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SAP、CRP对选凝素功能的抑制

中文摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
符号说明第11-13页
第一章 选凝素综述第13-26页
    第1节 选凝素与 PSGL-1 的结构简述第13-17页
        1、选凝素的结构简述第13-15页
        2、P SGL-1 的结构简述第15-17页
    第2节 选凝素的功能简述第17-26页
        1、选凝素在炎症过程中的作用第17-20页
        2、P-选凝素介导了血小板的粘附与血栓的形成第20-21页
        3、P-选凝素介导了癌细胞的转移第21-22页
        4、P-选凝素的的细胞调控第22-24页
        5、L-选凝素参与淋巴细胞的归巢第24-26页
第二章 SAP 与 CRP 的综述第26-39页
    第1节 SAP 与 CRP 的结构简述第26-29页
        1、SAP 的结构简述第26-28页
        2、CRP 的结构简述第28-29页
    第2节 SAP 与 CRP 的表达调控及功能第29-39页
        1、SAP 与 CRP 的表达调控第29-30页
        2、SAP与CRP结合的配基第30-35页
        3、SAP的功能简述第35-37页
        4、CRP的功能简述第37-39页
第三章 实验材料和方法第39-60页
    第1节 实验试剂、细胞、小鼠、蛋白以及抗体的准备第39-47页
        1、实验试剂第39-40页
        2、细胞与实验动物第40-41页
        3、细胞培养第41页
        4、血小板的分离和纯化第41-42页
        5、鼠白细胞的分离第42页
        6、鼠SAP的纯化第42-43页
        7、抗体的制备第43-44页
        8、重组蛋白的制备第44-46页
        9、鼠补体19(mouse C19)蛋白的纯化方法第46页
        10、SAP 转基因小鼠的构建第46-47页
    第2节 体外实验第47-57页
        1、P -选凝素亲和纯合血小板配基及其质谱分析第47-48页
        2、免疫印迹检测与免疫沉淀分析第48-52页
        3、用表面等离子共振技术测量 SAP 与 P-选凝素的动力学指数第52页
        4、流式细胞仪实验第52-54页
        5、血小板的聚集实验第54页
        6、鼠血小板中有没有mSAP 的mRNA第54-55页
        7、mSAP 的定量方法(蛋白水平与mRNA 水平)第55页
        8、荧光定量 PCR第55-56页
        9、OVA诱导的小鼠哮喘模型中细胞因子与鼠IgE的mRNA水平以及蛋白水平的定量第56-57页
    第3节 小鼠体内实验第57-59页
        1、体内显微实验第57页
        2、小鼠急性腹膜炎模型第57-58页
        3、急性胸膜炎模型第58页
        4、OVA 诱导的小鼠哮喘模型第58-59页
        5、小鼠动脉再狭窄模型(Arterial injury model)第59页
    第4节 本课题实验说明与数据统计方法第59-60页
第四章 血小板上 SAP 的来源第60-66页
    1、人血小板上的28KD 蛋白是 SAP第60-61页
    2、血小板表面的SAP来源于肝脏第61-66页
第五章 P-选凝素与 SAP 的特异性结合第66-79页
    1、天然蛋白的纯化以及重组蛋白的表达和鉴定第66-68页
    2、人SAP 与人 P-选凝素的特异性结合第68-73页
    3、S AP 与 P-选凝素结合的动力学常数第73-74页
    4、S AP 跟 E-选凝素和 L-选凝素的特异性结合第74-76页
    5、S AP 可以抑制 P-Rg、E-Rg 和 L-Rg 结合到 HL-60 上第76-79页
第六章 SAP 在体内的作用第79-103页
    第1节 鼠 SAP 的鉴定第79-81页
        1、鼠SAP 可以跟鼠 P-选凝素特异性结合第79-80页
        2、鼠SAP 可以抑制鼠P-Rg 结合到鼠白细胞上第80-81页
    第2节 纯化的鼠 SAP 对炎症中选凝素功能的抑制第81-90页
        1、mSAP 在体内对 P-选凝素功能的抑制第81-83页
        2、鼠SAP 在体内可以抑制鼠 E-选凝素的功能第83-88页
        3、鼠SAP 抑制 L-选凝素在炎症中作用第88-90页
    第3节 内源鼠 SAP 对选凝素功能的抑制第90-96页
        1、SAP 高表达对体内选凝素功能的抑制第90-93页
        2、鼠SAP 的缺失或功能的丧失会加剧 P-选凝素介导的急性腹膜炎第93-96页
    第4节 SAP 体内功能相关第96-103页
        1、鼠SAP抑制炎症并非通过抑制经典补体途径第96-97页
        2、急性腹膜炎中鼠 SAP 的表达水平并没有提高第97-98页
        3、SAP 抑制 L-选凝素介导的淋巴细胞归巢第98-100页
        4、SAP 在体内可能存在的反调控第100-103页
第七章 CRP 与选凝素相互作用以及功能的初步研究第103-108页
    1、CRP 与选凝素的特异性相互作用第103-105页
    2、CRP 可以在体外抑制人或者鼠 P-选凝素的功能第105-106页
    3、CRP 可以抑制小鼠急性腹膜炎第106-108页
第八章 SAP 对血小板功能影响的初步研究第108-114页
    1、SAP 可能是 P-选凝素在血小板上的配基第108-109页
    2、SAP 和3G12 可以抑制血小板的聚集第109-111页
    3、SAP 可以抑制小鼠动脉再狭窄第111-114页
第九章 其他工作第114-127页
    第1节 P-选凝素钙离子结合位点在与PSGL-1 相互作用过程中的重要性第114-118页
        1、重组蛋白的构建及鉴定第114-116页
        2、重组天然P-选凝素与P-选凝素突变体1、2 可以与PSGL-1-Rg 结合第116-117页
        3、重组P-选凝素突变体3 不能与PSGL-1-Rg 结合第117-118页
    第2节 重组活性小鼠组织因子及其阻断性单抗的制备与应用第118-127页
        1、重组活性小鼠组织因子的构建与表达第119-120页
        2、重组小鼠组织因子体外体内活性的鉴定第120-122页
        3、小鼠组织因子单抗的制备及其亲和力鉴定第122-123页
        4、小鼠组织因子阻断性单抗的筛选及其活性鉴定第123-124页
        5、小鼠组织因子阻断性单抗可以有效抑制小鼠深静脉血栓形成第124-127页
第十章 总结和展望第127-134页
    1、本研究的总结以及创新点第127-129页
    2、本课题的创新之处第129-131页
    3、本课题的未来展望第131-134页
参考文献第134-142页
致谢第142-143页
发表和拟发表的文章第143页

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