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拟南芥转录因子TCP2与CRY1相互作用的遗传学与生化分析

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
英文缩写词第10-16页
第1章 绪论第16-33页
    1.1 隐花色素的研究概况第16-24页
        1.1.1 拟南芥隐花色素CRY1简介第16页
        1.1.2 隐花色素CRY1的结构第16-18页
        1.1.3 隐花色素CRY1相互作用蛋白的研究第18-20页
            1.1.3.1 CRY1-SPA1-COP1的相互作用第18-19页
            1.1.3.2 CRY1与光敏色素(PHYA和PHYB)的相互作用第19页
            1.1.3.3 CRY1与ZTL/ADO1/LKP1相互作用第19-20页
        1.1.4 隐花色素CRY1的主要功能第20-23页
            1.1.4.1 促进植物光形态建成第20-21页
            1.1.4.2 调节光周期促进开花第21-22页
            1.1.4.3 调节生物钟节律第22-23页
        1.1.5 隐花色素CRY1的信号传导机制第23-24页
    1.2 转录因子TCP的研究概况第24-32页
        1.2.1 转录因子TCP家族简介第24-25页
        1.2.2 TCP蛋白的亚细胞定位研究第25页
        1.2.3 mi R319以TCP家族基因为靶标调控其表达和功能的机制第25-26页
        1.2.4 转录因子TCP家族生化功能研究简介第26-27页
        1.2.5 转录因子TCP参与的信号途径第27-32页
            1.2.5.1 JA信号途径第28-29页
            1.2.5.2 其他荷尔蒙信号途径第29-31页
            1.2.5.3 生物钟节律第31-32页
    1.3 本论文的工作设想第32-33页
第2章 植物蓝光受体CRY1与TCP2蛋白的相互作用第33-57页
    2.1 实验材料与方法第33-41页
        2.1.1 质粒载体第33-34页
        2.1.2 材料第34页
        2.1.3 试剂第34页
        2.1.4 试验仪器第34页
        2.1.5 方法第34-41页
            2.1.5.1 酵母融合第34-35页
            2.1.5.2 酵母质粒共转第35页
            2.1.5.3 酵母双杂交营养缺陷型筛选和液体显色法第35-37页
            2.1.5.4 亚细胞定位之核定位第37-38页
            2.1.5.5 HEK-293T细胞蛋白表达第38-39页
            2.1.5.6 双分子荧光法(Bi FC)第39页
            2.1.5.7 pDT1和pDT7双基因载体的构建第39-40页
            2.1.5.8 pDT7G的构建方法和步骤第40-41页
            2.1.5.9 免疫共沉淀第41页
    2.2 结果与分析第41-55页
        2.2.1 酵母双杂交筛库结果第41-43页
        2.2.2 TCP2是一个具有多聚化功能的核定位蛋白第43-47页
        2.2.3 转录因子TCP2与CRY1在酵母细胞中蓝光特异性相互作用第47-48页
        2.2.4 转录因子TCP2与CRY1在烟草叶片细胞中蓝光特异性相互作用第48-49页
        2.2.5 双基因载体的构建及其验证第49-54页
            2.2.5.1 双基因载体(pDTs)的设计与构建第49页
            2.2.5.2 双基因载体在植物中表达双基因的应用第49-51页
            2.2.5.3 pDT7的升级版-pDT7G第51-53页
            2.2.5.4 pDTs共表达蛋白在植物细胞内正常发挥功能第53-54页
            2.2.5.5 双基因载体pDTs在拟南芥中表达双基因效率的分析第54页
        2.2.6 转录因子TCP2与CRY1在拟南芥细胞中相互作用第54-55页
    2.3 小结第55-57页
第3章 CRY1与TCP2蛋白的相互作用的结构域第57-62页
    3.1 材料与方法第57-58页
        3.1.1 载体第57页
        3.1.2 试验仪器第57页
        3.1.3 试验材料第57页
        3.1.4 方法第57-58页
    3.2 结果与分析第58-61页
        3.2.1 CRY1蛋白与TCP2各结构域的相互作用第58-59页
        3.2.2 TCP2蛋白与CRY1蛋白各结构域的相互作用第59-61页
    3.3 小结第61-62页
第4章 TCP2蛋白对植物生长发育方面的影响第62-71页
    4.1 材料与方法第62页
        4.1.1 植物材料第62页
        4.1.2 试验仪器第62页
        4.1.3 方法第62页
            4.1.3.1 开花时间的统计第62页
    4.2 结果与分析第62-69页
        4.2.1 TCP2蛋白调节下胚轴的伸长第62-67页
        4.2.2 TCP2影响子叶和叶片的形态和大小第67-68页
        4.2.3 TCP2控制开花时间第68-69页
    4.3 小结第69-71页
第5章 TCP2蛋白是一个光响应蛋白第71-77页
    5.1 材料与方法第71-72页
        5.1.1 试验试剂第71页
        5.1.2 试验材料第71页
        5.1.3 方法第71-72页
            5.1.3.1 植物生长条件第71页
            5.1.3.2 蛋白免疫印迹第71-72页
    5.2 结果与分析第72-76页
        5.2.1 TCP2蛋白光特异性积累第72-73页
        5.2.2 TCP2蛋白表达水平对不同光的响应变化第73-75页
        5.2.3 TCP2蛋白表达受多个蓝光受体的调节第75-76页
    5.3 小结第76-77页
第6章 TCP2蛋白参与蓝光信号传导的分子机制第77-87页
    6.1 材料与方法第77-80页
        6.1.1 试验材料第77页
        6.1.2 试验仪器第77页
        6.1.3 试验试剂第77页
        6.1.4 方法第77-80页
            6.1.4.1 定量PCR第77-78页
            6.1.4.2 绑定位点随机选择RBSS第78-79页
            6.1.4.3 ChIP-PCR/ChIP-q PCR第79-80页
    6.2 结果与分析第80-85页
        6.2.1 TCP2蛋白正调控CRY1下游基因第80-81页
        6.2.2 TCP2蛋白DNA启动子特异性结合位点第81-83页
        6.2.3 ChIP-PCR研究分析TCP2对光相关基因DNA序列的绑定第83-85页
    6.3 小结第85-87页
结论第87-89页
参考文献第89-105页
附录A 攻读学位期间所发表和完成的学术论文目录第105-106页
附录B 附表和附图第106-111页
致谢第111页

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