| 缩略词 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第15-21页 |
| 1 国内外的研究现状 | 第15-20页 |
| 1.1 中国水仙研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 植物类黄酮生物合成途径研究 | 第16-17页 |
| 1.3 黄酮醇代谢途径 | 第17页 |
| 1.4 花青素代谢途径 | 第17-18页 |
| 1.5 MYB转录因子研究进展 | 第18页 |
| 1.6 BHLH转录因子研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 转录组测序技术 | 第19-20页 |
| 2 本研究的内容和目标 | 第20-21页 |
| 2.1 研究内容 | 第20页 |
| 2.2 研究目标 | 第20-21页 |
| 第二章 漳州水仙花转录组测序及分析 | 第21-38页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1 植物材料 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2 试验方法 | 第22-24页 |
| 2.1 总RNA提取 | 第22页 |
| 2.2 转录组测序 | 第22页 |
| 2.3 测序实验流程 | 第22-23页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-36页 |
| 3.1 总RNA的电泳图与质量检测 | 第24-25页 |
| 3.2 测序数据和组装结果 | 第25-27页 |
| 3.3 Unigene功能注释 | 第27页 |
| 3.4 Unigene的基因结构分析 | 第27-29页 |
| 3.5 差异显著基因的筛选 | 第29-30页 |
| 3.6 差异表达基因的功能注释和富集分析 | 第30-32页 |
| 3.7 水仙类黄酮途径相关差异MYB转录因子的筛选 | 第32页 |
| 3.8 水仙类黄酮途径相关MYB基因蛋白质保守区的预测和分析 | 第32-33页 |
| 3.9 水仙类黄酮途径相关MYB基因编码氨基酸序列比对分析与系统进化树构建 | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 中国水仙类黄酮途径MYB基因克隆与表达分析 | 第38-54页 |
| 1 实验材料 | 第38页 |
| 1.1 植物材料 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 1.3 仪器设备 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-43页 |
| 2.1 水仙总RNA提取 | 第38-39页 |
| 2.2 cDNA的合成 | 第39页 |
| 2.3 PCR引物的设计与合成 | 第39页 |
| 2.4 NtMYB7基因cDNA的克隆 | 第39-41页 |
| 2.5 NtMYB8基因cDNA的克隆 | 第41-42页 |
| 2.6 生物信息学分析 | 第42页 |
| 2.7 实时定量PCR检测NtMYB7、NtMYB8在中国水仙花不同发育阶段和不同部位的表达 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-53页 |
| 3.1 NtMYB7、NtMYB8基因的克隆 | 第43-44页 |
| 3.2 NtMYB7、NtMYB8蛋白氨基酸理化性质分析 | 第44-46页 |
| 3.3 NtMYB7、NtMYB8蛋白二级结构预测 | 第46-48页 |
| 3.4 NtMYB7、NtMYB8蛋白的跨膜信号分析 | 第48-49页 |
| 3.5 NtMYB7、NtMYB8蛋白信号肽预测分析 | 第49-50页 |
| 3.6 NtMYB7、NtMYB8蛋白蛋白磷酸化位点预测 | 第50-52页 |
| 3.7 NtMYB7、NtMYB8在中国水仙花不同发育阶段和不同部位的表达 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 NtMYB7、NtMYB8烟草瞬时表达 | 第54-71页 |
| 1 实验材料 | 第54页 |
| 1.1 植物材料 | 第54页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-59页 |
| 2.1 重组质粒的获得 | 第54-57页 |
| 2.2 NtMYB7和NtMYB8烟草瞬时表达 | 第57-58页 |
| 2.3 烟草瞬时表达的定量分析 | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-69页 |
| 3.1 带有酶切位点的目的基因的扩增 | 第59-60页 |
| 3.2 pSAK277-NtMYB7、pSAK277-NtMYB8重组质粒构建及酶切验证 | 第60-64页 |
| 3.3 pSAK277-NtMYB7、pSAK277-NtMYB8重组质粒转化农杆菌及酶切验证 | 第64-66页 |
| 3.4 NtMYB7烟草瞬时表达结果 | 第66页 |
| 3.5 NtMYB8烟草瞬时表达结果 | 第66-67页 |
| 3.6 qPCR检测NtMYB7烟草瞬时表达叶片中结构基因的表达 | 第67-69页 |
| 3.7 qPCR检测NtMYB8烟草瞬时表达叶片中结构基因的表达 | 第69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 NtMYB7和NtMYB8基因稳定转化烟草 | 第71-77页 |
| 1 实验材料 | 第71页 |
| 1.1 材料 | 第71页 |
| 1.2 试剂 | 第71页 |
| 1.3 培养基配制 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-72页 |
| 2.1 烟草转化 | 第71-72页 |
| 2.2 转基因烟草植株鉴定 | 第72页 |
| 2.3 观察转基因烟草性状变化 | 第72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-75页 |
| 3.1 烟草稳定转化结果 | 第72-73页 |
| 3.2 转基因烟草植株的PCR检测结果 | 第73-74页 |
| 3.3 NtMYB7、NtMYB8转基因烟草植株表型观察 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 小结与展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
