摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
1.1 钙代谢研究进展 | 第10-19页 |
1.1.1 钙的输入 | 第11-13页 |
1.1.2 胞内钙离子的浓度缓冲与区室化 | 第13-17页 |
1.1.3 钙离子的输出 | 第17-19页 |
1.2 Ca~(2+)-ATPase type 2wb (PMCA2wb) 的研究进展 | 第19-23页 |
1.2.1 PMCA 的结构 | 第19-20页 |
1.2.2 PMCA 的酶学机制 | 第20页 |
1.2.3 PMCA 的亚型 | 第20-22页 |
1.2.4 PMCA2wb 的功能研究进展 | 第22-23页 |
1.3 真核细胞启动子研究进展 | 第23-25页 |
1.3.1 启动子克隆方法 | 第24页 |
1.3.2 启动子功能分析方法 | 第24-25页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 PMCA2wb 基因启动子的克隆与生物信息学分析 | 第26-31页 |
2.1 材料与方法 | 第26-27页 |
2.1.1 材料、试剂及仪器 | 第26页 |
2.1.2 试验方法 | 第26-27页 |
2.2 结果及分析 | 第27-30页 |
2.2.1 PMCA2wb 基因启动子的克隆 | 第27-28页 |
2.2.2 PMCA2wb 基因启动子序列分析 | 第28-30页 |
2.3 讨论 | 第30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第三章 PMCA2wb 基因启动子缺失片段载体的构建与启动子核心区域的确定 | 第31-39页 |
3.1 材料与方法 | 第31-33页 |
3.1.1 材料 | 第31页 |
3.1.2 方法 | 第31-33页 |
3.2 结果与分析 | 第33-37页 |
3.2.1 PMCA2wb 启动子 5'缺失片段的克隆 | 第33-34页 |
3.2.2 PMCA2wb 启动子 5'缺失片段荧光素酶报告基因载体的构建 | 第34-35页 |
3.2.3 PMCA 2wb 启动子 5'缺失片段启动子的活性分析 | 第35-37页 |
3.3 讨论 | 第37-38页 |
3.3.1 PMCA 2wb 启动子在 MECs 和 MCF-7 细胞中的活性分析 | 第37页 |
3.3.2 PMCA 2wb 启动子核心区域的结构与功能分析 | 第37-38页 |
3.4 小结 | 第38-39页 |
第四章 PMCA 2wb 基因启动子元件的定点突变分析 | 第39-45页 |
4.1 材料与方法 | 第39-40页 |
4.1.1 试验材料 | 第39页 |
4.1.2 试验方法 | 第39-40页 |
4.2 结果与分析 | 第40-43页 |
4.2.1 PMCA2wb 启动子突变片段的扩增 | 第40-41页 |
4.2.2 PMCA2wb 启动子突变片段荧光素酶报告基因载体的构建 | 第41-42页 |
4.2.3 PMCA2wb 启动子突变体双荧光素酶报告基因活性检测 | 第42-43页 |
4.3 讨论 | 第43-44页 |
4.3.1 定点突变 | 第43页 |
4.3.2 顺式作用元件对 PMCA2wb 转录活性影响的分析 | 第43-44页 |
4.4 小结 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录一 | 第53-54页 |
附录二 | 第54-55页 |
附录三 | 第55-56页 |
附录四 | 第56-57页 |
附录五 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |