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中国水仙FOMT家族基因的克隆及FOMT2基因的调控因子筛选

缩略词第8-9页
摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 引言第16-24页
    1 中国水仙花色研究现状第16页
    2 类黄酮的合成与调控研究进展第16-18页
        2.1 类黄酮的组成及功能第16-17页
        2.2 类黄酮的生物合成途径第17-18页
        2.3 类黄酮合成的转录调控第18页
    3 MYB转录因子研究进展第18-21页
        3.1 MYB转录因子及其功能第18页
        3.2 参与类黄酮合成的MYB转录因子第18-21页
    4 FOMT研究进展第21页
    5 酵母单杂交的原理及应用第21-22页
    6 本研究的主要内容和意义第22-24页
第二章: NtFOMTs基因的克隆、生物信息学分析及荧光定量表达分析第24-41页
    1 材料与方法第24-27页
        1.1 试验材料第24页
        1.2 试验方法第24-27页
            1.2.1 NtFOMTs基因全长cDNA的克隆第24-25页
            1.2.2 NtFOMTs基因全长cDNA的生物信息学分析第25-27页
            1.2.3 NtFOMTs基因定量表达分析第27页
    2 结果与分析第27-39页
        2.1 NtFOMTs基因全长cDNA结果分析第27-32页
        2.2 NtFOMTs基因全长cDNA的序列比对分析第32页
        2.3 NtFOMTs基因氨基酸序列比对分析第32-36页
        2.4 NtFOMTs基因系统进化树的构建与分析第36-38页
        2.5 NtFOMTs基因定量表达分析第38-39页
    3 讨论第39-41页
第三章: NtFOMT2基因启动子的克隆及核心元件的分析第41-49页
    1 材料与方法第41-43页
        1.1 试验材料第41页
        1.2 试验方法第41-43页
            1.2.1 中国水仙DNA的提取第41页
            1.2.2 NtFOMT2基因组DNA的克隆第41-42页
            1.2.3 NtFOMT2基因启动子的克隆第42-43页
            1.2.4 核心元件分析第43页
    2 结果与分析第43-47页
        2.1 NtFOMT2基因启动子的克隆第43页
        2.2 NtFOMT2基因启动子顺式作用元件分析第43-47页
    3 讨论第47-49页
第四章 诱饵载体的构建及报告基因本底表达水平的测定第49-53页
    1 材料与方法第49-50页
        1.1 试剂第49页
        1.2 培养基第49页
        1.3 试验方法第49-50页
            1.3.1 NtFOMT2基因启动子诱饵载体pMBS-AbAi的构建第49-50页
            1.3.2 Y1H Gold MBS菌株的AbA本底表达水平的测定第50页
    2 结果与分析第50-52页
        2.1 NtFOMT2基因启动子诱饵载体pMBS-AbAi的构建第50-51页
        2.2 诱饵载体转化酵母Y1H Gold第51页
        2.3 Y1H Gold MBS菌株的AbA'本底表达水平的确定第51-52页
    3 讨论第52-53页
第五章: 酵母单杂交文库的构建及筛选第53-71页
    1 材料与方法第53-57页
        1.1 试验材料第53页
        1.2 试验方法第53-57页
            1.2.1 逆转录并进行cDNA第一链的合成第53-54页
            1.2.2 LD-PCR(long distance)合成双链cDNA第54页
            1.2.3 使用CHROMA SPIN+TE-400柱纯化cDNA第54页
            1.2.4 cDNA融合表达文库的构建第54-55页
            1.2.5 cDNA文库转化Y1H Gold[MBS/AbAi]菌株并计算库容第55-56页
            1.2.6 阳性克隆的鉴定与筛选及cDNA质粒的分离第56页
            1.2.7 选取阳性克隆进行点对点酵母单杂验证第56页
            1.2.8 对得到的结果进行荧光定量分析第56-57页
    2 结果与分析第57-70页
        2.1 cDNA文库构建及库质量计算第57-59页
        2.2 cDNA文库插入片段大小检测第59-61页
        2.3 阳性克隆的鉴定与筛选第61-68页
        2.4 点对点酵母单杂验证第68页
        2.5 对筛选出的五个基因进行荧光定量表达分析第68-70页
    3 讨论第70-71页
第六章 结论与展望第71-73页
    1 结论第71页
    2 创新点第71页
    3 展望第71-73页
参考文献第73-81页
附录第81-92页
攻读学位期间的学术论文与研究成果第92-93页
致谢第93页

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