| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-33页 |
| 第一章 轮状病毒、益生菌及其相关研究进展 | 第13-33页 |
| ·肠上皮细胞在先天性免疫中的作用 | 第14-18页 |
| ·屏障功能 | 第14-15页 |
| ·参与肠黏液层的组成 | 第15-16页 |
| ·产生免疫反应调节剂 | 第16-17页 |
| ·肠上皮细胞的免疫监测功能和TLR | 第17-18页 |
| ·RV 及其致病免疫机制 | 第18-22页 |
| ·RV 和RV 感染 | 第18-19页 |
| ·RV 的致病机制 | 第19-21页 |
| ·RV 感染的免疫保护机制 | 第21-22页 |
| ·益生菌及其对机体免疫作用的影响 | 第22-29页 |
| ·益生菌及其益生作用 | 第22-23页 |
| ·益生菌在预防或治疗肠道炎性疾病的机制 | 第23-29页 |
| ·RV 感染的Gn 猪模型研究进展 | 第29-33页 |
| ·应用RV 感染的Gn 猪模型对RV 感染发病机理的研究 | 第30页 |
| ·应用RV 感染的Gn 猪模型对RV 感染相关免疫问题的研究 | 第30-31页 |
| ·应用RV 感染的Gn 猪模型研究益生菌对RV 感染的免疫调节作用 | 第31-33页 |
| 试验研究 | 第33-80页 |
| 第二章 以轮状病毒感染的猪小肠上皮细胞为模型研究肠上皮细胞对轮状病毒和益生菌的先天免疫应答反应 | 第33-50页 |
| ·材料与方法 | 第33-38页 |
| ·猪小肠上皮细胞 | 第33-34页 |
| ·病毒 | 第34页 |
| ·益生菌株 | 第34页 |
| ·RV 感染和益生菌处理IPEC-J2 细胞的方案 | 第34-35页 |
| ·用TLR 配基和益生菌总DNA 刺激IPEC-J2 细胞 | 第35页 |
| ·用免疫荧光法检测RV 感染的细胞 | 第35页 |
| ·用CCIF 测定RV 滴度 | 第35-36页 |
| ·用ELISA 测定RV 抗原 | 第36页 |
| ·用PAS 染色法检测IPEC-J2 细胞产生的黏蛋白 | 第36页 |
| ·用ELISA 检测细胞培养上清中的黏蛋白 | 第36-37页 |
| ·用ELISA 检测细胞培养上清中细胞因子的产量 | 第37页 |
| ·用流式细胞技术检测TLR2、TLR3 和TLR9 在细胞上的表达 | 第37-38页 |
| ·数据统计分析 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-44页 |
| ·RV 感染IPEC-J2 细胞 | 第38页 |
| ·益生菌对RV 在IPEC-J2 细胞上感染力的影响 | 第38-39页 |
| ·IPEC-J2 细胞产生的黏蛋白及益生菌对黏蛋白分泌和表达的的影响 | 第39-41页 |
| ·RV 感染和TLR 配体PGN、PolyI:C 和CpG 刺激IPEC-J2 细胞后的细胞因子反应 | 第41页 |
| ·益生菌对RV 感染细胞细胞因子IL-6 和IL-8 反应的影响 | 第41页 |
| ·益生菌对IPEC-J2 细胞TLR2、TLR3 和TLR9 表达的影响 | 第41-44页 |
| ·益生菌总DNA 对IPEC-J2 细胞TLR2 和TLR9 表达的影响 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第三章 以轮状病毒感染的猪小肠上皮细胞为模型研究轮状病毒和益生菌对肠上皮细胞屏障功能的影响 | 第50-62页 |
| ·材料与方法 | 第50-53页 |
| ·猪小肠上皮细胞 | 第50-51页 |
| ·病毒 | 第51页 |
| ·益生菌株 | 第51页 |
| ·测定IPEC-J2 细胞的TEER | 第51页 |
| ·分析IPEC-J2 细胞单层的渗透性 | 第51-52页 |
| ·用Western Blot 确定TJ 蛋白和AJ 蛋白在IPEC-J2 细胞中的表达 | 第52页 |
| ·用免疫荧光染色法确定TJ 蛋白和AJ 蛋白在IPEC-J2 细胞上的分布 | 第52-53页 |
| ·数据统计分析 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-57页 |
| ·RV 感染和/或益生菌处理对IPEC-J2 细胞单层TEER 的影响 | 第53页 |
| ·RV 感染和/或益生菌处理对IPEC-J2 细胞单层通透性的影响 | 第53-55页 |
| ·RV 感染和/或益生菌处理对IPEC-J2 细胞TJ 蛋白和AJ 蛋白的影响 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第四章 以轮状病毒感染的悉生猪为模型研究益生菌对轮状病毒腹泻的保护机制 | 第62-80页 |
| ·材料与方法 | 第62-65页 |
| ·病毒 | 第62页 |
| ·益生菌株 | 第62页 |
| ·Gn 猪的分组和接种 | 第62-63页 |
| ·样品收集 | 第63页 |
| ·检测LGG 的体外排出情况 | 第63页 |
| ·用ELISA 和CCIF 检测排出病毒的抗原和病毒滴度 | 第63页 |
| ·用ELISA 检测SIC 和LIC 中MUC3 黏蛋白的产量 | 第63页 |
| ·体外评价回肠通透性 | 第63-64页 |
| ·用Western Blot 定量TJ 和AJ 蛋白 | 第64页 |
| ·用免疫荧光法对回肠上皮组织中的TJ 和AJ 蛋白定位 | 第64-65页 |
| ·用ELISA 检测血清和肠内容物中的细胞因子浓度 | 第65页 |
| ·数据统计分析 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-75页 |
| ·LGG 的Gn 猪肠道的定植情况 | 第65页 |
| ·临诊症状和hRV 感染的情况 | 第65-66页 |
| ·Gn 猪肠道MUC3 黏蛋白 | 第66页 |
| ·Gn 猪回肠通透性 | 第66页 |
| ·Gn 猪回肠和结肠TJ 和AJ 蛋白 | 第66-72页 |
| ·Gn 猪血清中的细胞因子水平 | 第72页 |
| ·Gn 猪SIC 和LIC 的细胞因子水平 | 第72-75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 作者简介 | 第101-102页 |
