| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 副溶血性弧菌简介 | 第11页 |
| 1.2 副溶血性弧菌检测方法 | 第11-21页 |
| 1.2.1 培养法 | 第12页 |
| 1.2.2 免疫学法 | 第12-13页 |
| 1.2.3 核酸杂交法 | 第13页 |
| 1.2.4 聚合酶链式反应 | 第13-15页 |
| 1.2.5 等温核酸扩增反应 | 第15-21页 |
| 1.2.5.1 环介导等温扩增反应 | 第15-17页 |
| 1.2.5.2 依赖于解旋酶的等温扩增技术 | 第17-18页 |
| 1.2.5.3 交叉引物等温扩增技术 | 第18-19页 |
| 1.2.5.4 切刻内切酶介导的等温指数扩增反应 | 第19-21页 |
| 1.3 本论文的研究意义与主要内容 | 第21-23页 |
| 第二章 等温核酸扩增反应对副溶血性弧菌检测的研究 | 第23-55页 |
| 2.1 引言 | 第23-24页 |
| 2.2 实验部分 | 第24-31页 |
| 2.2.1 仪器与试剂 | 第24-27页 |
| 2.2.2 副溶血性弧菌培养基的配制及增菌培养 | 第27-28页 |
| 2.2.3 副溶血性弧菌基因组DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第28-30页 |
| 2.2.4.1 琼脂糖凝胶电泳的原理 | 第28-29页 |
| 2.2.4.2 琼脂糖凝胶电泳的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.5 实时荧光检测体系 | 第30-31页 |
| 2.2.5.1 链置换指数扩增反应体系 | 第30页 |
| 2.2.5.2 环介导等温扩增反应体系 | 第30页 |
| 2.2.5.3 变性泡介导的链交换扩增反应体系 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-54页 |
| 2.3.1 副溶血性弧菌基因组DNA电泳结果 | 第31-32页 |
| 2.3.2 SDA反应对副溶血性弧菌检测的研究 | 第32-36页 |
| 2.3.2.1 SDA反应实验原理 | 第32-33页 |
| 2.3.2.2 SDA反应可行性验证 | 第33页 |
| 2.3.2.3 SDA反应优化 | 第33-36页 |
| 2.3.3 LAMP反应对副溶血性弧菌检测的研究 | 第36-50页 |
| 2.3.3.1 LAMP反应原理 | 第36-37页 |
| 2.3.3.2 LAMP反应不同预处理条件的影响 | 第37页 |
| 2.3.3.3 无甜菜碱的LAMP反应可行性验证 | 第37-38页 |
| 2.3.3.4 甜菜碱对LAMP反应的影响 | 第38-42页 |
| 2.3.3.5 LAMP反应直接检测能力验证 | 第42-43页 |
| 2.3.3.6 无甜菜碱LAMP反应特异性和抗干扰能力验证 | 第43-45页 |
| 2.3.3.7 甜菜碱对双链DNA Tm值的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.3.8 甜菜碱阻碍LAMP反应因素的验证 | 第46-49页 |
| 2.3.3.9 甜菜碱对CPA反应的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.4 SEA反应对副溶血性弧菌检测的研究 | 第50-54页 |
| 2.3.4.1 SEA反应原理 | 第50-51页 |
| 2.3.4.2 SEA反应检测副溶血性弧菌基因组DNA可行性验证 | 第51-52页 |
| 2.3.4.3 SEA反应检测副溶血性弧菌基因组DNA线性结果 | 第52-53页 |
| 2.3.4.4 SEA反应对副溶血性弧菌特异性及抗干扰能力验证 | 第53-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 基于链交换反应对常用添加剂的研究 | 第55-71页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 实验部分 | 第55-56页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第55-56页 |
| 3.2.2 链交换反应体系 | 第56页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第56-70页 |
| 3.3.1 DNA杂交反应和DNA链交换反应原理 | 第56-57页 |
| 3.3.2 常用添加剂对DNA链交换反应的影响 | 第57-68页 |
| 3.3.2.1 普鲁兰多糖对DNA链交换反应的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.2.2 甜菜碱对DNA链交换反应的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.2.3 D-海藻糖对DNA链交换反应的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.2.4 二硫苏糖醇对DNA链交换反应的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.2.5 CTAB对DNA链交换反应影响 | 第61-62页 |
| 3.3.2.6 聚乙二醇对DNA链交换反应影响 | 第62-66页 |
| 3.3.2.7 乙二醇对DNA链交换反应影响 | 第66-67页 |
| 3.3.2.8 二甲基亚砜对DNA链交换反应影响 | 第67-68页 |
| 3.3.2.9 甲酰胺对DNA链交换反应 | 第68页 |
| 3.3.3 PEG 200 促进DNA链交换反应机理的探讨 | 第68-70页 |
| 3.4 小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录:论文中使用的缩略词 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第80-81页 |
