| 缩略词 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第14-22页 |
| 1 国内外研究现状 | 第15-20页 |
| 1.1 水仙抗性相关基因工程研究现状 | 第15页 |
| 1.2 植物WRKY转录因子研究现状 | 第15-20页 |
| 2 本研究目的、内容和技术路线 | 第20-22页 |
| 2.1 研究目的 | 第20页 |
| 2.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 '云香'水仙WRKY基因的克隆及生物信息学分析 | 第22-35页 |
| 1 材料 | 第22页 |
| 1.1 植物材料及处理 | 第22页 |
| 1.2 试剂 | 第22页 |
| 1.3 主要仪器设备与耗材 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-26页 |
| 2.1 '云香'水仙花瓣RNA提取与检测 | 第22-23页 |
| 2.2 '云香'水仙花瓣cDNA的合成 | 第23-24页 |
| 2.3 PCR引物的设计与合成 | 第24页 |
| 2.4 '云香'水仙WRKY基因cDNA克隆 | 第24-25页 |
| 2.5 生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-34页 |
| 3.1 '云香'水仙花瓣RNA提取的质量 | 第26-27页 |
| 3.2 '云香'水仙WRKY基因的克隆与序列分析 | 第27页 |
| 3.3 '云香'水仙WRKY转录因子的蛋白结构分析 | 第27-30页 |
| 3.4 '云香'水仙WRKY基因的结构域、序列比对和系统发育树分析 | 第30-34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 '云香'水仙WRKY转录因子的实时荧光定量表达分析 | 第35-42页 |
| 1 材料 | 第35页 |
| 1.1 植物材料与处理 | 第35页 |
| 1.2 试剂与设备 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| 2.1 总RNA的提取与cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第36页 |
| 2.3 实时荧光定量PCR反应体系及程序 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.1 WRKY基因在'云香'水仙不同组织中的表达分析 | 第37页 |
| 3.2 WRKY基因在'云香'水仙花不同发育时期的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.3 WRKY基因在外源生长调节物质处理后的表达分析 | 第38-39页 |
| 3.4 WRKY基因在非生物胁迫处理后的表达分析 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 '云香'水仙NtWRKYY1、NtWRKYY2基因转化烟草的研究 | 第42-55页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| 1.1 植物材料 | 第42页 |
| 1.2 菌种和载体 | 第42页 |
| 1.3 生化试剂 | 第42页 |
| 1.4 培养基配制 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-48页 |
| 2.1 基因表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 2.2 重组质粒转化农杆菌 | 第45-46页 |
| 2.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第46-47页 |
| 2.4 T_0代转基因植株的检测 | 第47页 |
| 2.5 T_1代转基因烟草干旱和盐胁迫处理 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-53页 |
| 3.1 植物表达载体的构建及鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2 转基因烟草的培育与筛选 | 第49-50页 |
| 3.3 T_0代转基因烟草的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 T_1代转基因烟草的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.5 T_1代转基因烟草的抗旱和抗盐能力初步分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 植物表达载体的构建 | 第53页 |
| 4.2 转基因烟草的抗旱和抗盐能力初步分析 | 第53-55页 |
| 第五章 结论与展望 | 第55-57页 |
| 1 结论 | 第55页 |
| 2 展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 '云香'水仙WRKY基因ORF序列 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 | 第64-65页 |
| 1 攻读学位期间发表论文 | 第64页 |
| 2 参与课题项目 | 第64页 |
| 3 在校期间获奖情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
