| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第15-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-33页 |
| 1.1 肾脏损伤概述 | 第19-26页 |
| 1.1.1 肾脏对机体稳态的调控 | 第19-20页 |
| 1.1.2 慢性肾损伤与肾脏纤维化 | 第20-21页 |
| 1.1.3 胰岛素抵抗、肾损伤与代谢综合征 | 第21-23页 |
| 1.1.4 肾脏脂毒性 | 第23-24页 |
| 1.1.5 赭曲霉毒素A诱导的肾脏损伤 | 第24-25页 |
| 1.1.6 肾脏损伤的动物模型 | 第25-26页 |
| 1.1.7 营养干预肾脏系统疾病的治疗 | 第26页 |
| 1.2 锌缓解细胞损伤作用的概述 | 第26-28页 |
| 1.2.1 锌与DNA合成 | 第26-27页 |
| 1.2.2 锌与细胞凋亡 | 第27页 |
| 1.2.3 外泌体与细胞损伤 | 第27-28页 |
| 1.3 曲克芦丁对脂质代谢调控作用概述 | 第28-31页 |
| 1.3.1 食物中的曲克芦丁及功能 | 第28-29页 |
| 1.3.2 曲克芦丁对细胞的保护作用 | 第29-30页 |
| 1.3.3 棕色脂肪概述 | 第30-31页 |
| 1.4 研究内容与技术路线 | 第31-33页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 OTA大鼠肝肾细胞亚慢性毒性及GRP75蛋白功能的研究 | 第33-56页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 材料、试剂与仪器 | 第33-35页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-43页 |
| 2.3.1 双向电泳 | 第35-37页 |
| 2.3.2 蛋白质的质谱鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3.3 蛋白质组学数据功能分析 | 第39页 |
| 2.3.4 蛋白质的提取 | 第39页 |
| 2.3.5 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第39-40页 |
| 2.3.6 组织包埋切片 | 第40页 |
| 2.3.7 免疫组织化学 | 第40-41页 |
| 2.3.8 细胞活力检测 | 第41页 |
| 2.3.9 RNA干扰构建Grp75沉默HKC细胞系 | 第41-42页 |
| 2.3.10 免疫荧光 | 第42页 |
| 2.3.11 数据分析 | 第42-43页 |
| 2.4 结果与分析 | 第43-53页 |
| 2.4.1 OTA对大鼠肝肾亚慢性毒性的双向电泳及基质辅助时间飞行质谱分析 | 第43-49页 |
| 2.4.2 OTA饲喂大鼠90天亚慢性毒性模型中Grp75蛋白在肾细胞中的表达量 | 第49-50页 |
| 2.4.3 OTA饲喂大鼠7天急性毒性模型中Grp75蛋白在肾细胞中的表达量 | 第50-51页 |
| 2.4.4 OTA对人肾上皮细胞(HKC)中Grp75蛋白表达量的影响 | 第51-52页 |
| 2.4.5 基因干扰Grp75蛋白对HKC细胞中Kim-1蛋白表达量的影响 | 第52-53页 |
| 2.5 讨论 | 第53-54页 |
| 2.6 本章小结 | 第54-56页 |
| 第三章 锌参与缓解OTA诱导细胞损伤及肾脏保护作用的研究 | 第56-91页 |
| 3.1 引言 | 第56页 |
| 3.2 材料、试剂与仪器 | 第56-59页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第57-58页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第58-59页 |
| 3.3 实验方法 | 第59-66页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第59页 |
| 3.3.2 细胞活力检测 | 第59页 |
