摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩写词 | 第10-16页 |
第1章 绪论 | 第16-33页 |
1.1 隐花色素的研究概况 | 第16-24页 |
1.1.1 拟南芥隐花色素CRY1简介 | 第16页 |
1.1.2 隐花色素CRY1的结构 | 第16-18页 |
1.1.3 隐花色素CRY1相互作用蛋白的研究 | 第18-20页 |
1.1.3.1 CRY1-SPA1-COP1的相互作用 | 第18-19页 |
1.1.3.2 CRY1与光敏色素(PHYA和PHYB)的相互作用 | 第19页 |
1.1.3.3 CRY1与ZTL/ADO1/LKP1相互作用 | 第19-20页 |
1.1.4 隐花色素CRY1的主要功能 | 第20-23页 |
1.1.4.1 促进植物光形态建成 | 第20-21页 |
1.1.4.2 调节光周期促进开花 | 第21-22页 |
1.1.4.3 调节生物钟节律 | 第22-23页 |
1.1.5 隐花色素CRY1的信号传导机制 | 第23-24页 |
1.2 转录因子TCP的研究概况 | 第24-32页 |
1.2.1 转录因子TCP家族简介 | 第24-25页 |
1.2.2 TCP蛋白的亚细胞定位研究 | 第25页 |
1.2.3 mi R319以TCP家族基因为靶标调控其表达和功能的机制 | 第25-26页 |
1.2.4 转录因子TCP家族生化功能研究简介 | 第26-27页 |
1.2.5 转录因子TCP参与的信号途径 | 第27-32页 |
1.2.5.1 JA信号途径 | 第28-29页 |
1.2.5.2 其他荷尔蒙信号途径 | 第29-31页 |
1.2.5.3 生物钟节律 | 第31-32页 |
1.3 本论文的工作设想 | 第32-33页 |
第2章 植物蓝光受体CRY1与TCP2蛋白的相互作用 | 第33-57页 |
2.1 实验材料与方法 | 第33-41页 |
2.1.1 质粒载体 | 第33-34页 |
2.1.2 材料 | 第34页 |
2.1.3 试剂 | 第34页 |
2.1.4 试验仪器 | 第34页 |
2.1.5 方法 | 第34-41页 |
2.1.5.1 酵母融合 | 第34-35页 |
2.1.5.2 酵母质粒共转 | 第35页 |
2.1.5.3 酵母双杂交营养缺陷型筛选和液体显色法 | 第35-37页 |
2.1.5.4 亚细胞定位之核定位 | 第37-38页 |
2.1.5.5 HEK-293T细胞蛋白表达 | 第38-39页 |
2.1.5.6 双分子荧光法(Bi FC) | 第39页 |
2.1.5.7 pDT1和pDT7双基因载体的构建 | 第39-40页 |
2.1.5.8 pDT7G的构建方法和步骤 | 第40-41页 |
2.1.5.9 免疫共沉淀 | 第41页 |
2.2 结果与分析 | 第41-55页 |
2.2.1 酵母双杂交筛库结果 | 第41-43页 |
2.2.2 TCP2是一个具有多聚化功能的核定位蛋白 | 第43-47页 |
2.2.3 转录因子TCP2与CRY1在酵母细胞中蓝光特异性相互作用 | 第47-48页 |
2.2.4 转录因子TCP2与CRY1在烟草叶片细胞中蓝光特异性相互作用 | 第48-49页 |
2.2.5 双基因载体的构建及其验证 | 第49-54页 |
2.2.5.1 双基因载体(pDTs)的设计与构建 | 第49页 |
2.2.5.2 双基因载体在植物中表达双基因的应用 | 第49-51页 |
2.2.5.3 pDT7的升级版-pDT7G | 第51-53页 |
2.2.5.4 pDTs共表达蛋白在植物细胞内正常发挥功能 | 第53-54页 |
2.2.5.5 双基因载体pDTs在拟南芥中表达双基因效率的分析 | 第54页 |
2.2.6 转录因子TCP2与CRY1在拟南芥细胞中相互作用 | 第54-55页 |
2.3 小结 | 第55-57页 |
第3章 CRY1与TCP2蛋白的相互作用的结构域 | 第57-62页 |
3.1 材料与方法 | 第57-58页 |
3.1.1 载体 | 第57页 |
3.1.2 试验仪器 | 第57页 |
3.1.3 试验材料 | 第57页 |
3.1.4 方法 | 第57-58页 |
3.2 结果与分析 | 第58-61页 |
3.2.1 CRY1蛋白与TCP2各结构域的相互作用 | 第58-59页 |
3.2.2 TCP2蛋白与CRY1蛋白各结构域的相互作用 | 第59-61页 |
3.3 小结 | 第61-62页 |
第4章 TCP2蛋白对植物生长发育方面的影响 | 第62-71页 |
4.1 材料与方法 | 第62页 |
4.1.1 植物材料 | 第62页 |
4.1.2 试验仪器 | 第62页 |
4.1.3 方法 | 第62页 |
4.1.3.1 开花时间的统计 | 第62页 |
4.2 结果与分析 | 第62-69页 |
4.2.1 TCP2蛋白调节下胚轴的伸长 | 第62-67页 |
4.2.2 TCP2影响子叶和叶片的形态和大小 | 第67-68页 |
4.2.3 TCP2控制开花时间 | 第68-69页 |
4.3 小结 | 第69-71页 |
第5章 TCP2蛋白是一个光响应蛋白 | 第71-77页 |
5.1 材料与方法 | 第71-72页 |
5.1.1 试验试剂 | 第71页 |
5.1.2 试验材料 | 第71页 |
5.1.3 方法 | 第71-72页 |
5.1.3.1 植物生长条件 | 第71页 |
5.1.3.2 蛋白免疫印迹 | 第71-72页 |
5.2 结果与分析 | 第72-76页 |
5.2.1 TCP2蛋白光特异性积累 | 第72-73页 |
5.2.2 TCP2蛋白表达水平对不同光的响应变化 | 第73-75页 |
5.2.3 TCP2蛋白表达受多个蓝光受体的调节 | 第75-76页 |
5.3 小结 | 第76-77页 |
第6章 TCP2蛋白参与蓝光信号传导的分子机制 | 第77-87页 |
6.1 材料与方法 | 第77-80页 |
6.1.1 试验材料 | 第77页 |
6.1.2 试验仪器 | 第77页 |
6.1.3 试验试剂 | 第77页 |
6.1.4 方法 | 第77-80页 |
6.1.4.1 定量PCR | 第77-78页 |
6.1.4.2 绑定位点随机选择RBSS | 第78-79页 |
6.1.4.3 ChIP-PCR/ChIP-q PCR | 第79-80页 |
6.2 结果与分析 | 第80-85页 |
6.2.1 TCP2蛋白正调控CRY1下游基因 | 第80-81页 |
6.2.2 TCP2蛋白DNA启动子特异性结合位点 | 第81-83页 |
6.2.3 ChIP-PCR研究分析TCP2对光相关基因DNA序列的绑定 | 第83-85页 |
6.3 小结 | 第85-87页 |
结论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-105页 |
附录A 攻读学位期间所发表和完成的学术论文目录 | 第105-106页 |
附录B 附表和附图 | 第106-111页 |
致谢 | 第111页 |