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家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)功能基因组研究--家蚕微孢子虫Serpin蛋白NbSPN13的定位研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
目录第10-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 微孢子虫第12-13页
    1.2 微孢子虫生物学特性与寄生机制第13-15页
        1.2.1 微孢子虫的结构与发芽的关系第13-15页
        1.2.2 微孢子虫的生活史特征第15页
    1.3 家蚕微孢子虫概述第15-17页
    1.4 SERPIN概述第17-22页
        1.4.1 serpin的简介第17-18页
        1.4.2 serpin作用方式的简介第18-22页
第二章 引言第22-26页
    2.1 研究背景第22页
    2.2 研究目的及意义第22-23页
    2.3 研究内容第23页
    2.4 技术路线第23-26页
第三章 家蚕微孢子虫serpin基因NbSPN13的序列与转录情况分析第26-38页
    3.1 材料与方法第26-28页
        3.1.1 实验材料及相关软件第26页
        3.1.2 方法第26-28页
    3.2 结果与分析第28-35页
        3.2.1 家蚕微孢子虫serpin基因研究进展及NbSPN13基因序列的进化分析第28-31页
        3.2.2 家蚕微孢子虫NbSPN13蛋白亚细胞定位预测第31-33页
        3.2.3 NbSPN13基因转录结果第33-35页
    3.3 结论与讨论第35-38页
第四章 NbSPN13基因的原核表达及抗体制备第38-50页
    4.1 材料与方法第38-44页
        4.1.1 菌株及实验动物第38页
        4.1.2 所需试剂及配制方法第38-40页
        4.1.3 大肠杆菌感受态细胞制备第40-41页
        4.1.4 家蚕微孢子虫基因组的提取第41页
        4.1.5 家蚕微孢子虫总蛋白提取第41-42页
        4.1.6 引物设计及⊿NbSPN13基因的PCR扩增第42页
        4.1.7 pGEX-⊿NbSPN13表达载体的构建第42-43页
        4.1.8 pGEX-⊿NbSPN13原核表达及抗体制备第43-44页
    4.2 结果与分析第44-48页
        4.2.1 pGEX-ΔNbSPN13原核表达载体的构建第44-45页
        4.2.2 ⊿NbSPN13的原核表达第45-46页
        4.2.3 ANbSPN13蛋白的纯化及小鼠多克隆抗体制备及检测第46-48页
    4.3 结论与讨论第48-50页
第五章 NbSPN13蛋白在酿酒酵母和家蚕微孢子虫中的定位分析第50-62页
    5.1 材料与方法第50-56页
        5.1.1 所需菌株第50页
        5.1.2 所需仪器第50页
        5.1.3 所需试剂及培养基配制方法第50-52页
        5.1.4 NbSPN13蛋白在酿酒酵母中的定位第52-55页
        5.1.5 NbSPN13蛋白在家蚕微孢子虫的间接免疫荧光定位(IFA)第55-56页
    5.2 结果与分析第56-60页
        5.2.1 pUG35-NbSPN13,pUG35-⊿NbSPN13酵母定位载体的构建第56页
        5.2.2 pUG35-NbSPN13,pUG35-⊿NbSPN13重组酵母基因组检测第56-57页
        5.2.3 pUG35-NbSPN13,pUG35-⊿NbSPN13酵母定位载体转化酵母及荧光观察第57-59页
        5.2.4 NbSPN13蛋白在家蚕微孢子虫中的间接免疫荧光定位(IFA)第59-60页
    5.3 结论与讨论第60-62页
第六章 总结第62-64页
    6.1 NbSPN13基因序列及转录分析结果第62页
    6.2 NbSPN13基因原核表达及小鼠多克隆抗体制备第62页
    6.3 NbSPN13蛋白的定位研究第62-64页
参考文献第64-71页
附录第71-74页
发表的论文和参研的研究课题第74-76页
致谢第76页

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