| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| ·红曲菌生物学特性 | 第10页 |
| ·红曲菌代谢产物的研究 | 第10-14页 |
| ·Monacolin K | 第10-12页 |
| ·红曲色素 | 第12页 |
| ·桔霉素 | 第12-14页 |
| ·提高红曲中Monacolin K 含量的研究 | 第14-15页 |
| ·高产Monacolin K 红曲菌的选育 | 第14页 |
| ·红曲菌发酵产Monacolin K 条件的优化 | 第14-15页 |
| ·红曲菌遗传代谢的研究 | 第15-21页 |
| ·基因组DNA、RNA 及mRNA 提取方法的研究 | 第15页 |
| ·红曲菌基因组文库的构建 | 第15-16页 |
| ·红曲菌遗传转化方法的研究 | 第16页 |
| ·根癌农杆菌介导转化丝状真菌的研究 | 第16-20页 |
| ·红曲菌主要代谢产物功能基因的研究 | 第20-21页 |
| ·立题目的与意义 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| ·论文总体策划 | 第23-24页 |
| 第二章 根癌农杆菌介导转化构建红曲菌潮霉素抗性株 | 第24-38页 |
| ·引言 | 第24-25页 |
| ·材料与方法 | 第25-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·试剂配制 | 第26页 |
| ·大肠杆菌重组DNA 基本技术 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第27页 |
| ·根癌农杆菌介导转化红曲菌步骤 | 第27页 |
| ·红曲菌转化子全DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·引物设计及PCR 扩增条件 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-36页 |
| ·双元载体pCAMBIA 3300-gpdA-hph-trpC 的构建 | 第29-30页 |
| ·双元载体导入根癌农杆菌GV3101 | 第30-31页 |
| ·根癌农杆菌GV3101 介导转化发白红曲菌9901 | 第31-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 红曲菌转化子筛选及插入T-DNA 夹带序列测序分析 | 第38-52页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38-39页 |
| ·仪器 | 第39页 |
| ·培养基和培养条件 | 第39页 |
| ·Monacolin K 含量的测定 | 第39-40页 |
| ·桔霉素的检测 | 第40页 |
| ·大肠杆菌重组DNA 基本技术 | 第40页 |
| ·反向PCR 克隆转化子T-DNA 插入侧翼序列 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-49页 |
| ·T-DNA 插入红曲菌突变转化子发酵性能的变化 | 第41-44页 |
| ·T-DNA 插入红曲菌突变子菌落形态特征 | 第44页 |
| ·反向PCR 克隆T-DNA 插入位点侧翼序列 | 第44-45页 |
| ·T-DNA 插入位点序列分析比对 | 第45-48页 |
| ·T-DNA 插入红曲菌突变子库的构建 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-52页 |
| 第四章 种间单亲灭活原生质体融合法选育Monacolin K 高产株 | 第52-66页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·材料与方法 | 第52-55页 |
| ·菌株 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52-53页 |
| ·试剂与仪器 | 第53页 |
| ·原生质体融合的步骤 | 第53-54页 |
| ·融合重组体分子鉴定 | 第54页 |
| ·融合子发酵性能的检测 | 第54-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-65页 |
| ·渗透压稳定剂对红曲菌原生质体保持和再生的作用 | 第55-56页 |
| ·新生菌丝有利于原生质体的释放和再生 | 第56-57页 |
| ·破壁条件对红曲菌原生质体制备和再生的影响 | 第57-59页 |
| ·不同再生培养基上红曲菌原生质体的再生率 | 第59-60页 |
| ·原生质体显微形态观察 | 第60-61页 |
| ·重组红曲菌热灭活条件的研究 | 第61页 |
| ·以新建标记潮霉素筛选融合子 | 第61页 |
| ·融合子Monacolin K 生成能力的考察 | 第61-63页 |
| ·融合子的菌落形态 | 第63页 |
| ·红曲菌融合子PCR 验证 | 第63-64页 |
| ·红曲菌融合子稳定性的研究 | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 固态发酵优化提高红曲菌融合子Monacolin K 产率 | 第66-79页 |
| ·前言 | 第66页 |
| ·材料与方法 | 第66-67页 |
| ·菌株 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·主要仪器 | 第66-67页 |
| ·培养基及培养方法 | 第67页 |
| ·发酵产物中Monacolin K 和桔霉素的检测 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-77页 |
| ·外加氮源对融合子Monacolin K 合成的影响 | 第67-68页 |
| ·小米装料量对融合子产Monacolin K 的影响 | 第68-69页 |
| ·料液比对融合子生长状态与Monacolin K 合成的作用 | 第69-70页 |
| ·拌料水条件与Monacolin K 合成的关系 | 第70页 |
| ·无机盐影响Monacolin K 合成的分析 | 第70-71页 |
| ·接种量影响红曲菌融合子的生长及Monacolin K 代谢 | 第71-72页 |
| ·Monacolin K 产量随发酵时间的变化曲线 | 第72页 |
| ·红曲菌融合子固态发酵产Monacolin K 响应面法分析 | 第72-76页 |
| ·固态发酵红曲米中桔霉素的检测 | 第76-77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 主要结论与展望 | 第79-81页 |
| 主要结论 | 第79-80页 |
| 展望 | 第80-81页 |
| 论文创新点 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 专业术语中英文缩略对照表 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第93页 |
