| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 1.1 肺泡巨噬细胞的过度活化是脓毒症肺损伤发生发展的关键因素 | 第10-11页 |
| 1.2 白藜芦醇有望成为治疗脓毒症肺损伤的新药物 | 第11页 |
| 1.3 白藜芦醇通过机体内源性调控通路 microRNA 来发挥抗炎作用 | 第11-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-14页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第13页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第14页 |
| 2.2 主要实验器材、试剂和溶液的准备 | 第14-16页 |
| 2.2.1 细胞培养用品的处理 | 第14-15页 |
| 2.2.2 去 RNA 酶处理 | 第15页 |
| 2.2.3 Ham’s F-12K 培养基的配制 | 第15页 |
| 2.2.4 LPS 溶液的配制 | 第15-16页 |
| 2.2.5 白藜芦醇药物溶液的配制 | 第16页 |
| 2.2.6 MTT 相关溶液的配制 | 第16页 |
| 2.3 实验方法 | 第16-26页 |
| 2.3.1 NR8383 细胞的培养、传代、冻存和复苏 | 第16-17页 |
| 2.3.2 MTT 比色法检测白藜芦醇对细胞活性的影响 | 第17-18页 |
| 2.3.3 细胞处理及分组 | 第18页 |
| 2.3.4 细胞总 RNA 提取、定量和质量检测 | 第18-19页 |
| 2.3.5 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR 检测 TNF-α mRNA 的表达 | 第19-21页 |
| 2.3.6 TaqMan 实时荧光定量 PCR 检测 miR-146a 的表达 | 第21-23页 |
| 2.3.7 ELISA 检测上清中 TNF-α蛋白的表达 | 第23-25页 |
| 2.3.8 统计学处理 | 第25-26页 |
| 第3章 结果 | 第26-33页 |
| 3.1 MTT 比色法检测白藜芦醇对 NR8383 细胞活性的影响 | 第26-27页 |
| 3.2 各实验组细胞形态学改变 | 第27-28页 |
| 3.3 细胞总 RNA 质量和浓度测定 | 第28页 |
| 3.4 PCR 扩增的特异性 | 第28-30页 |
| 3.5 各实验组 NR8383 细胞 TNF-α mRNA 的表达 | 第30页 |
| 3.6 各实验组 NR8383 细胞 miR-146a 的表达 | 第30-31页 |
| 3.7 大鼠 TNF-α蛋白标准曲线图 | 第31-32页 |
| 3.8 各实验组 NR8383 细胞 TNF-α蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 第4章 讨论 | 第33-36页 |
| 第5章 结论与展望 | 第36-37页 |
| 5.1 结论 | 第36页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第42-43页 |
| 综述 | 第43-48页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
