摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
第一章 材料与方法 | 第9-18页 |
1.1 实验细胞系 | 第9页 |
1.2 主要试剂 | 第9页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第9-10页 |
1.4 细胞培养 | 第10页 |
1.5 细胞复苏 | 第10页 |
1.6 细胞传代 | 第10页 |
1.7 细胞冻存 | 第10-11页 |
1.8 MTT实验检测IP_3、IP_1、IP_6对结肠癌HT-29细胞增殖的影响 | 第11页 |
1.8.1 干预方式 | 第11页 |
1.8.2 实验步骤 | 第11页 |
1.9 流式细胞术法检测不同浓度IP_3和IP_6对HT-29细胞周期和凋亡的影响 | 第11-12页 |
1.9.1 干预方式 | 第11页 |
1.9.2 不同浓度IP_3和IP_6对HT-29细胞周期分布影响 | 第11-12页 |
1.9.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测IP_3和IP_6对HT-29细胞凋亡的影响 | 第12页 |
1.10 免疫细胞化学法测定不同浓度IP_3和IP_6对HT-29细胞PCNA、Bcl-2 及Bax表达的影响 | 第12-13页 |
1.10.1 干预方式 | 第12页 |
1.10.2 实验步骤 | 第12-13页 |
1.10.3 实验结果判断 | 第13页 |
1.11 实时定量PCR( RT-PCR)法检测IP_3和IP_6对结肠癌HT-29细胞内P53、Bcl-2、Bax mRNA表达的影响 | 第13-15页 |
1.11.1 干预方式 | 第13页 |
1.11.2 总mRNA的提取(Trizol法) | 第13页 |
1.11.3 mRNA的纯度及浓度的测定 | 第13-14页 |
1.11.4 逆转录 | 第14页 |
1.11.5 PCR扩增 | 第14-15页 |
1.11.6 引物的设计与合成 | 第15页 |
1.12 Western Blot检测不同浓度IP_3和IP_6对P53蛋白表达影响 | 第15-17页 |
1.12.1 干预方式 | 第15页 |
1.12.2 样品制备 | 第15-16页 |
1.12.3 BCA法测定各组样品蛋白浓度 | 第16页 |
1.12.4 Western blot实验操作步骤 | 第16-17页 |
1.13 统计学处理分析 | 第17-18页 |
第二章 结果 | 第18-31页 |
2.1 不同浓度IP_3、IP_1、IP_6对结肠癌HT-29细胞增殖的影响 | 第18-19页 |
2.2 不同浓度IP_3和IP_6对HT-29细胞周期分布的影响 | 第19-21页 |
2.3 不同浓度IP_3和IP_6对HT-29细胞凋亡率的影响 | 第21页 |
2.4 不同浓度IP_3和IP_6对HT-29细胞PCNA蛋白表达的影响 | 第21-23页 |
2.5 不同浓度IP_3和IP_6对结肠癌HT-29细胞Bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响 | 第23-26页 |
2.6 不同浓度IP_3和IP_6对结肠癌HT-29细胞Bax mRNA及蛋白表达的影响 | 第26-28页 |
2.7 不同浓度IP_3和IP_6对结肠癌HT-29细胞P53 mRNA及蛋白表达的影响 | 第28-31页 |
第三章 讨论 | 第31-34页 |
第四章 结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-37页 |
综述 | 第37-46页 |
综述参考文献 | 第42-46页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |