摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩写词 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidases)的研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 动物的GPXs的研究 | 第12-13页 |
1.1.2 拟南芥的GPXs的研究 | 第13页 |
1.2 活性氧的产生及清除 | 第13-16页 |
1.2.1 活性氧的产生 | 第13-14页 |
1.2.2 活性氧能改变植物的氧化还原状态 | 第14-15页 |
1.2.3 植物体内清除活性氧的系统 | 第15-16页 |
1.3 铁在植物中的作用 | 第16-17页 |
1.3.1 铁参与叶绿素的合成 | 第16页 |
1.3.2 缺铁胁迫下植物的适应性反应 | 第16-17页 |
1.4 铁参与光氧化还原状态的改变 | 第17-19页 |
1.5 立题依据 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 质粒载体和菌株 | 第20页 |
2.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.3 实验常用的溶液 | 第21-23页 |
2.4 培养基 | 第23页 |
2.5 抗生素 | 第23页 |
2.6 实验所用的引物 | 第23-26页 |
2.6.1 构建载体所用的引物 | 第23-25页 |
2.6.2 qRT-PCR鉴定基因表达所用引物 | 第25-26页 |
2.7 实验方法 | 第26-38页 |
2.7.1 拟南芥的种植方法 | 第26-27页 |
2.7.2 拟南芥基因组总的RNA提取 | 第27页 |
2.7.3 反转录制备拟南芥cDNA | 第27页 |
2.7.4 PCR扩增 | 第27-28页 |
2.7.5 回收目的DNA片段 | 第28页 |
2.7.6 目的DNA的纯化 | 第28-29页 |
2.7.7 大肠杆菌的感受态制备和转化 | 第29-30页 |
2.7.8 大肠杆菌的转化 | 第30页 |
2.7.9 质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
2.7.10 重组质粒的鉴定 | 第31页 |
2.7.11 拟南芥的农杆菌转化 | 第31-32页 |
2.7.12 实时定量PCR检测基因表达 | 第32页 |
2.7.13 NBT染色 | 第32页 |
2.7.14 DAB染色 | 第32-33页 |
2.7.15 GUS染色 | 第33页 |
2.7.16 酵母转化方法 | 第33-34页 |
2.7.17 酵母筛库 | 第34-35页 |
2.7.18 蛋白的小量诱导 | 第35页 |
2.7.19 带GST标签的蛋白质的纯化 | 第35-36页 |
2.7.20 蛋白的浓缩 | 第36页 |
2.7.21 Western blot | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-48页 |
3.1 强光下活性氧的变化及相关基因的表达 | 第38-40页 |
3.1.1 GPX7调节强光下活性氧的产生 | 第38-39页 |
3.1.2 GPX7功能缺失导致强光下相关基因的表达发生变化 | 第39-40页 |
3.2 铁胁迫下的GPX7的功能 | 第40-44页 |
3.2.1 缺铁下gpx7的表型分析 | 第40页 |
3.2.2 缺铁下gpx7的叶绿素荧光分析 | 第40-41页 |
3.2.3 缺铁下GPX7的表达分析 | 第41-42页 |
3.2.4 缺铁与调节gpx7突变体的活性氧产生 | 第42-43页 |
3.2.5 缺铁对铁偶联相关基因表达的影响 | 第43-44页 |
3.3 GPX7下游调控因子的分析 | 第44-46页 |
3.3.1 GPX7及相关基因酵母载体的构建 | 第44-45页 |
3.3.2 寻找与GPX7相互作用的蛋白 | 第45-46页 |
3.4 GPX7调节的氧化还原的分析 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
4.1 GPX7调控的光氧化还原过程 | 第48-49页 |
4.2 铁参与光氧化还原过程的调节 | 第49-50页 |
4.3 GPX7下游调控因子 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60页 |