| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 蒲公英研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 蒲公英形态特征 | 第12页 |
| 1.1.2 蒲公英化学成分研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 蒲公英药理作用研究 | 第13-14页 |
| 1.2 植物再生体系建立条件概述 | 第14-15页 |
| 1.2.1 外植体 | 第14页 |
| 1.2.2 培养基组成和化学添加剂 | 第14-15页 |
| 1.2.3 植物激素 | 第15页 |
| 1.3 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第15-17页 |
| 1.3.1 农杆菌介导转化的原理 | 第15-16页 |
| 1.3.2 影响农杆菌介导转化因素 | 第16页 |
| 1.3.3 农杆菌介导植物转化的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 植物体中绿原酸生物合成研究概述 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料、质粒和菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第20页 |
| 2.1.4 试验中所用溶液母液的配制 | 第20-21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 丹东蒲公英无菌苗培养方法 | 第21页 |
| 2.2.2 丹东蒲公英再生体系建立方法 | 第21-22页 |
| 2.2.3 pRI-HQT载体构建及转化 | 第22-23页 |
| 2.2.4 农杆菌GV3101的准备 | 第23-24页 |
| 2.2.5 叶片外植体分化对卡那霉素敏感性测定 | 第24页 |
| 2.2.6 不定芽生根对卡那霉素敏感性测定 | 第24页 |
| 2.2.7 头孢霉素浓度的筛选 | 第24页 |
| 2.2.8 叶片外植体预培养时间 | 第24页 |
| 2.2.9 农杆菌OD600值和侵染时间 | 第24页 |
| 2.2.10 共培养时间 | 第24页 |
| 2.2.11 乙酰丁香酮浓度的优化 | 第24-25页 |
| 2.2.12 转基因植物的分析 | 第25-26页 |
| 2.2.13 统计分析 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| 3.1 6-BA和NAA对不定芽再生影响 | 第27-28页 |
| 3.2 不同强度的MS培养基和NAA对不定芽生根影响 | 第28-30页 |
| 3.3 HQT基因过表达载体的构建 | 第30-33页 |
| 3.3.1 HQT基因的获得 | 第30页 |
| 3.3.2 HQT基因连接到p MD18-T载体的鉴定和测序 | 第30-31页 |
| 3.3.3 pRI-HQT过表达载体的鉴定和测序 | 第31-32页 |
| 3.3.4 HQT基因与NCBI数据库中基因序列比对结果 | 第32-33页 |
| 3.3.5 重组载体pRI-HQT双酶切鉴定 | 第33页 |
| 3.4 卡那霉素对建立丹东蒲公英遗传转化体系影响 | 第33-35页 |
| 3.5 头孢霉素浓度对建立丹东蒲公英遗传转化体系影响 | 第35页 |
| 3.6 预培养时间对抗性芽诱导影响 | 第35-36页 |
| 3.7 农杆菌细胞密度和侵染时间影响 | 第36-37页 |
| 3.8 共培养时间对抗性芽诱导影响 | 第37-38页 |
| 3.9 乙酰丁香酮对抗性芽诱导影响 | 第38页 |
| 3.10 丹东蒲公英转化过程 | 第38-39页 |
| 3.11 转基因丹东蒲公英的鉴定和绿原酸含量分析 | 第39-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 丹东蒲公英再生体系建立 | 第43-44页 |
| 4.1.1 基础培养基的筛选 | 第43页 |
| 4.1.2 不定芽直接再生和增殖的筛选 | 第43页 |
| 4.1.3 不定芽生根诱导的筛选 | 第43-44页 |
| 4.2 抗生素和预培养时间对抗性芽诱导的筛选 | 第44-45页 |
| 4.3 菌液浓度和侵染时间及共培养时间的筛选 | 第45页 |
| 4.4 表面活性剂填入方式的筛选 | 第45-46页 |
| 4.5 异源基因在蒲公英次级代谢合成的分析 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 附录 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
