中文摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略语表 | 第12-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
第一章 镉毒性研究进展 | 第14-17页 |
1 镉的肝脏毒性 | 第14-15页 |
2 镉的毒性机理 | 第15-17页 |
2.1 琉基酶的失活 | 第15页 |
2.2 炎症因子和黏附分子的生成 | 第15页 |
2.3 多种基因的毒性损伤 | 第15-16页 |
2.4 干扰微量元素的代谢 | 第16页 |
2.5 影响细胞的侵袭 | 第16-17页 |
第二章 自噬研究进展 | 第17-22页 |
1 自噬分类 | 第17页 |
1.1 微自噬 | 第17页 |
1.2 分子伴侣介导的自噬 | 第17页 |
1.3 巨自噬 | 第17页 |
2 自噬的诱导与调节因素 | 第17-18页 |
3 自噬相关蛋白的表达 | 第18-19页 |
3.1 Beclin-1 | 第18-19页 |
3.2 Atg7 | 第19页 |
3.3 LC3 | 第19页 |
3.4 P62 | 第19页 |
4 自噬的研究进展 | 第19-20页 |
5 镉与自噬 | 第20页 |
6 肝与自噬 | 第20-22页 |
第三章 缝隙连接概述 | 第22-27页 |
1 缝隙连接通讯简介 | 第22页 |
2 缝隙连接蛋白 | 第22-23页 |
3 缝隙连接蛋白磷酸化修饰 | 第23页 |
4 缝隙连接的作用 | 第23-24页 |
5 缝隙连接与自噬 | 第24-25页 |
6 镉与缝隙连接 | 第25-26页 |
7 肝脏中的缝隙连接 | 第26-27页 |
本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二部分 试验研究 | 第28-64页 |
第一章 镉对BRL 3A细胞损伤的时间效应 | 第28-34页 |
1 材料和方法 | 第28-30页 |
1.1 试验细胞株 | 第28页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第28页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
1.4 细胞冻存与复苏 | 第29页 |
1.5 xCELLigence细胞实时分析技术(RTCA)检测细胞指数(CI) | 第29页 |
1.6 Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的状态 | 第29页 |
1.7 BRL 3A细胞超微结构观察 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-33页 |
2.1 镉对BRL 3A细胞指数的影响 | 第30页 |
2.2 镉对细胞核形态学的影响 | 第30-31页 |
2.3 镉对BRL 3A细胞超微结构的影响 | 第31-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
第二章 镉致BRL3A细胞损伤与自噬的关系 | 第34-40页 |
1 材料和方法 | 第34-36页 |
1.1 试验细胞株 | 第34页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第34页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第34-35页 |
1.4 BRL 3A细胞超微结构观察 | 第35页 |
1.5 免疫荧光检测LC3聚点 | 第35页 |
1.6 蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白的表达 | 第35-36页 |
2 结果 | 第36-38页 |
2.1 镉对BRL 3A细胞自噬小体的影响 | 第36页 |
2.2 镉对BRL 3A细胞LC3聚点分布的影响 | 第36-37页 |
2.3 镉对BRL 3A细胞相关自噬蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
第三章 镉致BRL 3A细胞损伤与GJIC的关系 | 第40-58页 |
1 材料和方法 | 第40-41页 |
1.1 试验细胞株 | 第40页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第40页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第40页 |
1.4 划痕染料标记示踪技术(SL/DT)测定GJIC | 第40-41页 |
1.5 免疫荧光检测Cx43分布 | 第41页 |
1.6 蛋白免疫印迹法检测缝隙连接相关蛋白的表达 | 第41页 |
1.7 xCELLigence细胞实时分析技术(RTCA)检测细胞指数(CI) | 第41页 |
2 结果 | 第41-56页 |
2.1 镉致BRL 3A细胞损伤的不同时间点对GJIC的影响 | 第41-44页 |
2.2 GJIC促进剂和抑制剂在镉致BRL 3A细胞损伤中对GJIC的影响 | 第44-50页 |
2.3 Cx蛋白抑制剂在镉致BRL 3A细胞损伤中对GJIC的影响 | 第50-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第四章 镉致BRL 3A细胞损伤中GJIC对自噬的影响 | 第58-64页 |
1 材料和方法 | 第58-59页 |
1.1 试验细胞株 | 第58页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第58页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第58页 |
1.4 BRL 3A细胞超微结构观察 | 第58页 |
1.5 EGFP-pmCherry-LC3质粒转染 | 第58-59页 |
1.6 蛋白免疫印迹法检测缝隙连接相关蛋白的表达 | 第59页 |
2 结果 | 第59-62页 |
2.1 ATRA、GA与镉处理对BRL 3A细胞自噬体的影响 | 第59页 |
2.2 ATRA、GA与镉处理对BRL 3A细胞LC3聚点影响 | 第59-60页 |
2.3 添加GA、ATRA对镉致BRL 3A细胞自噬相关蛋白的影响 | 第60-61页 |
2.4 添加Dynasore、 Ro318220对镉致BRL 3A细胞自噬相关蛋白的影响 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
全文结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第80-81页 |