摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-21页 |
1.1 磷与缺磷 | 第13-14页 |
1.1.1 磷素的重要生理功能 | 第13页 |
1.1.2 缺磷现象的广泛分布 | 第13页 |
1.1.3 植物应对缺磷的策略 | 第13-14页 |
1.1.4 磷素的吸收与转运 | 第14页 |
1.2 ACC与缺磷 | 第14-19页 |
1.2.1 ACS和ACC | 第14-17页 |
1.2.2 ACC响应植物缺磷 | 第17-19页 |
1.3 磷转运相关基因 | 第19-20页 |
1.3.1 PHT家族 | 第19-20页 |
1.3.2 PHO1 | 第20页 |
1.4 立题依据 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 AVG与ACC处理 | 第21页 |
2.1.3 质粒载体与菌株 | 第21页 |
2.2 实验试剂 | 第21-23页 |
2.2.1 培养基 | 第21-22页 |
2.2.2 常用溶液 | 第22页 |
2.2.3 磷含量测定所需药品 | 第22页 |
2.2.4 工具酶 | 第22页 |
2.2.5 β-葡糖苷酸酶(GUS)染液 | 第22-23页 |
2.2.6 ACC提取所需药品 | 第23页 |
2.2.7 石蜡切片制作所需物品 | 第23页 |
2.3 实验引物 | 第23-25页 |
2.3.1 纯合体鉴定引物 | 第23页 |
2.3.2 RT-PCR鉴定基因表达引物 | 第23-24页 |
2.3.3 QRT-PCR鉴定基因表达引物 | 第24-25页 |
2.3.4 载体构建引物 | 第25页 |
2.4 实验方法 | 第25-33页 |
2.4.1 拟南芥种植 | 第25页 |
2.4.2 T-DNA插入纯合体鉴定 | 第25-26页 |
2.4.3 拟南芥基因组DNA提取 | 第26页 |
2.4.4 Trizol法拟南芥总RNA提取及cDNA的制备 | 第26-27页 |
2.4.5 E.coli感受态细胞制备与转化 | 第27-28页 |
2.4.6 农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第28-29页 |
2.4.7 重组质粒构建与鉴定 | 第29页 |
2.4.8 拟南芥全磷含量测定 | 第29-30页 |
2.4.9 拟南芥ACC提取与测定 | 第30-31页 |
2.4.10 石蜡切片制做方法 | 第31页 |
2.4.11 组织化学GUS染色 | 第31-32页 |
2.4.12 荧光分析法测定植物体内GUS酶活性 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-51页 |
3.1 ACC影响植物体内磷分布 | 第33-44页 |
3.1.1 ACS表达量改变的拟南芥株系中的磷分布 | 第33-38页 |
3.1.2 外源ACC改变拟南芥磷分布 | 第38-39页 |
3.1.3 其它ACSes在低磷条件下的表达分析 | 第39-44页 |
3.2 ACC影响磷转运子及磷分布 | 第44-51页 |
3.2.1 ACC对磷吸收的影响 | 第44-48页 |
3.2.2 ACC对磷转移的影响 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
4.1 ACSes在缺磷条件下的冗余性和组织特异性 | 第51页 |
4.2 磷转运体PHT3;2 对ACC浓度依赖性 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |