| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-24页 |
| 1 食管癌 | 第14-15页 |
| 2 冬凌草 | 第15-16页 |
| 3 PI3K/Akt/mTOR信号通路 | 第16-17页 |
| 4 雷帕霉素及其衍生物 | 第17-19页 |
| 5 细胞凋亡与肿瘤 | 第19-21页 |
| 6 细胞自噬与肿瘤 | 第21-24页 |
| 第二章 OP16联合雷帕霉素协同抗食管鳞癌的体外活性及机制研究 | 第24-62页 |
| 第一节 食管鳞癌细胞中OP16联合雷帕霉素对细胞增殖及Akt磷酸化的影响 | 第25-39页 |
| 1 实验材料 | 第25-29页 |
| 1.1 实验设备 | 第25-26页 |
| 1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 试剂配制 | 第27-28页 |
| 1.4 细胞株 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.1 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.2 克隆形成实验 | 第30页 |
| 2.3 CCK-8 | 第30-31页 |
| 2.4 Western blot | 第31-33页 |
| 2.5 统计学分析 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-37页 |
| 3.1 OP16与雷帕霉素联用对细胞克隆形成能力的影响 | 第33-34页 |
| 3.2 OP16与RAD001联用对细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
| 3.3 OP16与雷帕霉素联用对Akt磷酸化的影响 | 第35-36页 |
| 3.4 OP16单用或与雷帕霉素联用对Akt上游靶点表达的影响 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 第二节 食管鳞癌细胞中OP16联合雷帕霉素对细胞凋亡的诱导作用及机制研究 | 第39-45页 |
| 1 实验材料 | 第39页 |
| 1.1 实验设备 | 第39页 |
| 1.2 实验试剂 | 第39页 |
| 1.3 试剂配制 | 第39页 |
| 1.4 细胞株 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-41页 |
| 2.1 Annexin V-FITC/PI染色 | 第39-40页 |
| 2.2 Western blot | 第40页 |
| 2.3 统计学处理 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-44页 |
| 3.1 OP16对细胞凋亡的诱导作用 | 第41页 |
| 3.2 OP16对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.3 OP16与雷帕霉素联用对细胞凋亡的诱导作用 | 第42-43页 |
| 3.4 OP16与雷帕霉素联用对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44页 |
| 5 小结 | 第44-45页 |
| 第三节 食管鳞癌细胞中OP16对自噬性细胞死亡的诱导作用及机制研究 | 第45-62页 |
| 1 实验材料 | 第45-47页 |
| 1.1 实验设备 | 第45页 |
| 1.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 1.3 试剂配制 | 第46页 |
| 1.4 细胞株 | 第46-47页 |
| 2 实验方法 | 第47-51页 |
| 2.1 Western blot | 第47页 |
| 2.2 免疫荧光 | 第47-48页 |
| 2.3 shRNA质粒转染 | 第48-49页 |
| 2.4 mRFP-GFP-LC3腺病毒感染 | 第49-50页 |
| 2.5 共聚焦显微镜检测自噬流 | 第50页 |
| 2.6 透射电子显微镜检测自噬体 | 第50页 |
| 2.7 PI染色 | 第50-51页 |
| 2.8 CCK-8 | 第51页 |
| 2.9 统计学分析 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-60页 |
| 3.1 OP16对自噬关键蛋白LC3和SQSTM1/p62表达和分布的影响 | 第51-53页 |
| 3.2 OP16对细胞自噬过程的影响 | 第53-56页 |
| 3.3 OP16诱导的自噬和凋亡之间关系探讨 | 第56-58页 |
| 3.4 OP16诱导自噬的分子机制探讨 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 第三章 OP16联合雷帕霉素协同抗食管鳞癌的体内活性、机制及毒性研究 | 第62-76页 |
| 1 实验材料 | 第62-63页 |
| 1.1 实验设备 | 第62页 |
| 1.2 实验试剂 | 第62页 |
| 1.3 试剂配制 | 第62-63页 |
| 1.4 实验动物 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-67页 |
| 2.1 环糊精包合物制备 | 第63页 |
| 2.2 裸鼠移植瘤实验 | 第63-65页 |
| 2.3 H&E染色 | 第65页 |
| 2.4 TUNEL | 第65-67页 |
| 2.5 Western blot | 第67页 |
| 2.6 统计学分析 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-74页 |
| 3.1 OP16与雷帕霉素联用对裸鼠移植瘤生长的抑制作用 | 第67-68页 |
| 3.2 OP16与雷帕霉素联用对肿瘤细胞凋亡的体内诱导作用 | 第68-70页 |
| 3.3 OP16与雷帕霉素联用对裸鼠移植瘤中相关蛋白表达的影响 | 第70-71页 |
| 3.4 OP16与雷帕霉素联用在裸鼠体内的药物毒性评价 | 第71-74页 |
| 4 讨论 | 第74-75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 个人简历 | 第87-88页 |
| 硕士期间发表论文 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