| 3.3.3 细胞活性氧检测 | 第59-60页 |
| 3.3.4 锌离子浓度测定 | 第60页 |
| 3.3.5 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第60页 |
| 3.3.6 ZNF447基因敲除 | 第60-63页 |
| 3.3.7 免疫荧光 | 第63页 |
| 3.3.8 细胞成像 | 第63页 |
| 3.3.9 相位全息成像 | 第63页 |
| 3.3.10 ATP浓度检测 | 第63页 |
| 3.3.11 SOD浓度检测 | 第63-64页 |
| 3.3.12 外泌体提取 | 第64页 |
| 3.3.13 外泌体形态检测 | 第64页 |
| 3.3.14 外泌体粒径及浓度分析 | 第64页 |
| 3.3.15 RNA提取 | 第64-65页 |
| 3.3.16 RNA反转录 | 第65页 |
| 3.3.17 实时荧光定量PCR | 第65-66页 |
| 3.3.18 H&E染色 | 第66页 |
| 3.3.19 小鼠运动距离监测 | 第66页 |
| 3.3.20 血液分析 | 第66页 |
| 3.3.21 尿液分析 | 第66页 |
| 3.3.22 数据统计分析 | 第66页 |
| 3.4 结果与分析 | 第66-86页 |
| 3.4.1 锌对OTA诱导细胞损伤具有保护作用 | 第66-68页 |
| 3.4.2 锌对OTA诱导下抗凋亡Bcl-2家族蛋白的调控作用 | 第68-69页 |
| 3.4.3 锌对OTA诱导下Caspase-3及Grp75蛋白的调控作用 | 第69-70页 |
| 3.4.4 锌对OTA诱导下14-3-3蛋白及其磷酸化的调控 | 第70页 |
| 3.4.5 锌对OTA诱导下Chk1蛋白的调控 | 第70-71页 |
| 3.4.6 锌对OTA诱导下锌指蛋白的调控 | 第71-72页 |
| 3.4.7 OTA对ZNF447表达量的影响及ZNF447参与调控细胞基因组稳定性 | 第72-74页 |
| 3.4.8 锌离子促进细胞运动能力的提升 | 第74-76页 |
| 3.4.9 缺锌条件下细胞的抗氧化能力及ATP产生被显著抑制 | 第76-77页 |
| 3.4.10 锌参与介导MPC复合体及能量代谢相关蛋白的表达 | 第77-78页 |
| 3.4.11 锌通过对SDHB和NDUFB8的调控激活受损的氧化磷酸化途径 | 第78-79页 |
| 3.4.12 锌有助于调控OTA介导毒性环境中AMPK通路的平衡 | 第79-80页 |
| 3.4.13 锌补充促进了OTA处理条件下外泌体的释放 | 第80-82页 |
| 3.4.14 锌补充可以降低OTA灌胃小鼠肾脏中炎症反应的发生 | 第82-85页 |
| 3.4.15 锌可与曲克芦丁协同作用降低OTA对肾小管上皮细胞损伤 | 第85-86页 |
| 3.5 讨论 | 第86-90页 |
| 3.5.1 锌离子与细胞凋亡及DNA损伤 | 第86-87页 |
| 3.5.2 锌离子与细胞能量代谢 | 第87-90页 |
| 3.6 本章小结 | 第90-91页 |
| 第四章 曲克芦丁对缓解OTA诱导肾脏损伤及腺嘌呤诱导肾脏纤维化作用的研究 | 第91-124页 |
| 4.1 引言 | 第91-92页 |
| 4.2 材料、试剂与仪器 | 第92-94页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第92页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第92-93页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第93-94页 |
| 4.3 实验方法 | 第94-99页 |
| 4.3.1 H&E染色 | 第94页 |
| 4.3.2 血液分析 | 第94页 |
| 4.3.3 尿液分析 | 第94页 |
| 4.3.4 葡萄糖耐受实验 | 第94页 |
| 4.3.5 胰岛素耐受实验 | 第94页 |
| 4.3.6 小鼠耗氧量监测 | 第94-95页 |
| 4.3.7 小鼠转轮实验 | 第95页 |
| 4.3.8 红外热成像监测 | 第95页 |
| 4.3.9 PET-CT | 第95页 |
| 4.3.10 油红O染色 | 第95-96页 |
| 4.3.11 免疫组化 | 第96页 |
| 4.3.12 甘油三酯检测 | 第96页 |
| 4.3.13 实时荧光定量PCR | 第96-97页 |
| 4.3.14 基于UHPLC-QTOF-MS的脂质代谢组学 | 第97页 |
| 4.3.15 激光显微切割 | 第97页 |
| 4.3.16 RNA-Seq文库构建及测序 | 第97-98页 |
| 4.3.17 Western Blot | 第98页 |
| 4.3.18 马松染色 | 第98页 |
| 4.3.19 天狼星红染色 | 第98页 |
| 4.3.20 数据分析 | 第98-99页 |
| 4.4 结果与分析 | 第99-120页 |
| 4.4.1 曲克芦丁缓解OTA造成的小鼠慢性肾毒性 | 第99-101页 |
| 4.4.2 曲克芦丁对OTA喂养小鼠呼吸代谢及运动能力的调节作用 | 第101-102页 |
| 4.4.3 曲克芦丁改善小鼠能量代谢水平并减轻OTA对棕色脂肪组织活性的抑制 | 第102-104页 |
| 4.4.4 曲克芦丁对改善OTA造成小鼠肾脏炎症反应的作用 | 第104-105页 |
| 4.4.5 曲克芦丁缓解了OTA造成的肾脏脂质堆积 | 第105-109页 |
| 4.4.6 基于Smart-Seq2转录组学分析曲克芦丁对肾小管上皮细胞中脂质堆积缓解作用 | 第109-112页 |
| 4.4.7 曲克芦丁缓解腺嘌呤诱导的小鼠肾脏纤维化及炎症反应 | 第112-115页 |
| 4.4.8 曲克芦丁可以激活腺嘌呤诱导下小鼠棕色脂肪活力 | 第115-117页 |
| 4.4.9 曲克芦丁缓解腺嘌呤诱导的小鼠肾脏中胶原分泌 | 第117-119页 |
| 4.4.10 曲克芦丁缓解肾脏纤维化小鼠模型中脂质的堆积 | 第119-120页 |
| 4.5 讨论 | 第120-122页 |
| 4.6 本章小结 | 第122-124页 |
| 第五章 棕色脂肪移植缓解腺嘌呤诱导的肾脏纤维化 | 第124-138页 |
| 5.1 引言 | 第124页 |
| 5.2 材料、试剂与仪器 | 第124-125页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第124页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第124-125页 |
| 5.2.3 主要仪器 | 第125页 |
| 5.3 实验方法 | 第125-127页 |
| 5.3.1 棕色脂肪移植小鼠模型的建立 | 第125-126页 |
| 5.3.2 H&E染色 | 第126页 |
| 5.3.3 血液分析 | 第126页 |
| 5.3.4 尿液分析 | 第126页 |
| 5.3.5 葡萄糖耐受实验 | 第126页 |
| 5.3.6 胰岛素耐受实验 | 第126页 |
| 5.3.7 小鼠耗氧量监测 | 第126页 |
| 5.3.8 PET-CT | 第126页 |
| 5.3.9 油红O染色 | 第126页 |
| 5.3.10 免疫组化 | 第126-127页 |
| 5.3.11 Western Blot | 第127页 |
| 5.3.12 马松染色 | 第127页 |
| 5.3.13 天狼星红染色 | 第127页 |
| 5.3.14 数据分析 | 第127页 |
| 5.4 结果与分析 | 第127-136页 |
| 5.4.1 棕色脂肪移植缓解了腺嘌呤诱导下小鼠肾脏纤维化的发生 | 第127-132页 |
| 5.4.2 棕色脂肪移植进一步激活肾脏纤维化小鼠中棕色脂肪活力 | 第132-133页 |
| 5.4.3 棕色脂肪移植缓解肾脏纤维化模型小鼠中胶原的产生 | 第133-134页 |
| 5.4.4 棕色脂肪移植缓解肾脏纤维化模型小鼠中脂质在肾脏的堆积 | 第134-136页 |
| 5.5 讨论 | 第136页 |
| 5.6 本章小结 | 第136-138页 |
| 第六章 全文总结 | 第138-141页 |
| 6.1 全文总结 | 第138-139页 |
| 6.2 创新点 | 第139页 |
| 6.3 展望 | 第139-141页 |
| 参考文献 | 第141-167页 |
| 致谢 | 第167-169页 |
| 个人简历 | 第169-170页 |
