摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第15-20页 |
1.1 蜕皮激素受体和超气门结合蛋白研究进展 | 第15页 |
1.2 昆虫滞育及滞育解除研究进展 | 第15-16页 |
1.3 昆虫滞育相关糖类化合物的研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 糖原 | 第17页 |
1.3.2 海藻糖 | 第17页 |
1.3.3 葡萄糖 | 第17-18页 |
1.4 昆虫己糖激酶及其基因研究进展 | 第18页 |
1.5 本论文研究意义 | 第18-20页 |
第二章 柞蚕蜕皮激素受体和超气门结合蛋白基因的克隆与序列分析 | 第20-32页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-23页 |
2.1.1 材料 | 第20页 |
2.1.2 试剂 | 第20-23页 |
2.2 仪器设备 | 第23页 |
2.3 方法 | 第23-27页 |
2.3.1 柞蚕总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.3.2 柞蚕cDNA的合成 | 第24页 |
2.3.3 柞蚕蜕皮激素受体基因及超气门结合蛋白基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
2.3.4 PCR产物的回收及纯化 | 第25-26页 |
2.3.5 目的基因的连接与转化 | 第26-27页 |
2.3.6 基因序列分析 | 第27页 |
2.3.7 系统进化分析 | 第27页 |
2.4 结果与分析 | 第27-32页 |
2.4.1 柞蚕幼虫总RNA提取的质量分析 | 第27页 |
2.4.2 柞蚕EcR基因和USP基因的克隆与序列特征 | 第27-29页 |
2.4.3 ApEcRB1和ApUSP1的同源序列比对和系统进化 | 第29-32页 |
第三章 蜕皮激素受体和超气门蛋白基因在柞蚕发育及激素诱导过程中的表达模式分析 | 第32-39页 |
3.1 材料与试剂 | 第32页 |
3.1.1 材料 | 第32页 |
3.1.2 试剂 | 第32页 |
3.2 仪器设备 | 第32-33页 |
3.3 方法 | 第33-35页 |
3.3.1 柞蚕cDNA合成 | 第33页 |
3.3.2 柞蚕ApEcRB1和ApUSP1组织表达的半定量PCR分析 | 第33-34页 |
3.3.3 柞蚕发育过程中ApEcRB1和ApUSP1表达的qRT-PCR检测 | 第34-35页 |
3.4 结果与分析 | 第35-39页 |
3.4.1 ApEcRB1和ApUSP1基因的组织表达谱分析 | 第35页 |
3.4.2 qRT-PCR引物特异性分析 | 第35-36页 |
3.4.3 幼虫蜕皮及化蛹过程ApEcRB1和ApUSP1的表达变化 | 第36-37页 |
3.4.4 蜕皮激素诱导滞育蛹羽化过程ApEcRB1和ApUSP1的表达变化 | 第37页 |
3.4.5 蜕皮激素短时间内诱导滞育蛹ApEcRB1和ApUSP1的表达变化 | 第37-39页 |
第四章 柞蚕己糖激酶基因的克隆与序列分析 | 第39-44页 |
4.1 柞蚕己糖激酶基因的PCR扩增 | 第39页 |
4.2 系统进化分析 | 第39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-44页 |
4.3.1 柞蚕己糖激酶基因的克隆与序列分析 | 第39-41页 |
4.3.2 ApHK1和ApHK2的同源序列比对和系统进化分析 | 第41-44页 |
第五章 柞蚕滞育蛹解除滞育及发育过程中己糖激酶基因的表达与酶活性变化规律分析 | 第44-50页 |
5.1 材料与试剂 | 第44页 |
5.1.1 材料 | 第44页 |
5.1.2 试剂与仪器 | 第44页 |
5.2 方法 | 第44-47页 |
5.2.1 柞蚕ApHK1和ApHK2组织表达的半定量PCR分析 | 第44-45页 |
5.2.3 柞蚕发育过程中ApHK1和ApHK2表达的qRT-PCR检测 | 第45页 |
5.2.4 柞蚕蛹解除滞育及发育过程中己糖激酶活性及葡萄糖含量的检测 | 第45-46页 |
5.2.5 己糖激酶提取液蛋白含量测定 | 第46-47页 |
5.3 结果与分析 | 第47-50页 |
5.3.1 ApHK1和ApHK2基因的组织表达谱分析 | 第47页 |
5.3.2 柞蚕滞育蛹解除滞育及发育过程中ApHK1和ApHK2的表达变化 | 第47-48页 |
5.3.3 蛋白质标准曲线的绘制 | 第48页 |
5.3.4 柞蚕蛹解除滞育及发育过程中己糖激酶活性和葡萄糖含量的变化 | 第48-50页 |
第六章 讨论与结论 | 第50-55页 |
6.1 讨论 | 第50-53页 |
6.1.1 蜕皮激素受体和超气门蛋白基因在柞蚕发育及激素诱导过程中的表达模式 | 第50-51页 |
6.1.2 柞蚕滞育蛹解除滞育过程中己糖激酶基因的表达与酶活性变化规律 | 第51-53页 |
6.2 结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第60-61页 |