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自噬与细胞缝隙连接通讯在镉致大鼠肝细胞损伤过程中的作用

中文摘要第3-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略语表第12-14页
第一部分 文献综述第14-28页
    第一章 镉毒性研究进展第14-17页
        1 镉的肝脏毒性第14-15页
        2 镉的毒性机理第15-17页
            2.1 琉基酶的失活第15页
            2.2 炎症因子和黏附分子的生成第15页
            2.3 多种基因的毒性损伤第15-16页
            2.4 干扰微量元素的代谢第16页
            2.5 影响细胞的侵袭第16-17页
    第二章 自噬研究进展第17-22页
        1 自噬分类第17页
            1.1 微自噬第17页
            1.2 分子伴侣介导的自噬第17页
            1.3 巨自噬第17页
        2 自噬的诱导与调节因素第17-18页
        3 自噬相关蛋白的表达第18-19页
            3.1 Beclin-1第18-19页
            3.2 Atg7第19页
            3.3 LC3第19页
            3.4 P62第19页
        4 自噬的研究进展第19-20页
        5 镉与自噬第20页
        6 肝与自噬第20-22页
    第三章 缝隙连接概述第22-27页
        1 缝隙连接通讯简介第22页
        2 缝隙连接蛋白第22-23页
        3 缝隙连接蛋白磷酸化修饰第23页
        4 缝隙连接的作用第23-24页
        5 缝隙连接与自噬第24-25页
        6 镉与缝隙连接第25-26页
        7 肝脏中的缝隙连接第26-27页
    本研究的目的和意义第27-28页
第二部分 试验研究第28-64页
    第一章 镉对BRL 3A细胞损伤的时间效应第28-34页
        1 材料和方法第28-30页
            1.1 试验细胞株第28页
            1.2 主要仪器与试剂第28页
            1.3 主要试剂的配制第28-29页
            1.4 细胞冻存与复苏第29页
            1.5 xCELLigence细胞实时分析技术(RTCA)检测细胞指数(CI)第29页
            1.6 Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的状态第29页
            1.7 BRL 3A细胞超微结构观察第29-30页
        2 结果第30-33页
            2.1 镉对BRL 3A细胞指数的影响第30页
            2.2 镉对细胞核形态学的影响第30-31页
            2.3 镉对BRL 3A细胞超微结构的影响第31-33页
        3 讨论第33-34页
    第二章 镉致BRL3A细胞损伤与自噬的关系第34-40页
        1 材料和方法第34-36页
            1.1 试验细胞株第34页
            1.2 主要仪器与试剂第34页
            1.3 主要试剂的配制第34-35页
            1.4 BRL 3A细胞超微结构观察第35页
            1.5 免疫荧光检测LC3聚点第35页
            1.6 蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白的表达第35-36页
        2 结果第36-38页
            2.1 镉对BRL 3A细胞自噬小体的影响第36页
            2.2 镉对BRL 3A细胞LC3聚点分布的影响第36-37页
            2.3 镉对BRL 3A细胞相关自噬蛋白表达的影响第37-38页
        3 讨论第38-40页
    第三章 镉致BRL 3A细胞损伤与GJIC的关系第40-58页
        1 材料和方法第40-41页
            1.1 试验细胞株第40页
            1.2 主要仪器与试剂第40页
            1.3 主要试剂的配制第40页
            1.4 划痕染料标记示踪技术(SL/DT)测定GJIC第40-41页
            1.5 免疫荧光检测Cx43分布第41页
            1.6 蛋白免疫印迹法检测缝隙连接相关蛋白的表达第41页
            1.7 xCELLigence细胞实时分析技术(RTCA)检测细胞指数(CI)第41页
        2 结果第41-56页
            2.1 镉致BRL 3A细胞损伤的不同时间点对GJIC的影响第41-44页
            2.2 GJIC促进剂和抑制剂在镉致BRL 3A细胞损伤中对GJIC的影响第44-50页
            2.3 Cx蛋白抑制剂在镉致BRL 3A细胞损伤中对GJIC的影响第50-56页
        3 讨论第56-58页
    第四章 镉致BRL 3A细胞损伤中GJIC对自噬的影响第58-64页
        1 材料和方法第58-59页
            1.1 试验细胞株第58页
            1.2 主要仪器与试剂第58页
            1.3 主要试剂的配制第58页
            1.4 BRL 3A细胞超微结构观察第58页
            1.5 EGFP-pmCherry-LC3质粒转染第58-59页
            1.6 蛋白免疫印迹法检测缝隙连接相关蛋白的表达第59页
        2 结果第59-62页
            2.1 ATRA、GA与镉处理对BRL 3A细胞自噬体的影响第59页
            2.2 ATRA、GA与镉处理对BRL 3A细胞LC3聚点影响第59-60页
            2.3 添加GA、ATRA对镉致BRL 3A细胞自噬相关蛋白的影响第60-61页
            2.4 添加Dynasore、 Ro318220对镉致BRL 3A细胞自噬相关蛋白的影响第61-62页
        3 讨论第62-64页
全文结论第64-65页
参考文献第65-79页
致谢第79-80页
攻读硕士期间发表的学术论文第80-81页

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