子交换树脂分离纯化L-茶氨酸 | 第41页 |
| ·L-茶氨酸的结晶 | 第41-42页 |
| ·L-茶氨酸的鉴定 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-54页 |
| ·酶法合成最佳反应条件 | 第42-45页 |
| ·L-茶氨酸料液的脱色处理 | 第45-47页 |
| ·L-茶氨酸的分离纯化 | 第47-49页 |
| ·L-茶氨酸的结晶 | 第49-52页 |
| ·L-茶氨酸的鉴定 | 第52-54页 |
| ·本章小结 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 第四章 γ-谷氨酰转肽酶的分离纯化 | 第57-67页 |
| ·前言 | 第57页 |
| ·材料与方法 | 第57-60页 |
| ·菌种 | 第57页 |
| ·主要实验材料 | 第57页 |
| ·主要实验仪器 | 第57-58页 |
| ·粗酶液的制备 | 第58页 |
| ·超滤 | 第58页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第58页 |
| ·HiprepTM phenyl FF(high sub) 16/10 疏水层析 | 第58页 |
| ·Superdex 75 HiLoad 10/300 prep grade 凝胶过滤层析 | 第58页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)鉴定 | 第58-59页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第59页 |
| ·酶液中蛋白质含量的测定 | 第59-60页 |
| ·GGT 活力测定方法 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-64页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第60页 |
| ·HiprepTM phenyl FF(high sub) 16/10 疏水层析 | 第60-61页 |
| ·Superdex 75 HiLoad 10/300 prep grade 凝胶过滤层析 | 第61-62页 |
| ·Superdex 75 凝胶色谱确定GGT 分子量 | 第62-63页 |
| ·纯化结果及SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 第五章 γ-谷氨酰转肽酶的性质研究 | 第67-87页 |
| ·前言 | 第67页 |
| ·材料与方法 | 第67-70页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·主要实验仪器 | 第67页 |
| ·GGT-1 转肽活力测定方法 | 第67页 |
| ·GGT-1 水解活力测定方法 | 第67页 |
| ·蛋白质含量的测定方法 | 第67页 |
| ·L-谷氨酰胺，L-谷氨酸与L-茶氨酸的检测方法 | 第67-68页 |
| ·温度对酶活及热稳定性的影响 | 第68页 |
| ·pH 对酶活的影响 | 第68页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第68页 |
| ·底物专一性 | 第68页 |
| ·反应动力学常数的测定 | 第68-69页 |
| ·等电点的测定 | 第69页 |
| ·化学修饰剂对酶活的影响 | 第69页 |
| ·GGT-1 的圆二色谱 | 第69-70页 |
| ·GGT-1 的质谱鉴定 | 第70页 |
| ·N 端结构测定 | 第70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-84页 |
| ·pH 对酶活及稳定性的影响 | 第70-72页 |
| ·温度对酶活及热稳定性的影响 | 第72页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第72-73页 |
| ·GGT-1 的底物特异性研究 | 第73-74页 |
| ·GGT-1 的反应动力学常数 | 第74-77页 |
| ·GGT-1 的等电点的测定 | 第77-78页 |
| ·GGT-1 活性功能的必需基团的研究 | 第78-79页 |
| ·化学修饰剂对GGT-1 二级结构的影响 | 第79-80页 |
| ·GGT-1 的质谱鉴定 | 第80-83页 |
| ·GGT-1 的N 端结构测定 | 第83-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-87页 |
| 论文主要结论 | 第87-90页 |
| 论文创新点 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 附录1：N-端结构分析图谱及标准氨基酸分析图谱 | 第92-93页 |
| 附录2：GGT-1 电喷雾质谱ESI-MS 分析质量肽谱 | 第93-95页 |
| 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第95页 |
