| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 文献综述 | 第14-34页 |
| 第一章 HER2 与肿瘤 | 第14-24页 |
| ·HER2 基因 | 第14-18页 |
| ·HER2 分子的结构 | 第14-15页 |
| ·HER2 及其家族的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·HER 信号转导网络 | 第16-18页 |
| ·HER2 与肿瘤 | 第18-21页 |
| ·HER2/neu 过表达与肿瘤发生 | 第18-19页 |
| ·HER2/neu 过表达与肿瘤转移 | 第19页 |
| ·HER2/neu 与肿瘤细胞增殖、分化 | 第19-20页 |
| ·HER2/neu 与抑制肿瘤细胞凋亡 | 第20页 |
| ·HER2/neu 与肿瘤血管生成 | 第20页 |
| ·HER2/neu 过表达与肿瘤的耐药性和不良预后 | 第20-21页 |
| ·HER2/neu 与肿瘤治疗 | 第21-24页 |
| ·基因治疗抑制 HER2/neu 的过表达 | 第21页 |
| ·HER2/neu 与RNA 干扰 | 第21-22页 |
| ·HER2/neu 与抗体治疗 | 第22-24页 |
| 第二章 uPAR 的结构与功能 | 第24-34页 |
| ·uPAR 基因 | 第24-29页 |
| ·uPAR 的分子结构 | 第24-25页 |
| ·与uPAR 相互作用的表面分子 | 第25-27页 |
| ·uPAR 与信号转导 | 第27-29页 |
| ·uPAR 的生物学功能及与肿瘤的关系 | 第29-33页 |
| ·uPA/uPAR 蛋白酶水解系统 | 第29-30页 |
| ·uPAR 与细胞趋化作用 | 第30页 |
| ·uPAR 与细胞黏附作用 | 第30-31页 |
| ·uPAR 与肿瘤细胞的增殖与凋亡 | 第31-32页 |
| ·uPAR 与肿瘤侵袭 | 第32-33页 |
| ·uPAR 与肿瘤的治疗 | 第33-34页 |
| 实验研究 | 第34-94页 |
| 第三章 针对HER2 和uPAR 基因的RNAi 表达载体的构建及HER2 与uPAR 基因表达上相互调控的研究 | 第34-64页 |
| ·材料 | 第34-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·细胞系 | 第34-35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·DNA oligos 序列的设计与合成 | 第36-37页 |
| ·Real time PCR 引物序列 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-50页 |
| ·RNA 干扰表达载体的构建 | 第37-42页 |
| ·细胞培养 | 第42-43页 |
| ·IF 方法对3 种乳腺癌细胞系HER2 和uPAR 表达的测定 | 第43页 |
| ·质粒表达载体细胞转染条件的优化 | 第43-44页 |
| ·Northern blot 检测siRNA 表达情况 | 第44-46页 |
| ·RNA 干扰不同时间段靶基因mRNA 水平的测定 | 第46-47页 |
| ·RNA 干扰不同时间段靶基因蛋白表达水平的测定 | 第47-49页 |
| ·乳腺癌细胞中HER2 与uPAR 两种基因表达的交叉影响 | 第49-50页 |
| ·统计学分析 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-61页 |
| ·RNA 干扰表达载体构建结果 | 第50-52页 |
| ·质粒准备 | 第52页 |
| ·IF 方法对3 种乳腺癌细胞系HER2 和uPAR 表达水平的测定结果 | 第52-54页 |
| ·质粒转染条件优化及转染效率的测定结果 | 第54页 |
| ·Northern blot 检测结果 | 第54-55页 |
| ·RNA 干扰不同时间段靶基因mRNA 水平的测定结果 | 第55-56页 |
| ·RNA 干扰不同时间段靶基因蛋白表达水平的测定结果 | 第56-57页 |
| ·单独或同时干扰HER2 与uPAR 对此两基因表达交叉影响结果 | 第57-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第四章 抑制 HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、细胞周期等特性的影响的研究 | 第64-78页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·重组质粒 | 第64-65页 |
| ·细胞系 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·试验方法 | 第65-68页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第66页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞周期的影响 | 第66-67页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞侵袭力的影响 | 第67-68页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对MAPK 信号通路的影响 | 第68页 |
| ·统计学分析 | 第68页 |
| ·试验结果 | 第68-74页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞增殖影响的结果 | 第68-70页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞凋亡影响的结果 | 第70-72页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞周期影响的结果 | 第72页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对乳腺癌细胞侵袭力影响的结果 | 第72-73页 |
| ·抑制HER2 和uPAR 基因的表达对MAPK 信号通路影响的结果 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| ·小结 | 第77-78页 |
| 第五章 抑制uPAR 基因的表达促进乳腺癌细胞对Herceptin 的敏感性的研究 | 第78-94页 |
| ·材料 | 第78-79页 |
| ·重组质粒 | 第78页 |
| ·细胞系 | 第78页 |
| ·实验动物 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·主要仪器 | 第78-79页 |
| ·试验方法 | 第79-81页 |
| ·体外试验 | 第79-80页 |
| ·动物试验 | 第80-81页 |
| ·统计学分析 | 第81页 |
| ·结果 | 第81-92页 |
| ·Herceptin 对乳腺癌细胞系治疗最佳剂量的确定 | 第81-82页 |
| ·Herceptin 和puPAR 联合用药对乳腺癌细胞增殖影响的结果 | 第82-83页 |
| ·Herceptin 和puPAR 联合用药对乳腺癌细胞凋亡影响的结果 | 第83-84页 |
| ·Herceptin 和puPAR 联合用药对乳腺癌细胞系细胞周期影响的结果 | 第84-85页 |
| ·Herceptin 和puPAR 联合用药对乳腺癌细胞侵袭力影响的结果 | 第85-86页 |
| ·Herceptin 和puPAR 联合用药对ERK 信号通路影响的结果 | 第86-87页 |
| ·荷瘤鼠模型的制备 | 第87-88页 |
| ·确立干扰质粒最佳治疗剂量的结果 | 第88页 |
| ·确立Herceptin 最佳治疗剂量的结果 | 第88-89页 |
| ·荷瘤鼠治疗模型的建立 | 第89页 |
| ·荷瘤鼠治疗模型中肿瘤体积连续监测结果 | 第89-90页 |
| ·荷瘤鼠治疗模型中最终肿瘤质量测定结果 | 第90页 |
| ·real time PCR 检测肿瘤组织中HER2 和uPAR mRNA 水平的结果 | 第90-91页 |
| ·western blot 检测肿瘤组织中HER2 和uPAR 蛋白表达水平的结果 | 第91-92页 |
| ·讨论 | 第92-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 结论 | 第94-95页 |
| 本文的创新点和后续试验 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-110页 |
| 英文缩写词表 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 个人简介 | 第112页 |
