摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第9-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-30页 |
2.1 细胞株 | 第14页 |
2.2 主要试剂及材料 | 第14-15页 |
2.3 自配试剂 | 第15-17页 |
2.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.5 方法 | 第18-20页 |
2.5.1 细胞培养 | 第18-20页 |
2.6 PCMV-TAG2B-NICD 重组质粒的构建 | 第20-25页 |
2.6.1 NICD 引物的设计 | 第20页 |
2.6.2 pMD18-T-NICD 重组质粒的构建 | 第20-25页 |
2.7 Γ-分泌酶抑制剂 DAPT 的配制 | 第25页 |
2.8 大鼠 H9C2 心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型的建立 | 第25页 |
2.9 实验分组 | 第25-26页 |
2.10 FITC-ANNEXINV/PI 双染流式细胞法检测细胞凋亡 | 第26页 |
2.11 WESTERN BLOT 检测 H9C2 心肌细胞中 NICD 和 ROCK2 蛋白的表达 | 第26-29页 |
2.11.1 提取细胞总蛋白 | 第26-27页 |
2.11.2 蛋白浓度测定 | 第27页 |
2.11.3 SDS-PAGE 电泳 | 第27-28页 |
2.11.4 转膜 | 第28页 |
2.11.5 免疫反应 | 第28页 |
2.11.6 化学发光,显影,定影 | 第28-29页 |
2.11.7 凝胶图象分析 | 第29页 |
2.12 统计学分析 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-42页 |
3.1 PCR 产物 NICD 的扩增 | 第30页 |
3.2 PMD18-T-NICD 和 PCMV-TAG2B-NICD 重组质粒的鉴定 | 第30-38页 |
3.2.1 pMD18-T-NICD 重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
3.2.2 pCMV-Tag2B-NICD 重组质粒的鉴定 | 第31-38页 |
3.3 过表达 NICD 对 H9C2 心肌细胞凋亡的影响 | 第38-39页 |
3.4 DAPT 对 H9C2 心肌细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
3.5 过表达 NICD 对 H9C2 心肌细胞 ROCK2 蛋白的影响 | 第40-41页 |
3.6 DAPT 对 H9C2 心肌细胞 NICD 和 ROCK2 蛋白的影响 | 第41-42页 |
第4章 讨论 | 第42-45页 |
第5章 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
综述1 | 第51-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |
综述2 | 第57-61页 |
参考文献 | 第60-61页 |