| 摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 符号与缩略语 | 第20-21页 |
| 文献综述 | 第21-61页 |
| 第一节 农药残留污染现状及其生物修复 | 第21-39页 |
| 一 农药的发展历史和生产使用情况 | 第21-23页 |
| 1.农药的发展历史 | 第21-22页 |
| 2.国内外农药的生产、使用情况 | 第22-23页 |
| 二 农药残留的污染现状及危害 | 第23-25页 |
| 1.农药的残留现状 | 第23-24页 |
| 2.农药的毒害作用 | 第24-25页 |
| 三 农药残留的微生物降解 | 第25-28页 |
| 1.农药在环境中的微生物降解机制 | 第25-27页 |
| 2.农药残留的微生物降解现状 | 第27-28页 |
| 四 农药残留的生物修复现状 | 第28-31页 |
| 1.原位(In situ)生物修复技术 | 第29-30页 |
| 2.异位生物修复技术 | 第30-31页 |
| 五 多菌灵残留及其微生物降解情况 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-39页 |
| 第二节 微生物分类方法研究概述 | 第39-53页 |
| 一 传统分类法 | 第39-40页 |
| 二 化学分类法 | 第40-44页 |
| 2.1 细胞壁组成 | 第41-42页 |
| 2.2 脂肪酸组成分析 | 第42-43页 |
| 2.3 醌组分分析 | 第43页 |
| 2.4 全细胞蛋白及核糖体蛋白电泳分析 | 第43-44页 |
| 三 遗传特征分类法 | 第44-46页 |
| 3.1 细菌G+Cmol%的测定 | 第44-45页 |
| 3.2 DNA-DNA杂交 | 第45页 |
| 3.3 RNA同源性分析 | 第45-46页 |
| 四 红球菌属分类进展 | 第46-49页 |
| 4.1 红球菌属分类历史 | 第47-48页 |
| 4.2 红球菌属鉴别特征 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 第三节 农药污染对土壤生态功能的影响 | 第53-61页 |
| 一 化学农药对土壤微生物生物量的影响 | 第53页 |
| 二 农药污染对土壤生态功能的影响 | 第53-58页 |
| 1.农药污染对土壤呼吸作用的影响 | 第54页 |
| 2.化学农药对土壤物质循环的影响 | 第54-56页 |
| 2.1 氨化作用 | 第54-55页 |
| 2.2 硝化作用 | 第55页 |
| 2.3 反硝化作用 | 第55页 |
| 2.4 固氮作用 | 第55-56页 |
| 3.农药污染对土壤酶活性的影响 | 第56-58页 |
| 3.1 对过氧化氢酶活性的影响 | 第56-57页 |
| 3.2 对脱氢酶活性的影响 | 第57页 |
| 3.3 对蔗糖酶活性的影响 | 第57-58页 |
| 3.4 对脲酶活性的影响 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 实验部分 | 第61-144页 |
| 第一章 多菌灵降解菌的分离、筛选及鉴定 | 第61-75页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| 1.1 试剂与培养基 | 第61页 |
| 1.2 降解菌的富集和分离 | 第61页 |
| 1.3 降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第61-62页 |
| 1.4 降解菌株16S rDNA序列的扩增与分析 | 第62-63页 |
| 1.4.1 菌体总DNA的提取 | 第62页 |
| 1.4.2 降解菌株的16S rDNA序列的扩增和酶连 | 第62页 |
| 1.4.3 普通感受态细胞的制备和转化 | 第62-63页 |
| 1.5 降解菌株的系统发育分析 | 第63页 |
| 1.6 多菌灵含量的测定方法 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-72页 |
| 2.1 降解菌株的富集和分离 | 第63-64页 |
| 2.2 降解菌株的形态和培养特征 | 第64-65页 |
| 2.3 降解菌株的生理生化特征 | 第65-66页 |
| 2.4 降解菌株的16S rDNA鉴定 | 第66页 |
| 2.5 降解菌株的系统进化分析 | 第66-68页 |
| 2.6 环境条件对降解菌株生长的影响 | 第68-72页 |
| 2.6.1 温度对降解菌株生长的影响 | 第68-69页 |
| 2.6.2 pH值对降解菌株生长的影响 | 第69页 |
| 2.6.3 通气量对降解菌株生长的影响 | 第69-70页 |
| 2.6.4 NaCl浓度对降解菌株生长的影响 | 第70页 |
| 2.6.5 降解菌株的碳源利用情况 | 第70页 |
| 2.6.6 降解菌株的氮源利用情况 | 第70-71页 |
| 2.6.7 降解菌株的抗生素耐受情况 | 第71-72页 |
| 3 本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
| 第二章 多菌灵降解菌降解特性研究 | 第75-85页 |
| 1 材料与方法 | 第75-76页 |
| 1.1 供试菌株、培养基及试剂 | 第75页 |
| 1.2 菌株的培养和接种 | 第75页 |
| 1.3 土壤浸出液的制备 | 第75页 |
| 1.4 多菌灵含量的测定 | 第75-76页 |
| 2 结果与讨论 | 第76-83页 |
| 2.1 降解菌利用多菌灵作为唯一碳氮源利用情况 | 第76-77页 |
| 2.2 温度对降解菌降解多菌灵的影响 | 第77-78页 |
| 2.3 pH值对降解菌降解多菌灵的影响 | 第78页 |
| 2.4 盐浓度对降解菌降解多菌灵的影响 | 第78-79页 |
| 2.5 通气量对降解菌降解多菌灵的影响 | 第79-80页 |
| 2.6 接种量对降解菌降解多菌灵的影响 | 第80页 |
| 2.7 添加营养物质对降解菌降解多菌灵的影响 | 第80-81页 |
| 2.8 添加金属离子对降解菌降解多菌灵的影响 | 第81-82页 |
| 2.9 降解菌的降解谱 | 第82-83页 |
| 3 本章小结 | 第83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第三章 多菌灵降解菌dj1-6分类地位研究 | 第85-101页 |
| 1 材料与方法 | 第85-90页 |
| 1.1 菌株、培养基及试剂 | 第85页 |
| 1.2 API鉴定系统分析 | 第85页 |
| 1.3 Biolog鉴定系统分析 | 第85-86页 |
| 1.4 菌株多相分类研究 | 第86-88页 |
| 1.4.1 细胞脂肪酸分析 | 第86页 |
| 1.4.2 醌组分分析 | 第86-87页 |
| 1.4.3 细胞氨基酸、糖组分分析 | 第87-88页 |
| 1.5 菌株基因型特性分析 | 第88-90页 |
| 1.5.1 菌株G+Cmol%的测定 | 第88-89页 |
| 1.5.2 DNA-DNA同源性测定 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-98页 |
| 2.1 生理生化特性比较 | 第90-91页 |
| 2.2 Biolog鉴定结果 | 第91-93页 |
| 2.3 API鉴定结果 | 第93页 |
| 2.4 细胞脂肪酸成分分析 | 第93-95页 |
| 2.5 细胞氨基酸、糖组分分析 | 第95页 |
| 2.6 菌株醌组分分析 | 第95-96页 |
| 2.7 菌株G+Cmol%含量测定 | 第96-97页 |
| 2.8 菌株DNA-DNA同源性分析 | 第97-98页 |
| 3 本章小结 | 第98页 |
| 参考文献 | 第98-101页 |
| 第四章 多菌灵降解菌dj1-6酶学特性研究 | 第101-119页 |
| 第一节 多菌灵降解酶提取方法研究 | 第101-106页 |
| 1 材料与方法 | 第101-102页 |
| 1.1 菌株、培养基、试剂及仪器设备 | 第101-102页 |
| 1.2 粗酶液的制备 | 第102页 |
| 1.3 降解酶的定位 | 第102页 |
| 1.4 降解酶的类型 | 第102页 |
| 1.5 蛋白质含量的测定 | 第102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-106页 |
| 2.1 菌株生长曲线和产酶曲线 | 第102-103页 |
| 2.2 蛋白质标准曲线 | 第103-104页 |
| 2.3 常规提酶方法对提取量和酶活的影响 | 第104页 |
| 2.4 降解酶的定域 | 第104-105页 |
| 2.5 降解酶的类型 | 第105-106页 |
| 第二节 多菌灵降解酶粗酶液反应体系的建立 | 第106-109页 |
| 1 材料与方法 | 第106页 |
| 1.1 菌株、培养基及试剂 | 第106页 |
| 1.2 粗酶液的制备 | 第106页 |
| 1.3 酶活测定反应体系 | 第106页 |
| 2.结果与分析 | 第106-109页 |
| 2.1 pH对多菌灵酶促降解的影响 | 第106-107页 |
| 2.2 温度对酶促降解的影响 | 第107页 |
| 2.3 酶的反应进程曲线 | 第107-108页 |
| 2.4 酶浓度曲线 | 第108-109页 |
| 第三节 多菌灵降解酶的特性研究 | 第109-112页 |
