摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-10页 |
引言 | 第17-19页 |
第一部分 FNC体外抗柯萨奇病毒B3活性及机制研究 | 第19-42页 |
1 材料与仪器 | 第19-22页 |
1.1 实验细胞 | 第19页 |
1.2 实验病毒 | 第19页 |
1.3 实验药物 | 第19页 |
1.4 主要试剂 | 第19-21页 |
1.5 主要仪器 | 第21-22页 |
1.6 溶液配置 | 第22页 |
2 实验方法 | 第22-33页 |
2.1 FNC体外抗CVB3药效学实验 | 第22-26页 |
2.1.1 细胞的复苏、培养、传代和冻存 | 第22-23页 |
2.1.2 FNC对Hela细胞的毒性测定 | 第23-24页 |
2.1.3 CVB3病毒扩增 | 第24页 |
2.1.4 CVB3滴度测定 | 第24页 |
2.1.5 FNC体外抗CVB3活性实验 | 第24-25页 |
2.1.6 三种作用方式检测FNC体外抗CVB3活性 | 第25-26页 |
2.2 FNC体外抗CVB3机制的初步探索 | 第26-33页 |
2.2.1 FNC体外抗CVB3对病毒、免疫及炎症相关基因表达的影响 | 第26-30页 |
2.2.1.1 引物设计与合成 | 第26-27页 |
2.2.1.2 细胞中总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.1.3 RNA提取质量检测 | 第28页 |
2.2.1.3.1 RNA纯度检测 | 第28页 |
2.2.1.3.2 RNA完整性检测 | 第28页 |
2.2.1.4 RNA反转录 | 第28-29页 |
2.2.1.5 RT-PCR反应 | 第29-30页 |
2.2.2 FNC对CVB3感染的Hela细胞中NF-κB蛋白表达的影响 | 第30-33页 |
2.2.2.1 细胞总蛋白的提取 | 第30页 |
2.2.2.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第30-31页 |
2.2.2.3 制备聚丙烯酰胺凝胶 | 第31页 |
2.2.2.4 上样及电泳 | 第31-32页 |
2.2.2.5 转膜 | 第32页 |
2.2.2.6 封闭 | 第32页 |
2.2.2.7 孵育一抗 | 第32页 |
2.2.2.8 孵育二抗 | 第32-33页 |
2.2.2.9 成像 | 第33页 |
3 数据统计分析 | 第33页 |
4 实验结果 | 第33-39页 |
4.1 FNC体外抗CVB3药效实验结果 | 第33-36页 |
4.1.1 FNC对Hela细胞毒性结果 | 第33-34页 |
4.1.2 CVB3的病毒滴度结果 | 第34页 |
4.1.3 FNC体外抗CVB3活性结果 | 第34-35页 |
4.1.4 FNC体外对CVB3的作用方式 | 第35-36页 |
4.2 FNC体外抗CVB3机制研究结果 | 第36-39页 |
4.2.1 RNA质量检测结果 | 第36页 |
4.2.2 FNC体外抗CVB3对病毒、免疫及炎症相关基因表达的影响结果 | 第36-37页 |
4.2.3 FNC对CVB3感染的Hela细胞中NF-κB蛋白表达的影响结果 | 第37-39页 |
5 讨论 | 第39-41页 |
6 小结 | 第41-42页 |
第二部分 FNC体内抗柯萨奇病毒B3活性及机制研究 | 第42-54页 |
1 材料与仪器 | 第42-43页 |
1.1 实验病毒 | 第42页 |
1.2 实验动物 | 第42页 |
1.3 实验药物 | 第42页 |
1.4 主要试剂 | 第42-43页 |
1.5 主要仪器 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-46页 |
2.1 FNC体内抗CVB3药效学实验 | 第43-44页 |
2.1.1 建立病VMC小鼠模型 | 第43页 |
2.1.2 动物处理 | 第43页 |
2.1.3 血清酶活检测 | 第43-44页 |
2.1.4 心脏病理组织检测 | 第44页 |
2.2 FNC体内抗CVB3机制的研究 | 第44-46页 |
2.2.1 RT-PCR法检测小鼠脏器中CVB3基因的表达 | 第44-45页 |
2.2.1.1 引物设计与合成 | 第44-45页 |
2.2.1.2 组织中总RNA的提取 | 第45页 |
2.2.1.3 反转录及RT-PCR反应 | 第45页 |
2.2.2 血清炎症因子的检测 | 第45-46页 |
3 统计学分析 | 第46页 |
4 实验结果 | 第46-51页 |
4.1 FNC体内抗CVB3的药效学实验结果 | 第46-48页 |
4.1.1 接种CVB3病毒对Balb/c小鼠状态的影响 | 第46页 |
4.1.2 FNC对VMC小鼠血清酶活影响 | 第46-47页 |
4.1.3 心脏病理学检测结果 | 第47-48页 |
4.2 FNC体内抗CVB3机制研究结果 | 第48-51页 |
4.2.1 FNC对VMC小鼠脏器中CVB3基因的影响结果 | 第48-50页 |
4.2.2 FNC对VMC小鼠血清中炎症因子的影响 | 第50-51页 |
5 讨论 | 第51-53页 |
6 小结 | 第53-54页 |
全文结论 | 第54-55页 |
创新点 | 第55-56页 |
展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
综述 | 第60-74页 |
参考文献 | 第69-74页 |
个人简介 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |