| 摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| 1.1 WRKY转录因子 | 第9-14页 |
| 1.1.1 转录因子的定义、结构特点及分类 | 第9页 |
| 1.1.2 植物WRKY转录因子的结构与分类 | 第9-10页 |
| 1.1.3 植物WRKY转录因子的功能概述 | 第10-12页 |
| 1.1.4 WRKY转录因子在抗病方面的调控作用 | 第12-14页 |
| 1.1.4.1 植物免疫机制概述 | 第12页 |
| 1.1.4.2 WRKY转录因子在植物抗病功能方面的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2 病毒诱导的基因沉默(VIGS) | 第14-18页 |
| 1.2.1 VIGS的原理和作用机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 VTGS的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3 瞬时表达 | 第18-19页 |
| 1.4 小麦白粉病的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4.1 植物与病原关系 | 第19页 |
| 1.4.2 小麦白粉菌的致病机制 | 第19-20页 |
| 1.4.3 小麦对白粉病的防御策略 | 第20-21页 |
| 1.4.3.1 乳突反应与穿透抗性 | 第20页 |
| 1.4.3.2 过敏反应与小种专化抗性 | 第20-21页 |
| 1.5 实验目的和技术路线 | 第21-22页 |
| 1.5.1 实验目的 | 第21-22页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂、酶 | 第22-23页 |
| 2.1.3 载体、菌株 | 第23页 |
| 2.1.4 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.1.5 培养基和试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 TaWRKY34的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.1.1 小麦WRKY家族的保守序列分析 | 第24页 |
| 2.2.1.2 预测TaWRKY34上的siRNA靶序列 | 第24页 |
| 2.2.2 VIGS分析Ta WRKY34抗白粉病相关功能 | 第24-34页 |
| 2.2.2.1 白粉菌小种E09的繁育 | 第24-25页 |
| 2.2.2.2 BSMV-TaWRKY34的载体构建 | 第25-29页 |
| 2.2.2.3 材料的种植 | 第29页 |
| 2.2.2.4 接种病毒 | 第29-31页 |
| 2.2.2.5 处理材料总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.2.6 TaWRKY34的表达量分析 | 第32-34页 |
| 2.2.2.7 白粉病胁迫后植株的病理表型观察 | 第34页 |
| 2.2.3 瞬时表达法分析TaWRKY34抗白粉病功能 | 第34-37页 |
| 2.2.3.1 白粉菌小种E09的繁育 | 第34页 |
| 2.2.3.2 瞬时表达载体构建 | 第34-35页 |
| 2.2.3.3 基因枪法转化TaWRKY34在小麦叶片中瞬时表达 | 第35-36页 |
| 2.2.3.4 白粉菌接种小麦叶片 | 第36-37页 |
| 2.2.3.5 显微镜下观察叶片与孢子的互作形态 | 第37页 |
| 2.2.3.6 孢子穿透率的统计分析 | 第37页 |
| 3 结果和分析 | 第37-45页 |
| 3.1 TaWRKY34的生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 3.1.1 TaWRKY34的家族的保守序列分析 | 第37-38页 |
| 3.1.2 预测TaWRKY34上的siRNA靶序列 | 第38页 |
| 3.2 VIGS鉴定TaWRKY34抗白粉病功能 | 第38-43页 |
| 3.2.1 白粉病小种E09的繁育 | 第38页 |
| 3.2.2 BSMV-TaWRKY34的载体构建 | 第38页 |
| 3.2.3 材料的种植 | 第38-39页 |
| 3.2.4 接种病毒 | 第39-40页 |
| 3.2.5 处理材料总RNA的提取及反转录 | 第40-41页 |
| 3.2.6 病毒外壳蛋白的检测 | 第41页 |
| 3.2.7 TaWRKY34的表达量分析 | 第41-42页 |
| 3.2.8 白粉病胁迫后植株的病理表型变化 | 第42-43页 |
| 3.3 瞬时表达法分析TaWRKY34抗白粉病功能 | 第43-45页 |
| 3.3.1 白粉菌小种E09的繁育 | 第43页 |
| 3.3.2 瞬时表达载体构建 | 第43-44页 |
| 3.3.3 基因枪法转化TaWRKY34载小麦叶片中瞬时表达 | 第44页 |
| 3.3.4 白粉病侵染小麦叶片 | 第44页 |
| 3.3.5 显微镜下观察叶片与孢子的互作形态 | 第44-45页 |
| 3.3.6 孢子穿透率的统计分析 | 第45页 |
| 4 总结 | 第45-48页 |
| 4.1 讨论 | 第45-47页 |
| 4.1.1 VIGS的应用 | 第45-46页 |
| 4.1.2 瞬时表达体系的应用 | 第46-47页 |
| 4.2 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
