中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 研究背景 | 第12页 |
2 鸟类性别鉴定研究进展 | 第12-14页 |
2.1 常规雌雄鉴别方法 | 第12-13页 |
2.2 细胞生物学的方法 | 第13页 |
2.3 分子生物学的方法 | 第13页 |
2.4 DNA含量测定法 | 第13页 |
2.5 超声波扫描法 | 第13-14页 |
2.6 光谱照射法 | 第14页 |
2.7 自动鉴别法 | 第14页 |
3 性别控制的研究进展 | 第14-17页 |
3.1 芳香化酶的研究进展 | 第15-16页 |
3.2 芳香化酶抑制剂诱导家禽性别的研究 | 第16页 |
3.3 雌二醇诱导家禽性别的研究 | 第16-17页 |
4 鸟类性别决定机制 | 第17-20页 |
4.1 Z染色体剂量依赖的雄性决定论 | 第17页 |
4.2 W连锁的雌性性别决定效应 | 第17-18页 |
4.3 鸟类的性别决定相关基因 | 第18-20页 |
5 本研究目的意义 | 第20-22页 |
第二章 直接PCR技术鉴定早期鸭胚性别 | 第22-33页 |
1 实验材料 | 第22-23页 |
1.1 实验动物 | 第22页 |
1.2 主要试剂 | 第22页 |
1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-28页 |
2.1 样品采集 | 第23-24页 |
2.2 PCR扩增引物的设计 | 第24页 |
2.3 不同性别鉴定方法的探讨 | 第24-28页 |
3 实验结果 | 第28-31页 |
3.1 提取DNA进行PCR性别鉴定体系的确立 | 第28页 |
3.2 家鸭微量全血直接PCR性别鉴定体系的建立 | 第28-30页 |
3.3 尿囊液直接PCR性别鉴定体系的建立 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
第三章 性反转鸭胚性腺形态学变化 | 第33-44页 |
1 材料 | 第33-35页 |
1.1 实验材料 | 第33页 |
1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
2 实验方法 | 第35-36页 |
2.1 药物配制和鸭胚注射 | 第35页 |
2.2 样品采集 | 第35页 |
2.3 性腺石蜡切片制作 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-42页 |
3.1 鸭胚性腺外观形态学观察 | 第36-38页 |
3.2 鸭胚性腺切片形态学观察 | 第38-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
第四章 鸭性别决定候选基因在胚胎期中的表达 | 第44-60页 |
1 材料 | 第44-45页 |
1.1 实验材料 | 第44页 |
1.2 主要试剂 | 第44页 |
1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
2 实验方法 | 第45-49页 |
2.1 药物配制和鸭胚注射 | 第45页 |
2.2 样品采集 | 第45-46页 |
2.3 引物设计及合成 | 第46页 |
2.4 PCR鉴定胚胎性别 | 第46-47页 |
2.5 RNA提取和cDNA合成 | 第47-48页 |
2.6 实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
2.7 实时荧光定量PCR分析 | 第49页 |
3 实验结果 | 第49-57页 |
3.1 DMRT1基因的表达 | 第49-51页 |
3.2 SOX9基因的表达 | 第51-52页 |
3.3 AMH基因的表达 | 第52-53页 |
3.4 P450arom基因的表达 | 第53-54页 |
3.5 FOXL2基因的表达 | 第54-56页 |
3.6 SF-1基因的表达 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
4.1 DMRT1基因的作用 | 第57页 |
4.2 SOX9基因的作用 | 第57页 |
4.3 AMH基因的作用 | 第57-58页 |
4.4 P450arom基因的作用 | 第58页 |
4.5 FOXL2基因的作用 | 第58-59页 |
4.6 SF-1基因的作用 | 第59-60页 |
第五章 过表达和干扰鸭SOX9和FOXL2基因对性别分化相关基因的影响 | 第60-74页 |
1 实验材料 | 第60-62页 |
1.1 实验动物和细胞系 | 第60页 |
1.2 主要试剂 | 第60-61页 |
1.3 主要仪器 | 第61-62页 |
2 实验方法 | 第62-66页 |
2.1 过表达载体构建 | 第62-65页 |
2.2 干扰载体构建 | 第65页 |
2.3 转染 | 第65-66页 |
2.4 荧光定量PCR | 第66页 |
3 实验结果 | 第66-72页 |
3.1 总RNA的质量检测 | 第66-67页 |
3.2 鸭SOX9和FOXL2基因过表达质粒双酶切图 | 第67页 |
3.3 鸭SOX9和FOXL2基因干扰载体的筛选 | 第67-69页 |
3.4 过表达和干扰鸭SOX9基因对性别分化相关基因的影响 | 第69-70页 |
3.5 过表达和干扰鸭FOXL2基因对性别分化相关基因的影响 | 第70-72页 |
4 讨论 | 第72-74页 |
4.1 过表达和干扰鸭SOX9基因对性别分化相关基因的影响 | 第72页 |
4.2 过表达和干扰鸭FOXL2基因对性别分化相关基因的影响 | 第72-74页 |
全文结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第85-86页 |