| 1.材料与方法 | 第109页 |
| 1.1 菌种、培养基及试剂 | 第109页 |
| 1.2 降解酶的提取方法 | 第109页 |
| 1.3 酶活测定的反应体系 | 第109页 |
| 2 结果与分析 | 第109-112页 |
| 2.1 降解酶的酸碱稳定性 | 第109-110页 |
| 2.2 降解酶的热稳定性 | 第110页 |
| 2.3 金属离子对酶活测定的影响 | 第110-111页 |
| 2.4 表面活性剂对酶活测定的影响 | 第111-112页 |
| 第四节 多菌灵降解酶的初步分离纯化 | 第112-116页 |
| 1 材料与方法 | 第112-113页 |
| 1.1 菌种、培养基及试剂 | 第112页 |
| 1.2 降解酶的提取方法 | 第112页 |
| 1.3 酶活测定的反应体系 | 第112页 |
| 1.4 非变性蛋白质电泳相关试剂、溶液配方 | 第112页 |
| 1.5 降解酶的硫酸铵沉淀粗分 | 第112页 |
| 1.6 降解酶的考染和酯酶染色 | 第112-113页 |
| 1.7 降解酶的初步分离纯化 | 第113页 |
| 2 结果与分析 | 第113-116页 |
| 2.1 降解酶的硫酸铵沉淀粗分 | 第113-114页 |
| 2.2 降解酶的酯酶染色及酶谱分析 | 第114-115页 |
| 2.3 降解酶的初步分离纯化 | 第115-116页 |
| 3 本章小结 | 第116页 |
| 参考文献 | 第116-119页 |
| 第五章 多菌灵代谢途径分析 | 第119-127页 |
| 1 材料与方法 | 第119-120页 |
| 1.1 供试菌株、培养基、试剂 | 第119-120页 |
| 1.2 代谢产物提取方法 | 第120页 |
| 1.3 多菌灵HPLC-MS分析 | 第120页 |
| 2 结果与分析 | 第120-125页 |
| 2.1 菌株生长和降解的关系 | 第120-121页 |
| 2.2 代谢产物累积的HPLC检测 | 第121-123页 |
| 2.3 代谢产物的HPLC-MS分析 | 第123-125页 |
| 3 本章小结 | 第125页 |
| 参考文献 | 第125-127页 |
| 第六章 多菌灵降解菌dj1-6应用特性研究 | 第127-144页 |
| 第一节 环境条件对dj1-6降解土壤中多菌灵的影响 | 第127-135页 |
| 1 材料与方法 | 第127-128页 |
| 1.1 供试菌株、培养基及土样 | 第127-128页 |
| 1.2 土壤中多菌灵及降解菌dj1-6的施用 | 第128页 |
| 1.3 土壤中多菌灵的提取及检测 | 第128页 |
| 2 结果与分析 | 第128-134页 |
| 2.1 土壤水分含量对降解的影响 | 第128-129页 |
| 2.2 土壤pH值对降解的影响 | 第129-130页 |
| 2.3 土壤温度对降解的影响 | 第130页 |
| 2.4 接种量多少对降解的影响 | 第130-131页 |
| 2.5 添加外源有机物质对降解的影响 | 第131-132页 |
| 2.6 灭菌和未灭菌土壤对降解的影响 | 第132-134页 |
| 2.7 淹水和非淹水条件对降解的影响 | 第134-135页 |
| 第二节 多菌灵和降解菌的施用对土壤酶活性的影响 | 第135-144页 |
| 1 材料与方法 | 第135-137页 |
| 1.1 供试菌株、培养基及土样 | 第135页 |
| 1.2 土壤中多菌灵及降解菌dj1-6的施用 | 第135页 |
| 1.3 土壤酶活性的检测 | 第135-137页 |
| 1.3.1 土壤过氧化氢酶活性的测定 | 第135页 |
| 1.3.2 土壤脱氢酶活性的测定 | 第135页 |
| 1.3.3 土壤蔗糖酶活性的测定 | 第135-136页 |
| 1.3.4 土壤脲酶活性的测定 | 第136-137页 |
| 2 结果与分析 | 第137-143页 |
| 2.1 多菌灵的使用对土壤过氧化氢酶活性的影响 | 第137-138页 |
| 2.2 多菌灵的使用对土壤脱氢酶活性的影响 | 第138-140页 |
| 2.3 多菌灵的使用对土壤蔗糖酶活性的影响 | 第140-142页 |
| 2.4 多菌灵的使用对土壤脲酶活性的影响 | 第142-143页 |
| 3 本章小结 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-147页 |
| 全文总结 | 第147-149页 |
| 论文创新点 | 第149-151页 |
| 附录1 文中所用培养基及试剂配方 | 第151-153页 |
| 附录2 降解菌株的16S rDNA序列 | 第153-157页 |
| 附录3 攻读博士学位期间发表的文章 | 第157-159页 |
| 致谢 | 第159页 |