摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 文献综述 | 第10-25页 |
1.1 前言 | 第10页 |
1.2 抗体的常用固定方法 | 第10-13页 |
1.2.1 抗体抗原简介 | 第10-11页 |
1.2.2 抗体的非共价固定 | 第11-12页 |
1.2.3 抗体的共价偶联固定 | 第12-13页 |
1.3 抗体的定向固定化方法 | 第13-16页 |
1.3.1 抗体的定向固定化原理简介 | 第13页 |
1.3.2 Fc 受体蛋白在抗体定向固定化中的应用 | 第13-14页 |
1.3.3 寡糖链氧化在抗体定向固定化中的应用 | 第14-15页 |
1.3.4 ZZ 序列在抗体定向固化中的应用 | 第15-16页 |
1.3.5 抗体二硫键在抗体定向固化中的应用 | 第16页 |
1.4 与抗体 Fc 片段有高亲和作用的分子配基 | 第16-18页 |
1.4.1 具有高亲和作用的蛋白配基 | 第17页 |
1.4.2 小分子肽配基 | 第17-18页 |
1.5 免疫测定方法概述 | 第18-21页 |
1.5.1 免疫测定技术原理 | 第18-20页 |
1.5.1.1 均相免疫测定法 | 第18-19页 |
1.5.1.2 异相免疫测定法 | 第19-20页 |
1.5.2 免疫测定中常用的固相材料 | 第20-21页 |
1.6 单分散高分子微球 | 第21-23页 |
1.6.1 悬浮聚合法 | 第21页 |
1.6.2 无皂乳液聚合法 | 第21-22页 |
1.6.3 种子聚合法 | 第22页 |
1.6.4 分散聚合法 | 第22页 |
1.6.5 乳液聚合法 | 第22-23页 |
1.7 课题研究内容及创新点 | 第23-25页 |
第二章 抗体 IgG 在高分子微球表面的定向固定化 | 第25-46页 |
2.1 引言 | 第25-27页 |
2.2 材料与方法 | 第27-35页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第27-28页 |
2.2.2 分散聚合法制备高分子微球 pGMA | 第28-29页 |
2.2.3 高分子微球 pGMA 的表面修饰 | 第29-30页 |
2.2.3.1 高分子微球 pGMA-OH 的制备 | 第29页 |
2.2.3.2 高分子微球 pGMA-ECH 的制备 | 第29页 |
2.2.3.3 高分子微球 pGMA-ECH-HC7 的制备 | 第29页 |
2.2.3.4 高分子微球 pGMA-NH2的制备 | 第29-30页 |
2.2.4 pGMA 微球的表征 | 第30-31页 |
2.2.4.1 粒度分析仪分析 | 第30页 |
2.2.4.2 扫描电子显微镜分析 | 第30页 |
2.2.4.3 红外光谱分析 | 第30页 |
2.2.4.4 反相色谱分析 | 第30-31页 |
2.2.4.5 介质含水量测定 | 第31页 |
2.2.5 抗体 IgG 在高分子微球表面的吸附 | 第31-32页 |
2.2.5.1 IgG 蛋白标准曲线的绘制 | 第31页 |
2.2.5.2 吸附时间考察 | 第31页 |
2.2.5.3 静态吸附实验 | 第31-32页 |
2.2.6 抗体的活性检测 | 第32-35页 |
2.2.6.1 抗体活性检测实验原理 | 第32页 |
2.2.6.2 HRP 标准曲线测定 | 第32-33页 |
2.2.6.3 抗体 anti-HRP 标准曲线测定 | 第33-34页 |
2.2.6.4 不同方法固定抗体后抗体的活性比较 | 第34-35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-45页 |
2.3.1 各种高分子微球的表征 | 第35-41页 |
2.3.1.1 各种高分子微球的粒径分析 | 第35-36页 |
2.3.1.2 各种高分子微球的表面形态 | 第36-37页 |
2.3.1.3 各种高分子微球的红外光谱分析 | 第37-39页 |
2.3.1.4 肽配基 HC-7 的偶联情况 | 第39-40页 |
2.3.1.5 高分子微球的含水量测定 | 第40-41页 |
2.3.2 高分子微球对 IgG 的吸附 | 第41-43页 |
2.3.2.1 介质最佳吸附时间的确定 | 第41-42页 |
2.3.2.2 不同微球对 IgG 的吸附情况 | 第42-43页 |
2.3.3 抗体活性测定 | 第43-45页 |
2.4 小结 | 第45-46页 |
第三章 抗体 IgG 在纳米球表面的定向固定化 | 第46-61页 |
3.1 引言 | 第46-47页 |
3.2 材料与方法 | 第47-53页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第47-48页 |
3.2.2 pGMA 纳米球的合成与表面修饰 | 第48-50页 |
3.2.2.1 乳液聚合法制备 pGMA 纳米球 | 第48-49页 |
3.2.2.2 pGMA-EDMA-NH2纳米球的制备 | 第49页 |
3.2.2.3 pGMA-EDMA-OH 纳米球的制备 | 第49页 |
3.2.2.4 肽配基 HWRGWV 的偶联 | 第49-50页 |
3.2.3 pGMA 纳米球的表征 | 第50-51页 |
3.2.3.1 粒径和ζ电势测量 | 第50页 |
3.2.3.2 介质的粒径稳定性实验 | 第50-51页 |
3.2.3.3 纳米球的离心时间考察 | 第51页 |
3.2.4 纳米球对 IgG 的静态吸附实验 | 第51页 |
3.2.5 ITC 实验 | 第51-53页 |
3.3 结果与讨论 | 第53-59页 |
3.3.1 纳米球的粒径分布和表面ζ电势测定 | 第53-54页 |
3.3.2 纳米球的离心时间确定 | 第54-55页 |
3.3.3 纳米球的粒径稳定性考察 | 第55-57页 |
3.3.4 纳米球对 IgG 的静态吸附 | 第57-58页 |
3.3.5 纳米球与 IgG 分子间的相互作用 | 第58-59页 |
3.4 小结 | 第59-61页 |
第四章 结论与展望 | 第61-63页 |
4.1 结论 | 第61-62页 |
4.2 展望 | 第62-63页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第63-64页 |
附录 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
致谢 | 第71页 |