中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第一章 选凝素综述 | 第13-26页 |
第1节 选凝素与 PSGL-1 的结构简述 | 第13-17页 |
1、选凝素的结构简述 | 第13-15页 |
2、P SGL-1 的结构简述 | 第15-17页 |
第2节 选凝素的功能简述 | 第17-26页 |
1、选凝素在炎症过程中的作用 | 第17-20页 |
2、P-选凝素介导了血小板的粘附与血栓的形成 | 第20-21页 |
3、P-选凝素介导了癌细胞的转移 | 第21-22页 |
4、P-选凝素的的细胞调控 | 第22-24页 |
5、L-选凝素参与淋巴细胞的归巢 | 第24-26页 |
第二章 SAP 与 CRP 的综述 | 第26-39页 |
第1节 SAP 与 CRP 的结构简述 | 第26-29页 |
1、SAP 的结构简述 | 第26-28页 |
2、CRP 的结构简述 | 第28-29页 |
第2节 SAP 与 CRP 的表达调控及功能 | 第29-39页 |
1、SAP 与 CRP 的表达调控 | 第29-30页 |
2、SAP与CRP结合的配基 | 第30-35页 |
3、SAP的功能简述 | 第35-37页 |
4、CRP的功能简述 | 第37-39页 |
第三章 实验材料和方法 | 第39-60页 |
第1节 实验试剂、细胞、小鼠、蛋白以及抗体的准备 | 第39-47页 |
1、实验试剂 | 第39-40页 |
2、细胞与实验动物 | 第40-41页 |
3、细胞培养 | 第41页 |
4、血小板的分离和纯化 | 第41-42页 |
5、鼠白细胞的分离 | 第42页 |
6、鼠SAP的纯化 | 第42-43页 |
7、抗体的制备 | 第43-44页 |
8、重组蛋白的制备 | 第44-46页 |
9、鼠补体19(mouse C19)蛋白的纯化方法 | 第46页 |
10、SAP 转基因小鼠的构建 | 第46-47页 |
第2节 体外实验 | 第47-57页 |
1、P -选凝素亲和纯合血小板配基及其质谱分析 | 第47-48页 |
2、免疫印迹检测与免疫沉淀分析 | 第48-52页 |
3、用表面等离子共振技术测量 SAP 与 P-选凝素的动力学指数 | 第52页 |
4、流式细胞仪实验 | 第52-54页 |
5、血小板的聚集实验 | 第54页 |
6、鼠血小板中有没有mSAP 的mRNA | 第54-55页 |
7、mSAP 的定量方法(蛋白水平与mRNA 水平) | 第55页 |
8、荧光定量 PCR | 第55-56页 |
9、OVA诱导的小鼠哮喘模型中细胞因子与鼠IgE的mRNA水平以及蛋白水平的定量 | 第56-57页 |
第3节 小鼠体内实验 | 第57-59页 |
1、体内显微实验 | 第57页 |
2、小鼠急性腹膜炎模型 | 第57-58页 |
3、急性胸膜炎模型 | 第58页 |
4、OVA 诱导的小鼠哮喘模型 | 第58-59页 |
5、小鼠动脉再狭窄模型(Arterial injury model) | 第59页 |
第4节 本课题实验说明与数据统计方法 | 第59-60页 |
第四章 血小板上 SAP 的来源 | 第60-66页 |
1、人血小板上的28KD 蛋白是 SAP | 第60-61页 |
2、血小板表面的SAP来源于肝脏 | 第61-66页 |
第五章 P-选凝素与 SAP 的特异性结合 | 第66-79页 |
1、天然蛋白的纯化以及重组蛋白的表达和鉴定 | 第66-68页 |
2、人SAP 与人 P-选凝素的特异性结合 | 第68-73页 |
3、S AP 与 P-选凝素结合的动力学常数 | 第73-74页 |
4、S AP 跟 E-选凝素和 L-选凝素的特异性结合 | 第74-76页 |
5、S AP 可以抑制 P-Rg、E-Rg 和 L-Rg 结合到 HL-60 上 | 第76-79页 |
第六章 SAP 在体内的作用 | 第79-103页 |
第1节 鼠 SAP 的鉴定 | 第79-81页 |
1、鼠SAP 可以跟鼠 P-选凝素特异性结合 | 第79-80页 |
2、鼠SAP 可以抑制鼠P-Rg 结合到鼠白细胞上 | 第80-81页 |
第2节 纯化的鼠 SAP 对炎症中选凝素功能的抑制 | 第81-90页 |
1、mSAP 在体内对 P-选凝素功能的抑制 | 第81-83页 |
2、鼠SAP 在体内可以抑制鼠 E-选凝素的功能 | 第83-88页 |
3、鼠SAP 抑制 L-选凝素在炎症中作用 | 第88-90页 |
第3节 内源鼠 SAP 对选凝素功能的抑制 | 第90-96页 |
1、SAP 高表达对体内选凝素功能的抑制 | 第90-93页 |
2、鼠SAP 的缺失或功能的丧失会加剧 P-选凝素介导的急性腹膜炎 | 第93-96页 |
第4节 SAP 体内功能相关 | 第96-103页 |
1、鼠SAP抑制炎症并非通过抑制经典补体途径 | 第96-97页 |
2、急性腹膜炎中鼠 SAP 的表达水平并没有提高 | 第97-98页 |
3、SAP 抑制 L-选凝素介导的淋巴细胞归巢 | 第98-100页 |
4、SAP 在体内可能存在的反调控 | 第100-103页 |
第七章 CRP 与选凝素相互作用以及功能的初步研究 | 第103-108页 |
1、CRP 与选凝素的特异性相互作用 | 第103-105页 |
2、CRP 可以在体外抑制人或者鼠 P-选凝素的功能 | 第105-106页 |
3、CRP 可以抑制小鼠急性腹膜炎 | 第106-108页 |
第八章 SAP 对血小板功能影响的初步研究 | 第108-114页 |
1、SAP 可能是 P-选凝素在血小板上的配基 | 第108-109页 |
2、SAP 和3G12 可以抑制血小板的聚集 | 第109-111页 |
3、SAP 可以抑制小鼠动脉再狭窄 | 第111-114页 |
第九章 其他工作 | 第114-127页 |
第1节 P-选凝素钙离子结合位点在与PSGL-1 相互作用过程中的重要性 | 第114-118页 |
1、重组蛋白的构建及鉴定 | 第114-116页 |
2、重组天然P-选凝素与P-选凝素突变体1、2 可以与PSGL-1-Rg 结合 | 第116-117页 |
3、重组P-选凝素突变体3 不能与PSGL-1-Rg 结合 | 第117-118页 |
第2节 重组活性小鼠组织因子及其阻断性单抗的制备与应用 | 第118-127页 |
1、重组活性小鼠组织因子的构建与表达 | 第119-120页 |
2、重组小鼠组织因子体外体内活性的鉴定 | 第120-122页 |
3、小鼠组织因子单抗的制备及其亲和力鉴定 | 第122-123页 |
4、小鼠组织因子阻断性单抗的筛选及其活性鉴定 | 第123-124页 |
5、小鼠组织因子阻断性单抗可以有效抑制小鼠深静脉血栓形成 | 第124-127页 |
第十章 总结和展望 | 第127-134页 |
1、本研究的总结以及创新点 | 第127-129页 |
2、本课题的创新之处 | 第129-131页 |
3、本课题的未来展望 | 第131-134页 |
参考文献 | 第134-142页 |
致谢 | 第142-143页 |
发表和拟发表的文章 | 第143页 |