| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 生物乙醇的发展 | 第14页 |
| 1.2 统合生物加工工艺的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3 嗜热厌氧菌乙醇生产的代谢途径 | 第16-19页 |
| 1.3.1 从丙酮酸到乙醇的发酵模式 | 第18-19页 |
| 1.4 高温厌氧菌在乙醇生产中的优势及存在的问题 | 第19-20页 |
| 1.5 高温厌氧菌的代谢工程改造 | 第20-22页 |
| 1.5.1 代谢旁路对高温厌氧菌乙醇发酵的影响 | 第20-21页 |
| 1.5.2 电子传递对乙醇产量的影响 | 第21-22页 |
| 1.6 高温厌氧菌遗传筛选标记基因的研究 | 第22页 |
| 1.7 本课题选题意义及研究的主要内容 | 第22-25页 |
| 1.7.1 选题意义 | 第22-23页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 Rx1利用乳清生产乙醇的发酵条件及其优化 | 第25-42页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-33页 |
| 2.2.1 供试菌株 | 第26页 |
| 2.2.2 主要试剂及设备 | 第26-28页 |
| 2.2.3 实验方法及培养基 | 第28-33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-40页 |
| 2.3.1 T.calidifontis Rx1乳糖发酵 | 第33-36页 |
| 2.3.2 Rx1 菌株发酵乳清条件的优化 | 第36-39页 |
| 2.3.3 T. calidifontis Rx1 利用发酵罐生产乙醇 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第三章 乙酸激酶基因敲除对 Rx1 菌株乙醇耐受性的影响 | 第42-54页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 材料和方法 | 第43-44页 |
| 3.2.1 菌种 | 第43页 |
| 3.2.2 主要试剂配制 | 第43-44页 |
| 3.3 主要仪器及耗材 | 第44-46页 |
| 3.3.1 实验方法 | 第44-46页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第46-52页 |
| 3.4.1 T.calidiforntisRx1及T.calidiforntisRx1△ack乙醇耐受性测定 | 第46-47页 |
| 3.4.2 外源乙醇对T.calidifontisRx1生长的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.3 外源乙醇对T.calidifontisRx1代谢的影响 | 第48-50页 |
| 3.4.4 关键酶蛋白含量测定 | 第50页 |
| 3.4.5 Rx1 代谢关键酶对乙醇的耐受性 | 第50-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 第四章 Rx1菌株基因敲除遗传操作系统构建的探索 | 第54-67页 |
| 4.1 引言 | 第54-55页 |
| 4.2 主要试剂及配置 | 第55-56页 |
| 4.3 试验方法 | 第56-63页 |
| 4.3.1 T.calidiforntisRx1及T.calidiforntisRx1△ack基因组提取 | 第56-57页 |
| 4.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第57-58页 |
| 4.3.3 DNA片段获取 | 第58-59页 |
| 4.3.4 感受态制备 | 第59页 |
| 4.3.5 质粒热激转化至大肠杆菌DH5α、BL | 第59页 |
| 4.3.6 质粒双酶切体系 | 第59-60页 |
| 4.3.7 琼脂糖凝胶DNA片段或回收 | 第60-61页 |
| 4.3.8 质粒提取 | 第61-62页 |
| 4.3.9 T.calidiforntisRx1电转化实验 | 第62-63页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第63-66页 |
| 4.4.1 乳清酸核苷5-磷酸脱羧酶的识别 | 第63页 |
| 4.4.2 5-FOA对细胞毒性的验证 | 第63-64页 |
| 4.4.3 重组质粒PMU1101的构建 | 第64-66页 |
| 4.4.4 重组菌株的筛选与构建工程菌株失败的原因分析 | 第66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第六章 总结与展望 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录 攻读硕士期间发表论文及申请专利目录 | 第78-80页 |
